氨基甲酸酯鍵陽離子基因載體合成及性能研究.pdf

1、基因治療在治療癌癥、帕金森綜合癥、白血病、艾滋病等目前用常規(guī)治療方法無法完全治愈的疾病方面具有很好的前景，其有效性已經(jīng)在臨床中得到了驗證。合適的基因載體是基因治療能否成功的關(guān)鍵，目前應用最廣的病毒載體和非病毒載體在轉(zhuǎn)染效率和細胞毒性方面都有難以抑制的缺點。尋找一種高效低毒的基因載體是目前化學和生命科學領(lǐng)域的研究熱點之一。 本論文設(shè)計合成了一類氨基甲酸酯鍵連接的陽離子類脂，優(yōu)化了各步合成反應的條件，所得中間體和最終產(chǎn)物全部經(jīng)過HN

2、MR，MS或GS-MS表征結(jié)構(gòu)正確，純度滿足轉(zhuǎn)染實驗要求。通過實驗測試或理論計算得到了所合成的陽離子類脂3a和3b的臨界膠束濃度cmc、親水親油平衡值HLB、臨界排列參數(shù)P和相轉(zhuǎn)變溫度Tm。 將所合成的陽離子類脂制成陽離子脂質(zhì)體，采用TEM、納米粒度及電位分析儀等儀器對其狀態(tài)進行研究，考察了類脂濃度、制備溫度和臨界排列參數(shù)P對所制備的脂質(zhì)體的形態(tài)的影響，得到了以下規(guī)律：隨著類脂濃度增大，其粒徑和Zeta電位都有所增大；在相轉(zhuǎn)變溫

3、度范圍內(nèi)，隨著制備溫度的不斷升高，所制得的脂質(zhì)體的平均粒徑逐漸減小，Zeta電位不斷增大，分散系數(shù)PDI逐漸減??；當制備條件相同時，制得的脂質(zhì)體平均粒徑相似，類脂的臨界排列參數(shù)越小，其Zeta電位越大。還探討了陽離子類脂3a和具有熒光的非離子表面活性劑F制備混合脂質(zhì)體的可行性。 本論文采用所制備的陽離子類脂作為基因運載工具，轉(zhuǎn)運質(zhì)粒DNA pGL3-control和pGFP-N2對COS-7細胞株、Hep-2細胞株以及Hepal