DACH1在結(jié)直腸癌中的表觀遺傳學調(diào)控及其在TGF-β和Wnt信號通路中的作用.pdf

1、軍醫(yī)進修學院解放軍總醫(yī)院碩士學位論文DACH1在結(jié)直腸癌中的表觀遺傳學調(diào)控及其在TGFβ和Wnt信號通路中的作用姓名：閆文姬申請學位級別：碩士專業(yè)：消化內(nèi)科指導教師：楊云生；郭明洲20120511軍醫(yī)進修學院碩士學位論文胞凋亡和細胞周期檢測及體內(nèi)成瘤實驗探討DACHl對結(jié)直腸癌的作用。結(jié)果5株結(jié)腸癌細胞系中，HCTl16細胞系存在完全甲基化和表達缺失，經(jīng)去甲基化藥物5aza處理后DACHlmRNA水平恢復表達；其余4株細胞系均為非甲基化

2、且表達水平正常，5aza處理前后mRNA表達無變化。在100例結(jié)直腸癌組織中，DACHl甲基化率為48％(48／100)，在結(jié)腸息肉中為667％(1／15)，而在正常胃黏膜中無甲基化改變0％(0／8例)。結(jié)果表明DACHl甲基化與結(jié)腸癌腫瘤分級、分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(pO05)。雙熒光素酶報告基因檢測結(jié)果顯示DACHl高表達能夠抑制TGFB和wn信號通路的活性?；謴虷CTll6中DACHl的表達可抑制克隆形成和細胞增殖。流式細胞分析

3、顯示G2／M期細胞增加，而對細胞凋亡無影響。WesternBlot結(jié)果顯示DACHl下調(diào)CyclinDl、cmyc和cdc2等下游蛋白的表達。DACHl能明顯抑制裸鼠內(nèi)HCTl16細胞的成瘤能力。結(jié)論DACHl啟動子區(qū)甲基化是結(jié)直腸癌的頻發(fā)事件，并且調(diào)控DACHl的表達；DACHl甲基化與結(jié)腸癌腫瘤分級、分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。DACHl啟動子區(qū)甲基化促進細胞周期和結(jié)腸癌細胞的增殖。啟動子區(qū)域高甲基化導致的DACHl的表達缺失參與TT