水產(chǎn)動(dòng)物源氣單胞菌耐藥性與質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類(lèi)耐藥研究.pdf

1、氣單胞菌為條件致病菌，在水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境中普遍存在；喹諾酮類(lèi)藥物廣泛用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，藥物的不合理使用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性問(wèn)題嚴(yán)重化。質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類(lèi)耐藥（PMQR）是喹諾酮類(lèi)耐藥機(jī)制的重要組成部分，可引起藥物低水平耐藥。
　　本文旨在分離鑒定水產(chǎn)動(dòng)物源氣單胞菌的基礎(chǔ)上，采用微量肉湯二倍稀釋法測(cè)定菌株對(duì)8大類(lèi)22種常見(jiàn)抗菌藥物的最小抑菌濃度（MIC）；采用PCR方法，檢測(cè)分離菌株P(guān)MQR基因的攜帶情況并分析喹諾酮類(lèi)耐藥決定區(qū)（QRDR）靶基因

2、突變情況，同時(shí)提取PMQR陽(yáng)性菌質(zhì)粒，了解菌株攜帶質(zhì)粒的情況；通過(guò)ERIC-PCR擴(kuò)增分析PMQR陽(yáng)性菌株的同源性。
　　從1990~2014年采集于不同來(lái)源的患病水產(chǎn)動(dòng)物中分離出116株氣單胞菌，經(jīng)分類(lèi)鑒定，嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）有68株、維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii）30株、豚鼠氣單胞菌（Aeromonas caviae）7株、達(dá)卡氣單胞菌（Aeromonas dhaken

3、sis）5株、簡(jiǎn)達(dá)氣單胞菌（Aeromonas jandaei）4株、中間氣單胞菌（Aeromonas media）1株以及溫和氣單胞菌（Aeromonas sobria）1株。臨床分離的氣單胞菌以嗜水氣單胞菌為主。
　　藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示，分離菌株對(duì)阿莫西林/克拉維酸的耐藥率為92.24％；對(duì)磺胺間甲氧嘧啶的耐藥率為83.62%；對(duì)萘啶酸、土霉素、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶和多西環(huán)素的耐藥率介于25%~50%；對(duì)氯霉素、氟苯尼考、

4、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、新霉素、慶大霉素、阿米卡星、頭孢噻肟和頭孢曲松的耐藥率在15%以下。28株（24.13%）氣單胞菌出現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象，從龜鱉類(lèi)、經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高且高密度養(yǎng)殖的魚(yú)類(lèi)分離的氣單胞菌相對(duì)耐藥。
　　PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，18株（15.52%）菌株攜帶PMQR基因，其中8株（6.90%）攜帶qnrS2基因，9株（7.76%）攜帶aac(6′)-Ib-cr基因，1株（0.86%）同時(shí)攜帶qnrS2和aac(6′)-Ib-cr基因

5、；60株（51.72%）菌株發(fā)生QRDR的單突變或雙突變；18株P(guān)MQR陽(yáng)性菌株中，2株（11.11%）菌株的GyrA第83位點(diǎn)絲氨酸突變?yōu)楫惲涟彼幔?株（50%）菌株除了GyrA發(fā)生突變外，其ParC第80位點(diǎn)絲氨酸突變?yōu)楫惲涟彼幔?株無(wú)突變。
　　18株P(guān)MQR基因陽(yáng)性菌株中，11株菌株表現(xiàn)出對(duì)受試1種或以上喹諾酮類(lèi)耐藥。單獨(dú)攜帶qnrS2基因的8株P(guān)MQR陽(yáng)性菌中，除1株具有環(huán)丙沙星耐藥表型外，其他7株均對(duì)所受試的3種喹諾酮

6、類(lèi)藥物敏感，而且其gyrA和parC基因均不發(fā)生突變。攜帶aac(6')-Ib-cr基因的10株P(guān)MQR陽(yáng)性菌中，除2株沒(méi)有環(huán)丙沙星耐藥表型外，其他8株均表現(xiàn)出對(duì)環(huán)丙沙星耐藥，且有8株出現(xiàn)gyrA和parC雙突變，2株出現(xiàn)gyrA的單突變。
　　研究表明，嗜水氣單胞菌是導(dǎo)致廣東地區(qū)水產(chǎn)動(dòng)物氣單胞菌病害的主要病原菌；臨床分離的水產(chǎn)源氣單胞菌對(duì)受試抗菌藥物產(chǎn)生不同程度的耐藥，從龜鱉類(lèi)、經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高且高密度養(yǎng)殖的魚(yú)類(lèi)分離的氣單胞菌相對(duì)耐