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文檔簡介
1、目的:增殖抑制基因(HSG)能夠有效的阻遏細胞周期和抑制細胞增殖,同時在球囊血管成形術后立即定向局部轉染rHSG/Mfn2的措施能夠抑制新生內(nèi)膜的生長和血管壁的重塑。該實驗主要應用腺病毒介導的轉基因方式轉染HSG,以觀察HSG對肝癌細胞增殖的影響以及其治療作用。 方法:利用Western Blot以及RT—PCR的方法檢測肝癌組織以及相應癌旁組織中HSG的表達。體外培養(yǎng)肝癌細胞系HepG2并轉染含有HSG基因的重組腺病毒載體(A
2、dHSG),采用CCK8檢測肝癌細胞活力;利用流式細胞儀分析HSG對細胞周期的影響;應用Western Blot方法檢測HSG對細胞周期蛋白激酶抑制劑(cyclin—dependent kinase inhibitor,CDKI)p21、p27及細胞增殖核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)的作用。同時建立間接和直接裸鼠皮下肝癌種植瘤的模型,檢測HSG對肝癌的治療作用。 結果:肝細
3、胞肝癌患者肝癌組織中HSG的表達明顯低于相應的癌旁組織(p<0.05)。AdHSG轉染培養(yǎng)的HepG2后,HSG表達量明顯升高,能明顯抑制細胞活力;細胞周期阻滯在G0/G1期,周期調(diào)控蛋白p21、p27表達升高,PCNA表達降低。同時在裸鼠皮下肝癌模型中注射HSG后可以明顯抑制腫瘤的生長。 結論:HSG基因過表達可以抑制肝癌的生長,并可能是通過參與細胞周期調(diào)節(jié)發(fā)揮作用。提示HSG在認識和治療包括腫瘤在內(nèi)的細胞增殖性疾病有重要的啟
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