基于1NMR代謝組學(xué)方法研究阿托伐他汀對肺動脈高壓大鼠的代謝模式影響及分子機制.pdf

1、基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代謝組學(xué)方法是1HNMR波譜檢測技術(shù)和模式識別分析技術(shù)的結(jié)合,不僅可以用于藥物藥效、毒性的評估以及其作用機制的闡明,也可以用于揭示疾病的發(fā)病機制、生物學(xué)標(biāo)志物的篩選和早期診斷。本論文應(yīng)用基于NMR的代謝組學(xué)方法,研究阿托伐他汀對野百合堿誘導(dǎo)的肺動脈高壓大鼠代謝的影響及其分子機制。全文共分為三個部分,各部分內(nèi)容概述如下:
　　第一部分:研究野百合堿誘發(fā)的肺

2、動脈高壓大鼠的NMR代謝組學(xué)變化。對照組大鼠、應(yīng)用MCT腹腔注射構(gòu)建的PAH模型大鼠進行平均肺動脈壓(mPAP)的檢測、右心室肥厚指數(shù)的測定及肺小動脈顯微結(jié)構(gòu)的觀察,并采用NMR技術(shù),進行血清NMR氫譜檢測及分析。研究發(fā)現(xiàn):野百合堿(Monocrotaline,MCT)可以成功建立肺動脈高壓模型,2周就開始出現(xiàn)肺血管重塑,并且肺血管重塑先于壓力升高出現(xiàn)。注射野百合堿后大鼠不同時點出現(xiàn)不同的代謝模式,出現(xiàn)應(yīng)激狀態(tài)和細(xì)胞損傷、針對損傷的代償

3、修復(fù)反應(yīng)、脂肪酸β氧化和Warburg效應(yīng);大鼠肺小動脈的重塑與2、3周出現(xiàn)脂肪酸β氧化和Warburg效應(yīng)代謝模式改變密切相關(guān);肉堿、β-羥丁酸、檸檬酸升高,乙酸、丙酮下降這些指標(biāo)變化可以作為病變嚴(yán)重程度的參考指標(biāo)。
　　第二部分:研究阿托伐他汀治療后肺動脈高壓大鼠的NMR代謝組學(xué)變化。阿托伐他汀治療后的PAH大鼠進行平均肺動脈壓(mPAP)的檢測、右心室肥厚指數(shù)的測定及肺小動脈顯微結(jié)構(gòu)的觀察,并采用NMR技術(shù),進行血清NMR氫

4、譜檢測及分析。研究發(fā)現(xiàn):阿托伐他汀可以明顯改善肺血管重塑,并且與其抑制脂肪酸β氧化和Warburg效應(yīng)相關(guān)。
　　第三部分:用Realtime-PCR方法測肺組織GSK-3β和SERBP-1c、己糖激酶、CPT-1mRNA水平;用Western-Blotting方法測GSK-3β、P-GSK-3β、SERBP-1c及CPT-1蛋白表達。研究發(fā)現(xiàn):MCT注射后GSK-3β表達下降,己糖激酶激活;MCT注射后固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白表達下