慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛與脾胃濕熱證蛋白組學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　本課題采用同位素相對標(biāo)記與絕對定量技術(shù)（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ），探索慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證與健康正常人之間的差異表達(dá)蛋白質(zhì)，尋找慢性乙型肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證的差異蛋白表達(dá)譜，初步篩選出肝郁脾虛證、脾胃濕熱證的潛在生物學(xué)標(biāo)志物，為慢性乙型病毒性肝炎中醫(yī)證候的本質(zhì)提供現(xiàn)代化依據(jù)，推動該病中醫(yī)證候診斷客觀化

2、的研究。
　　方法：
　　運用蛋白質(zhì)組學(xué)iTRAQ技術(shù)對臨床單位采集的慢性乙型肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證患者及健康正常人進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測，采用SPSS19.0系統(tǒng)、Mascot鑒定軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，篩選出兩種證型可能的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。
　　結(jié)果：
　　1．肝郁脾虛證組和健康對照組比較，共篩選出157個差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），其中112個蛋白上調(diào)，45個蛋白下調(diào)；脾胃濕熱證組和健康對照組比較，共篩選出163個差

3、異表達(dá)蛋白（P＜0.05），其中128個蛋白上調(diào)，35個蛋白下調(diào)。
　　2．肝郁脾虛證組和脾胃濕熱證組比較，肝郁脾虛組共篩選出30個差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），22個蛋白上調(diào)，8個蛋白下調(diào)。其中，發(fā)現(xiàn)表達(dá)差異倍數(shù)在兩倍以上的蛋白1個：TUBA1A上調(diào)表達(dá)；脾胃濕熱證組和肝郁脾虛證組比較，脾胃濕熱組共篩選出24個差異表達(dá)蛋白（P＜0.05），22個蛋白上調(diào)，2個蛋白下調(diào)。其中，發(fā)現(xiàn)表達(dá)差異倍數(shù)在兩倍以上的蛋白6個：ACTA2、AC

4、TG2、ZNF628、DEFA1、DEFA3、CaM均上調(diào)表達(dá)。
　　3.差異蛋白與課題組前期兩證型microRNA分析均表明：酶活性調(diào)節(jié)、代謝過程、細(xì)胞發(fā)育、細(xì)胞凋亡、炎癥應(yīng)答、免疫反應(yīng)等功能為慢性乙型肝炎肝郁脾虛證相關(guān)；免疫系統(tǒng)、細(xì)胞殺傷、細(xì)胞凋亡、刺激反應(yīng)、肌動蛋白等功能可能與慢性乙型肝炎脾胃濕熱證相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1．慢性乙型肝炎肝郁脾虛和脾胃濕熱證組與健康對照組存在差異蛋白表達(dá)。
　　2．TUBA