紅花對兔耳增生性瘢痕TGFβ1及CTGF表達的影響.pdf

1、目的：增生性瘢痕（HS）發(fā)病機制不明，臨床治療困難。目前眾多實驗發(fā)現活血化瘀類中藥有促進瘢痕軟化的作用。紅花為活血化瘀類中藥的重要代表性藥物。本實驗旨在通過紅花注射治療瘢痕后，觀察其有無促進瘢痕軟化的作用及其對瘢痕轉化生長因子β1（TGFβ1）、結締組織生長因子（CTGF）表達的影響，探討紅花是否具有抑制HS的作用及其可能的分子生物學機制。 方法：27只新西蘭大白兔兔耳腹側建立HS模型，每耳2塊。術后第45天開始對HS行注射治療

2、，1次/周，連續(xù)注射4次。每只兔的耳部HS按注射藥物的不同設為陽性對照組（未進行注射）、生理鹽水組、低濃度紅花（125g/L）組、高濃度紅花（500g/L）組；每只兔右耳正常皮膚設為正常皮膚組。術后第45天、注射后第2、4、6周，分別用SEQUIA512彩色多譜勒超聲診斷儀13HZ高頻探頭檢測HS及皮膚厚度，硬度計測量HS及皮膚硬度[3]。注射后第2、4、6周分別隨機切取8只兔耳HS及皮膚，采用HE及Mallory法染色，觀察并計數表皮

3、細胞層次、真皮成纖維細胞密度、膠原纖維排列及致密度；免疫組織化學方法（SP）檢測每塊組織TGFβ1及CTGF蛋白的表達（TGFβ1及CTGF蛋白面密度及平均光密度）；逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）方法檢測每塊組織TGFβ1-mRNA，CTGF-mRNA的表達。 結果：（1）注射后第2、4、6周，各組HS厚度及硬度均逐漸下降，第4、6周高濃度紅花組HS厚度及硬度均為同期各HS組中最低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其余各

4、HS組間差異無統(tǒng)計學意義。（2）HF及Mallory法染色顯示，注射后第2、4、6周各組HS表皮細胞層次逐漸減少，真皮成纖維細胞密度下降，第4、6周高濃度紅花組表皮細胞層次、真皮成纖維細胞密度均為同期各HS組中最低（P<0.05）；高濃度紅花組注射后第2、4、6周真皮膠原纖維排列逐漸規(guī)則、致密度逐漸下降，陽性對照組、生理鹽水組、低濃度紅花組真皮膠原纖維排列及致密度無明顯變化。（3）免疫組織化學方法（SP）顯示：注射后第2、4、6周，各H

5、S組TGFβ1及CTGF蛋白面密度及平均光密度均呈下降趨勢，其中高濃度紅花組上述4項檢測值均較同時段其它HS組低（P<0.05）；低濃度紅花組TGFβ1蛋白平均光密度，CTGF蛋白面密度及平均光密度在3個時段均較陽性對照及生理鹽水組低（P<0.05）。（4）RT-PCR顯示：注射后第2、4、6周，兩種濃度紅花組TGFβ1-mRNA及CTGF-mRNA的表達均逐漸降低，尤以高濃度紅花組明顯，各時段高濃度紅花組較其它HS組低（P<0.05）

6、；低濃度紅花組TGFβ1-mRNA的表達在注射后第4、6周，CTGF-mRNA的表達在注射后第2、4、6周均較陽性對照及生理鹽水低（P<0.05）。 結論：（1）高濃度紅花局部注射，可促進兔耳HS軟化、變薄、表皮細胞層次減少、真皮成纖維細胞密度降低，膠原纖維排列整齊，致密度下降，低濃度紅花此作用不明顯。（2）高、低濃度紅花均能抑制兔耳HS的TGFβ1和CTGF的表達，高濃度紅花的作用較低濃度紅花強。 （3）兔耳HS模型的