BMP-,5-和BMP-,9-對C-,3-H10T-,1-2-干細胞向心肌樣細胞分化的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分C3H10T1/2干細胞的培養(yǎng)、誘導，293細胞的培養(yǎng)，AdBMP5、AdBMP9重組腺病毒的擴增 目的：利用細胞誘導技術(shù)完成AdBMP5. AdBMP9重組腺病毒質(zhì)粒對C3H10T1/2干細胞的誘導，并通過293細胞對AdBMPs. AdBMP9重組腺病毒質(zhì)粒進行擴增，為進一步闡明在BMP5. BMP9在C3H10T1/2干細胞向心肌細胞分化過程中的影響奠定基礎(chǔ)。 方法：以293細胞為工具細胞，對AdBMP5.

2、 AdBMP9重組腺病毒質(zhì)粒進行擴增；以濃度為2.67 ml/LAdBMP9重組腺病毒感染C3H10T1/2干細胞，并濃度為3.75ml/LAdBMP5重組腺病毒感染C3H10T1/2干細胞。 結(jié)果：AdBMP5.AdBMP9重組腺病毒可被293細胞成功擴增；AdBMP5.AdBMP9重組腺病毒感染C3H10T1/2干細胞的感染效率分別為36％和34％。 結(jié)論：通過293細胞對AdBMP5. AdBMP9重組腺病毒擴增，

3、病毒滴度被提高；AdBMP5.AdBMP9重組腺病毒可成功感染C3H10T1/2干細胞。 第二部分 BMP5和BMP9對C3H10T1/2干細胞向心肌樣細胞分化的影響 目的：研究骨形態(tài)形成蛋白5（bone morphogenetic proteins5，BMP5）和BMP9在C3H10T1/2干細胞向心肌細胞分化過程中的影響。 方法：以濃度為3.75ml/L的AdBMP5重組腺病毒質(zhì)粒感染C3H10T1/2干細胞

4、，并以濃度為2.67 ml/L的AdBMP9重組腺病毒質(zhì)粒感染C3H10T1/2干細胞，誘導后1周和2周應用RT-PCR方法及激光共聚焦方法分別檢測C3H10T1/2干細胞中心肌特異轉(zhuǎn)錄因子及特異性蛋白的表達變化。2周后應用電子顯微鏡觀察細胞超微結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果：C3H10T1/2干細胞經(jīng)AdBMP5. AdBMP9重組腺病毒誘導1、2周后，細胞體積明顯變大，排布走向趨于一致，細胞間連接緊密，折光性增強。細胞中開始出現(xiàn)心肌特異

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