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1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文肝癌細(xì)胞系中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的初步研究姓名:魏植強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:鄭秋紅20100301ABSTRACTObjectives:Hepatocellularcarcinoma(HCC)isoneofthemostcommonsolidmalignaniesinChinaIt’Spossiblethathepatocellularcarcinomacontainscancerstemcells
2、responsibleforitsmalignancyThepurposesofthisstudyare(1)toisolateandidentifycancerstem—likecellsfromthePLC/PRF5cellline(2)tostudytherelationshipbetweenABCG2andtumorigenicability(3)toinvestigatethedifferentiallyexpressedmi
3、RNAinPLC/PRF5cellline,whichareusefulforfurtherstudiesonspecificfunctionsofmiRNAinpathogenesisofHCCMethods:(1)TheexpressionofABCG2inthePLC/PRF5celllinewasexaminedbyflowcytometryABCG2wereisolatedfromthePLC/PRF5celllineusin
4、gmagneticactivatedcellsorting(MACS)methodThepuritywasanalyzedbyflowcytometryTheproliferationandtheabilityofcolonyforminginsoftagarofABCG2andABCG2。cellswereobservedABCG2andABCG2‘populationswereinoculatedintotheaxillaryfos
5、saofNOD/SCIDmicesattheinjectiondose5x103、1x104、5x104、5x105respectivelyThemiceweremonitoredforpalpabletumorformationandweresacrificedafter6weekstoassesstumorformationrate(2)MicroRNAmicroarraywasusedtoinvestigatethediffere
6、ntiallyexpressedmiRNAsinthePLC/PRF一5celllineABCG2cellsandABCG2‘cellstotalRNAswereextractedbymirVanaRNAIsolationKitHybridizationsweremadebyapplyingthecellmiRNAstomammalianmiRNAschipDataanalysiswasproceededbyAgilentScanCon
7、trolsoftwareversionA70andAgilentFeatureExtraction(腳softwareversion95Results:FlowcytometrywasusedtotesttheexpressionofABCG2inthePLC/PRF5celllineThepurityofABCG2cellsinthePLC/PRF5celllineWas5581710%TheABCG2cellswereisolate
8、dexaminedbyflowcytometryItspurityismorethan80%CellgrowthcurveindicatedthatproliferativecapacityoftheABCG2cellswasbetterthantheABCG2。cellsClonyformationassaywascarriedoutin6wellPlatePlatesweremaintainedat37“Cinhumidifiedi
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