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1、目的:研究水飛薊賓對(duì)腺樣囊性癌實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移的抑制作用并探討其機(jī)制。
方法:20只雌雄各半3~4周齡BALB/c nu/nu裸鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組10只。經(jīng)尾靜脈注射0.2ml細(xì)胞密度為1×106/ml的唾液腺腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞(ACC-M)懸液。24h后,對(duì)照組裸鼠每天腹腔注射0.8ml RPMI-1640培養(yǎng)液,實(shí)驗(yàn)組裸鼠每天腹腔注射0.8ml經(jīng)RPMI-1640稀釋的水飛薊賓溶液(濃度:1mg/ml)。6W后
2、處死裸鼠,分別檢測(cè)兩組裸鼠的肺重量、肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)目及大小。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、免疫印跡法(Western blot)和免疫組化(IHC)檢測(cè)裸鼠肺部腺樣囊性癌轉(zhuǎn)移灶自噬相關(guān)基因LC3的表達(dá),應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:對(duì)照組裸鼠肺重量為(4.20±0.06)g,實(shí)驗(yàn)組肺重量為(4.08±0.11)g;對(duì)照組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(9.29±5
3、.91)個(gè)和(10.71±7.83)個(gè),實(shí)驗(yàn)組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(3.11±3.76)個(gè)和(2.22±3.46)個(gè);實(shí)驗(yàn)組裸鼠肺重量及左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)均顯著低于對(duì)照組(P<0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。LC3 mRNA在實(shí)驗(yàn)組裸鼠腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移灶組織中相對(duì)表達(dá)量為(0.784±0.103)顯著高于對(duì)照組(0.685±0.077),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白在實(shí)驗(yàn)組裸鼠肺轉(zhuǎn)移灶中的相對(duì)表達(dá)量(
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