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1、目的:在miRNA表達(dá)譜芯片結(jié)果的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步確定異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤外周血共性miRNA標(biāo)志物,為實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)民族醫(yī)學(xué)的現(xiàn)代化和標(biāo)準(zhǔn)化做一份貢獻(xiàn)。
方法:收集異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血60例,非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血64例,健康志愿者外周血21例,從白細(xì)胞分離RNA。小樣品通過(guò)miRNA表達(dá)譜芯片,篩選異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤差異表達(dá)候選miRNA。其中選取7種候選miRNA,設(shè)計(jì)序列特異性引物,利用熒
2、光定量PCR方法檢測(cè),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,確定異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤外周血共性miRNA標(biāo)志物。
結(jié)果:通過(guò)miRNA表達(dá)譜芯片分析,篩選23種上調(diào)表達(dá)和12種下調(diào)表達(dá)的異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血共性miRNA標(biāo)記物。本實(shí)驗(yàn)選擇6個(gè)上調(diào)和1個(gè)下調(diào)的異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤患者外周血共性miRNA。利用熒光定量PCR方法,定量檢測(cè)表達(dá)水平。與正常組比較,在異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組的表達(dá)量最高,在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組
3、表達(dá)量降低,除了miR-31-3p,其他6個(gè)miRNA的表達(dá)水平與miRNA表達(dá)譜芯片結(jié)果一致。與正常組比較,在異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中miR-4725-5p,miR-4731-3p,miR-4701-3p,miR-4701-5p,miR-3162-3p等五種miRNA的表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與正常組比較,在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中miR-4731-3p,miR-4701-3p,miR-4701-5p等三種miRNA的表達(dá)具
4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組比較,在非異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤組中7種miRNA的表達(dá)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。miR-4725-5p,miR-4731-3p,miR-4701-3p,miR-470-5p, miR-3162-3p等五種miRNA可能是異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤特異性上調(diào)表達(dá)miRNA。
結(jié)論:異常黑膽質(zhì)型消化系統(tǒng)腫瘤發(fā)生發(fā)展與多種miRA的表達(dá)水平關(guān)系密切。miR-4725-5p,miR-4731-3p,
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