復(fù)雜性疾病維吾爾醫(yī)異常黑膽質(zhì)證的代謝組學(xué)研究.pdf

1、維吾爾醫(yī)學(xué)作為人類傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)寶庫中的重要成員，在復(fù)雜、難治性疾病的防治方面發(fā)揮著重要作用。維吾爾醫(yī)學(xué)體液學(xué)說是一種說明人體體液的來源、種類及其應(yīng)用的學(xué)說，認(rèn)為體液是以各種營養(yǎng)物質(zhì)為原料生成的復(fù)雜物質(zhì)的總成，包括膽液質(zhì)(sapra hilit)、血液質(zhì)(kanhilit)、粘液質(zhì)(belghem hilit)和黑膽質(zhì)(savda hilit)等四種體液。這四種體液在體內(nèi)相互轉(zhuǎn)換、補(bǔ)充并不斷的循環(huán)于整個(gè)人體，如果其比例發(fā)生變化就會(huì)產(chǎn)生異常體液

2、(abnormal hilit)，從而發(fā)生病理變化。根據(jù)變化的程度、所起的作用及產(chǎn)生的癥狀、導(dǎo)致的疾病類型等將異常體液質(zhì)分為異常膽液質(zhì)(abnormal sapra)、異常血液質(zhì)(abnormalkan)、異常粘液質(zhì)(abnormal belghem)和異常黑膽質(zhì)(abnormal savda)四種類型，尤其是異常黑膽質(zhì)的出現(xiàn)是體液發(fā)生異常變化的主要特征。異常黑膽質(zhì)型體液與其它異常體液質(zhì)比較，它的致病性、危險(xiǎn)性、惡性程度是最高的，在難治

3、性疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中起主導(dǎo)作用，是導(dǎo)致腫瘤、糖尿病、哮喘等復(fù)雜性疾病的主要原因和共同的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。新興的代謝組學(xué)是系統(tǒng)生物學(xué)的一個(gè)重要組成部分，是通過對(duì)機(jī)體或細(xì)胞內(nèi)、外所有小分子代謝物的定性定量監(jiān)測，反映研究對(duì)象對(duì)環(huán)境條件變化或者基因變化所產(chǎn)生的應(yīng)答，從而揭示生物體整體性代謝變化情況。維醫(yī)對(duì)疾病辨證分型的出發(fā)點(diǎn)是機(jī)體內(nèi)在代謝差異的外在表現(xiàn)，這與代謝組學(xué)所反映的內(nèi)容不謀而合。因此代謝組學(xué)用于維醫(yī)藥學(xué)的研究能夠賦予古老的維醫(yī)藥學(xué)更加

4、客觀、科學(xué)的理論依據(jù)，更能促進(jìn)維醫(yī)藥學(xué)的現(xiàn)代化和健康發(fā)展。本研究以復(fù)雜性疾病(腫瘤、糖尿病、哮喘)患者為研究對(duì)象，根據(jù)維醫(yī)理論把患者分為不同的證型，用核磁共振波譜技術(shù)測定患者血漿代謝物成分及相對(duì)含量、闡述不同證型復(fù)雜性疾病的體內(nèi)代謝組學(xué)特點(diǎn)，找出與復(fù)雜性疾病發(fā)生、發(fā)展有關(guān)的潛在的特異性代謝標(biāo)志物，從而對(duì)復(fù)雜性疾病的早期診斷和防治工作提供一定的基礎(chǔ)、初步形成能夠用于復(fù)雜性疾病早期診斷和預(yù)后評(píng)價(jià)的判別體系。
　　 材料與方法：

5、>　　 樣本：
　　 1.通過體檢確定其身體健康的志愿者50例，新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院診治的223例異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者，異常黑膽質(zhì)型患者的體液分型根據(jù)維吾爾醫(yī)學(xué)體液分型的分類標(biāo)準(zhǔn)確定。收集患者早餐前空腹血液并離心分離血漿。
　　 2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院確診為Ⅱ型糖尿病的患者共130例；健康志愿者50例。收集患者和志愿者早餐前空腹血液并離心分離血清，保存在-80℃低溫冰箱中待測。
　　 3.新疆醫(yī)科大學(xué)

6、第一附屬醫(yī)院、新疆醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院診斷為支氣管哮喘的患者，并符合異常黑膽質(zhì)證標(biāo)準(zhǔn)的患者35例，健康志愿者35例。
　　 方法：
　　 樣品從低溫冰箱中取出、解凍并用核磁共振波譜議測定每一個(gè)樣品的1H-NMR譜。對(duì)所有的圖譜進(jìn)行傅立葉變換后進(jìn)行基線及相位調(diào)整并進(jìn)行分段自動(dòng)積分。用SIMCA-P+11軟件采用正交偏最小二乘判別分析(Orthogonal partial least-squares discriminant

7、 analysis，OPLS-DA)法進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.腫瘤：
　　 異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者血漿中多種氨基酸顯著下降，包括亮氨酸、丙氨酸、瓜氨酸、酪氨酸、組氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、乙酰半胱氨酸等，與健康人血漿代謝物比較差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。此外，糖蛋白、谷氨酰胺、肌醇、鯊肌醇、乳酸、膽堿、肌酸也顯著下降，與健康人血漿代謝物比較差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。同時(shí)，

8、異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者血漿中甲酸、丙酮、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、β-羥丁酸、肉堿、丙二酸以及脂肪分解產(chǎn)物多不飽和脂肪酸、VLDL、LDL等明顯增加，與健康人血漿代謝物比較差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。α-葡萄糖和β-葡萄糖在兩組中沒有顯著性差異(p>0.05)。異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者體內(nèi)的脂肪動(dòng)員和糖酵解水平比非異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者高，免疫功能的損毀可能更嚴(yán)重，其預(yù)后可能更差。
　　 2.糖尿?。?br>　　 維吾爾醫(yī)異常黑

9、膽質(zhì)型Ⅱ型糖尿病患者血清中除了α-葡萄糖和β-葡萄糖含量高于健康人以外，還有極低密度脂蛋白、不飽和脂類、丙酮等脂肪代謝產(chǎn)物也高于健康人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。同時(shí)，異常黑膽質(zhì)型Ⅱ型糖尿病患者血清多種氨基酸含量顯著下降，與健康人比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，這些氨基酸包括異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、谷氨酸、組氨酸、1-甲基組氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸等。除此之外，異常黑膽質(zhì)型Ⅱ型糖尿病患者血清中與三羧酸循環(huán)有關(guān)的

10、檸檬酸，與葡萄糖無氧氧化有關(guān)的乳酸，與細(xì)胞免疫有關(guān)的鯊肌醇、肌酸、肌酸酐、糖蛋白等代謝物均降低，與健康人比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　 3.哮喘：
　　 異常黑膽質(zhì)型哮喘患者體內(nèi)丙酮、乙酰乙酸、肉堿等代謝物含量高于健康人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。異常黑膽質(zhì)型哮喘患者體內(nèi)的異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、丙氨酸、1-甲基組氨酸等氨基酸含量以及乳酸、糖蛋白、檸檬酸、肌酸、肌酸酐、鯊肌醇等代謝物含量比健康人體內(nèi)的

11、含量低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 本研究以維吾爾醫(yī)學(xué)體液質(zhì)理論為基礎(chǔ)，選擇腫瘤、哮喘、糖尿病等復(fù)雜性疾病為研究對(duì)象，分析異常黑膽質(zhì)在復(fù)雜性疾病發(fā)生發(fā)展過程中的代謝組學(xué)特點(diǎn)，以便對(duì)復(fù)雜性、難治性疾病的預(yù)防和診治提供一定的基礎(chǔ)。本研究發(fā)現(xiàn)異常黑膽質(zhì)證在腫瘤、哮喘、糖尿病等復(fù)雜性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中有著相似的代謝組學(xué)特點(diǎn)。上述三種復(fù)雜性疾病異常黑膽質(zhì)型體液患者體內(nèi)均發(fā)生脂肪動(dòng)員增加，肝線粒體脂肪代

12、謝加強(qiáng)，從而不同患者脂肪代謝產(chǎn)物均升高。除了脂肪代謝發(fā)生異常以外，本研究還發(fā)現(xiàn)異常黑膽質(zhì)型體液患者體內(nèi)多種氨基酸含量明顯減少，這也是異常黑膽質(zhì)型體液在引起不同復(fù)雜性疾病過程中的共同特點(diǎn)。同時(shí)，異常黑膽質(zhì)型體液會(huì)引起機(jī)體免疫功能的下降和多種能量代謝的異常。異常黑膽質(zhì)型體液在引起不同的復(fù)雜性疾病過程中均發(fā)生能量代謝異常、免疫功能降低等多種生理功能的異常。在比較異常黑膽質(zhì)型和非異常黑膽質(zhì)型腫瘤患者血漿代謝物后發(fā)現(xiàn)，兩者存在明顯的代謝組學(xué)差異，