高分辨率熔解曲線分析檢測常見β-地中海貧血突變的方法學(xué)建立及其在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的：
　　β-地中海貧血是最常見的單基因遺傳病之一,重型β-地中海貧血死亡率極高,預(yù)防該病主要依賴于基因診斷,但常用的反向斑點(diǎn)雜交法耗時(shí)長、結(jié)果不穩(wěn)定,有時(shí)出現(xiàn)假陽性與假陰性,而高分辨率熔解曲線分析(HRM)具有快速、靈敏度高、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)。本研究旨在建立檢測常見β-地中海貧血突變的HRM方法,并進(jìn)一步探討該方法在產(chǎn)前診斷應(yīng)用的可行性,以期建立β-地中海貧血產(chǎn)前基因診斷的第二技術(shù)驗(yàn)證平臺(tái)。
　　方法：
　　1.選取

2、1例經(jīng)測序證實(shí)的無β-珠蛋白基因突變的健康對(duì)照者、21例經(jīng)測序證實(shí)基因型為-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42,-28/CD17、-28/IVS-Ⅱ-654、-28/CDs71-72的基因組DNA,建立應(yīng)用HRM檢測常見β-地中海貧血基因突變的方法。
　　2.應(yīng)用建立的HRM方法隨機(jī)檢測78例父母雙方均為β-地中海貧血突變攜帶者的產(chǎn)前診斷標(biāo)

3、本(羊水、臍血、絨毛),同時(shí)行反向斑點(diǎn)雜交法(RDB)及DNA測序?qū)Ρ葘?shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果：
　　1.所建立的HRM法能準(zhǔn)確檢測出21例β-地中海貧血突變,包括-28、CD17、CDs41-42、CDs71-72、IVS-Ⅱ-654、CDs41-42/71-72,-28/CDs41-42等
　　2.HRM法對(duì)78例父母雙方均為β-地中海貧血基因攜帶者的產(chǎn)前診斷標(biāo)本進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示:與RDB法及DNA測序結(jié)果一致,且通過測