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文檔簡介
1、目的:研究miR-30a在BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2成骨分化中的作用，并探討其可能作用機(jī)制。
方法:首先用Ad-BMP9處理間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2，通過堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒檢測早期成骨指標(biāo)ALP、Western blot和PCR檢測中期成骨指標(biāo)骨橋蛋白(OPN)，茜素紅S染色檢測鈣鹽沉積了解BMP9對C3H10T1/2細(xì)胞的晚期成骨分化作用，同時用Real-time PCR檢測miR-30a在
2、該成骨分化中的變化。然后用BMP9條件培養(yǎng)基分別作用Ad-mmu-miR-30a和Ad-RFP預(yù)處理10h的C3H10T1/2細(xì)胞，檢測成骨指標(biāo)ALP、OPN和鈣鹽沉積的表達(dá)。接著用流式細(xì)胞術(shù)和MTT法研究miR-30a對C3H10T1/2細(xì)胞增殖的影響。最后探討miR-30a在BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細(xì)胞成骨分化中的可能作用機(jī)制。
結(jié)果:Ad-BMP9處理C3H10T1/2細(xì)胞7天后ALP活性的表達(dá)增高;第10天，OP
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