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1、目的:建立符合維醫(yī)臨床證候特征的異常黏液質(zhì)型陽痿病證大鼠模型并綜合評(píng)價(jià),同時(shí)尋找其物質(zhì)基礎(chǔ)。
方法:取100只性功能正常的雄性SD大鼠,從中隨機(jī)抽取10只為正常對(duì)照組(N),余90只為造模組,采用芫荽實(shí)+菠菜實(shí)+濕寒性環(huán)境的干預(yù)條件建立異常黏液質(zhì)證候模型。每日觀察大鼠生物學(xué)表征,經(jīng)確認(rèn)證候模型建立后后通過APO勃起實(shí)驗(yàn)和交配實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)勃起功能與性行為能力,并篩選陽痿病證模型后,將陽痿病證模型再隨機(jī)分為病證模型組(A1)、病證
2、自然反證組(A2)和病證藥物反證組(A3);未成陽痿的證侯模型則隨機(jī)分為證候模型組(B1)、證侯自然反證組(B2)和證侯藥物反證組(B3), 反證時(shí)間2周,并繼續(xù)觀測(cè)其生物學(xué)表征、勃起功能和性行為能力變化情況。2周后放射免疫法檢測(cè)各組大鼠外周血清中性激素水平變化,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈擴(kuò)增反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)陰莖組織中eNOS-mRNA和nNOS-mRNA表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)造模組干預(yù)后出現(xiàn)蜷臥少動(dòng),毛發(fā)亂無光澤,尿液清
3、,大便時(shí)軟時(shí)溏,舌質(zhì)暗,舌苔白膩,體重增長緩慢,飲食量增多,飲水量減少,尿和大便量增多等生物學(xué)表征的改變,且隨造模時(shí)間延長逐漸加重。(2)反證第1周各組生物學(xué)表征均無明顯改變,第2周,病證自然反證組仍無明顯改善,證侯自然反證組可見飲食量減少、飲水量增多、尿便量減少、白膩舌苔減輕等變化,證侯藥物反證組和病證藥物反證組可見較為明顯的飲食量減少、飲水量增多、尿便量減少等變化,且可見其舌質(zhì)偏紅,舌苔薄白。(3)造模第1-8周造模組勃起潛伏期與勃
4、起次數(shù)均與正常組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),第8-20周造模組勃起潛伏期明顯長于正常組,勃起次數(shù)少于正常組(P<0.05)。反證階段,A1、A2勃起潛伏期均顯著長于N,勃起次數(shù)亦少于(P<0.05),余各組在勃起潛伏期和勃起次數(shù)方面與N均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),A1、A2之間勃起潛伏期與勃起次數(shù)組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),A3勃起潛伏期短于A1、A2,勃起次數(shù)較A1、A2多(P<0.05)。(4)造模第20周造模組插入
5、、射精潛伏期長于正常組(P<0.05),次數(shù)少于正常組(P<0.05)。反證階段A1、A2、B1的騎跨、插入和射精潛伏期均長于N,次數(shù)均少于N(P<0.05),A3插入潛伏期、射精潛伏期均短于A1、A2組,插入次數(shù)、射精次數(shù)均多于A1、A2(P<0.05,P<0.05),A1與A2間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);(5)性激素水平 睪酮:A1、A2、B1水平低于N(P<0.05),其余各組與N無差異(P>0.05),A3睪酮水平顯著高于
6、A1和A2(P<0.05),A1與A2間則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),B2、B3水平高于B1(P<0.05)。LH:A1水平顯著高于N(P<0.05),其余各組與N無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。FSH:各組間均無顯著性差異(P>0.05)。E2:A1水平高于N(P<0.05),其余各組與N無差異(P>0.05)。PRL:A1水平高于N(P<0.05),其余各組與N無差異(P>0.05)。(6)eNOS-mRNA表達(dá)情況:A1較N表達(dá)水
7、平顯著降低(P<0.05),其余各組與N 無差異(P>0.05),A1、A2之間表達(dá)水平無顯著性差異(P>0.05),A3表達(dá)較A1增多,B3表達(dá)較B1增多(P<0.05,P<0.05)。nNOS-mRNA表達(dá)情況:A1、A2表達(dá)水平均較N顯著降低(P<0.05),其余各組與N 無差異(P>0.05),A1、A2之間表達(dá)水平無顯著性差異(P>0.05),A3較A1、A2表達(dá)增加,B3表達(dá)較B1增多。
結(jié)論:(1)采取濕寒環(huán)
8、境和濕寒飼料干預(yù)的方法可成功建立維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿證候與病證大鼠模型,其生物學(xué)表征符合維醫(yī)臨床證候特點(diǎn),同時(shí)出現(xiàn)勃起潛伏期顯著延長,性行為能力顯著減退等特點(diǎn),證候模型中陽痿病證模型成模率為56.7%。(2)自然反證和對(duì)證藥物伊木薩克片反證結(jié)果表明,該病證動(dòng)物模型具有較好的科學(xué)性、可靠性和穩(wěn)定性。(3)維醫(yī)異常黏液質(zhì)型陽痿病證模型大鼠外周血清T水平顯著降低,而LH、PRL和E2水平顯著升高,提示異常黏液質(zhì)陽痿病證的發(fā)生可能與性腺軸內(nèi)分泌
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