黃芪對增生性瘢痕TGF-β1的表達及其Smad3信號途徑的影響.pdf

1、目的：以穩(wěn)定有效的兔耳瘢痕為模型，通過對兔耳瘢痕的形態(tài)學、組織學、增生性瘢痕的厚度及硬度、轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）及其Smad3信號表達的觀察，探討黃芪對兔耳創(chuàng)面瘢痕增生的抑制效應和初步機制，為黃芪在臨床的應用提供實驗和理論依據(jù)。
　　 方法：健康成年日本大耳白兔24只，體重1.8～2.5kg，兔耳健全，雌雄不論，用隨機數(shù)字表法分為6組：其中實驗組3組：A組：濃度為1000 mg/ml黃芪治療組（高）、B組：濃度為500

2、 mg/ml黃芪治療組（中）、C組：濃度為250 mg/ml黃芪治療組（低）。對照組3組：D組：相同容積的生理鹽水對照組、空白對照組E組：未處理的瘢痕組、陰性對照組F組：正常兔耳皮膚，A、B、C、D、E、F各4只兔子，除外正常皮膚組，在每側的兔耳腹側中部做4個邊長為1cm的正方形切口，創(chuàng)面間相距1cm，共160個創(chuàng)面。傷后21d局部注射黃芪液或生理鹽水，注射用量為0.2ml。在術后32d和43d，分2-次切取標本，采用彩色超聲診斷儀（探

3、頭超聲頻率為13MHz）、瘢痕硬度精密測定儀分別測定不同時間的瘢痕和正常皮膚厚度和硬度及光鏡下觀察蘇木精.伊紅染色、Masson三色法膠原染色的組織結構變化情況；采用RT-PCR、免疫組織化學法觀察瘢痕和正常皮膚組織中TGF-β1、Smad3mRNA水平和蛋白表達的變化。
　　 結果：（1）術后8～12d創(chuàng)面結痂，16d創(chuàng)面逐漸上皮化、痂殼松動并開始脫落；21d創(chuàng)面全部上皮化，可見瘢痕增生明顯；術后28d瘢痕增生達高峰；43d逐

4、漸進入消退期。（2）HE、Masson染色顯示：黃芪實驗組真皮層變薄，成纖維細胞數(shù)量較少，膠原纖維排列規(guī)則，無膠原結節(jié)或者膠原結節(jié)不明顯；生理鹽水對照組及空白對照組真皮層較厚，成纖維細胞密集，膠原纖維排列紊亂或成旋渦狀，形成膠原結節(jié)；陰性對照組正常皮膚組織膠原束細小，排列規(guī)則。（3）黃芪實驗組兔耳瘢痕變薄、硬度降低，TGF-β1及其Smad3信號的表達降低，與對照組相比，差異均有顯著性（P<0.05），實驗組在傷后32d、43d時兩組間

5、差異也均有顯著性（P<0.05），而生理鹽水對照組和空白對照組間差異無顯著性（P>0.05）。
　　 結論：（1）保留軟骨，去除全層皮膚及軟骨膜后兔耳創(chuàng)面可以獲得明顯的瘢痕并且延長瘢痕的增生期，形成有效穩(wěn)定的增生性瘢痕，可以用作動態(tài)的觀察藥物治療瘢痕的效果；（2）創(chuàng)面上皮化后局部注射黃芪可明顯抑制瘢痕組織的增生，其作用機制之一是通過抑制TGF-β1及其下游信號Smad3的表達而實現(xiàn)的；（3）黃芪對兔耳瘢痕增生的抑制呈濃度劑量效應