有氧運動通過上調(diào)膽堿能抗炎通路改善自發(fā)性高血壓大鼠血管胰島素抵抗.pdf

1、高血壓是動脈粥樣硬化、心肌梗塞、中風和心衰等心血管疾病的主要危險因素?；A(chǔ)和臨床實驗均證實有氧運動能夠降低血壓，但其機制尚不清楚。
　　血管胰島素抵抗是高血壓發(fā)生發(fā)展過程中重要病理生理機制之一。在血管胰島素抵抗狀態(tài)下，胰島素作用于血管內(nèi)皮細胞釋放的舒血管物質(zhì)一氧化氮（NO）減少，而釋放的縮血管物質(zhì)內(nèi)皮素-1（ET-1）相對增多。NO與ET-1的失衡導致血管阻力增加，促進高血壓的發(fā)生，因此改善血管胰島素抵抗有益于高血壓的防治。

2、>　　自主神經(jīng)功能紊亂尤其是副交感神經(jīng)功能低下與胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)，且自主神經(jīng)功能紊亂通常發(fā)生于胰島素抵抗之前。近年研究還發(fā)現(xiàn)，副交感神經(jīng)具有免疫調(diào)節(jié)功能。副交感神經(jīng)末梢釋放的神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿（ACh）可作用于細胞膜α7型煙堿乙酰膽堿受體（α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR），激活Jak2/STAT3信號通路，發(fā)揮抗炎作用，即膽堿能抗炎通路。高血壓患者自主神經(jīng)功能紊亂，降低的副交

3、感神經(jīng)活性以及被抑制的膽堿能抗炎通路可能導致 TNF-α和C反應蛋白等炎癥介質(zhì)介導的炎癥反應增強。
　　由于有氧運動對自主神經(jīng)系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用，能夠減輕自主神經(jīng)功能紊亂，因此我們提出假設：有氧運動能夠通過增強副交感神經(jīng)功能及膽堿能抗炎通路，減輕血管胰島素抵抗從而起到防治高血壓的作用。
　　實驗目的:
　　1.明確有氧運動能否延緩自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）血壓升高及改善小血管胰島素抵抗；
　　2.若能，探討有氧運動

4、是否通過上調(diào)膽堿能抗炎通路改善血管胰島素抵抗及其主要機制。
　　實驗方法
　　1.有氧運動動物模型的建立。8周齡雄性 SHR和WKY大鼠各8只，進行8周無負重游泳訓練（1 h/d，5 d/wk）。
　　2.激動劑處理。采用腹腔注射法給予8周齡雄性SHR和WKY大鼠α7nAChR選擇性激動劑PNU-282987治療4周（0.5 mg/kg/d），對照組接受生理鹽水腹腔注射4周（n=8）。
　　3.采用無創(chuàng)尾動脈血壓

5、儀測量大鼠尾動脈血壓，每2周測量一次。
　　4.采用離體血管張力測定系統(tǒng)測定腸系膜血管胰島素舒張反應。
　　5.采用 Western blot方法檢測胰島素信號通路和膽堿能抗炎通路關(guān)鍵蛋白表達及磷酸化水平。
　　6.采用 ELISA法測定血清和組織中炎癥因子TNF-α和IL-1β的含量。
　　7.采用DHE染色法檢測腸系膜血管活性氧（ROS）水平。
　　實驗結(jié)果:
　　1．8周游泳運動延緩SHR血壓升

6、高（190±3 mmHg vs.212±4 mmHg，P<0.05，n=8），減輕系統(tǒng)胰島素抵抗（QUIKI:0.297 vs.0.243，P<0.05，n=8）。
　　2．8周游泳運動改善SHR腸系膜血管對胰島素的舒張反應（P<0.05，n=8），增強胰島素激活的Akt（Ser473）及eNOS（Ser1177）磷酸化水平（P<0.01，n=8）。
　　3．8周游泳運動降低 SHR血清、心臟和腸系膜血管炎癥因子TNF-α和

7、IL-1β水平（P<0.05，n=8）。
　　4．8周游泳運動增加SHR及WKY大鼠腸系膜血管和心臟膽堿能抗炎通路相關(guān)分子VAChT、α7nAChR的蛋白表達水平以及Jak2的磷酸化水平（P<0.05，n=8）。
　　5．α7nAChR選擇性激動劑PNU-282987治療4周降低SHR血清和腸系膜血管炎癥因子TNF-α和IL-1β水平（P<0.05，n=8）。
　　6．α7nAChR激動劑延緩SHR血壓升高（173±4

8、 mmHg vs.191±5 mmHg，P<0.05，n=8），減輕系統(tǒng)胰島素抵抗（QUICKI:0.286 vs.0.241，P<0.05，n=8）。
　　7．α7nAChR激動劑改善SHR腸系膜血管對胰島素的舒張反應（P<0.05，n=8），增強胰島素激活的Akt（Ser473）及eNOS（Ser1177）磷酸化水平（P<0.01，n=8）。
　　8．α7nAChR激動劑降低 SHR腸系膜血管 gp91phox和SOD2