SP-D聯(lián)合伏立康唑?qū)γ庖咭种菩∈笄忠u性肺曲霉病治療效果的研究.pdf

1、背景和目的:
　　煙曲霉是一類(lèi)廣泛存在與自然環(huán)境中的腐生菌，在不同免疫狀態(tài)的宿主中可引起不同類(lèi)型的曲霉病。在免疫抑制人群中常引起致命性的侵襲性肺曲霉病(InvasivePulmonary Aspergillosis，IPA)，盡管IPA的診斷方法和治療方式在不斷進(jìn)展，但其發(fā)病率和死亡率仍較高。在過(guò)去幾十年中，全世界范圍內(nèi)陸續(xù)出現(xiàn)了三唑類(lèi)抗真菌藥耐藥的曲霉菌株，這可能導(dǎo)致曲霉病治療選擇的減少以及治療的失敗，這亟需我們尋找新的治療方法

2、。免疫功能正常的人群在吸入霉菌孢子后一般不會(huì)發(fā)病，表明宿主免疫功能在抵抗曲霉菌過(guò)程中發(fā)揮重要作用。已有研究提示肺泡表面活性蛋白D（Surfactant Protein D，SP-D）可通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫反應(yīng)來(lái)抵抗曲霉菌的入侵，對(duì)IPA模型小鼠起到一定的治療效果。本研究通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用SP-D和伏立康唑與單獨(dú)應(yīng)用伏立康唑或SP-D對(duì)IPA小鼠治療效果的比較，并進(jìn)一步探討SP-D增強(qiáng)伏立康唑治療效果可能存在的免疫機(jī)制。
　　研究方法:

3、>　　通過(guò)腹腔注射環(huán)磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型，并以滴鼻方式感染臨床煙曲霉菌株成功建立并驗(yàn)證BALB/c小鼠IPA模型。根據(jù)IPA小鼠在不同給藥濃度的伏立康唑及SP-D干預(yù)下15天生存率確定給藥劑量。在感染第0天、第1天和第2天，分別給予SP-D(10μg/d)，伏立康唑(負(fù)荷劑量30 mg/kg/d，維持劑量15 mg/kg/d)及SP-D聯(lián)合伏立康唑治療。觀察小鼠第4天肺部的病理學(xué)變化、真菌負(fù)荷及15天生存率評(píng)估治療效果。進(jìn)一步檢測(cè)

4、小鼠第4天肺部IFN-γ、 IL-4、IL-17及IL-23細(xì)胞因子水平變化及流式細(xì)胞術(shù)測(cè)脾臟內(nèi)TH1、TH2及TH17細(xì)胞的變化闡述可能發(fā)生的機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　PAS染色發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組較單藥組和IPA模型組，肺組織中炎性細(xì)胞聚集明顯，孢子菌絲顯著減少;聯(lián)合給藥組較單藥組肺部真菌負(fù)荷顯著降低;聯(lián)合治療組較伏立康唑和模型組IFN-γ水平顯著增高(552.9±28.4 pg/ml，463±31.5pg/ml，297.9±1

5、6.1 pg/ml，P＜0.01);IL-4水平顯著降低(83.8±10.9 pg/ml，129.3±15.2 pg/ml，200±16.5 pg/ml，P＜0.01);IL-17水平顯著降低(97.8±6.6pg/ml，164.9±21.6 pg/ml，203.9±50.2 pg/ml，P＜0.01);聯(lián)合治療組較伏立康唑組、SP-D組和IPA模型組，脾臟中TH1數(shù)量顯著增多（9.87±1.1％，5.65±0.41％，6.86±0.7

6、5％，4.2±0.21％，P＜0.01）;TH2數(shù)量顯著減少（4.82±0.27％，7.01±0.58％，6.10±0.61％，8.64±0.18％，P＜0.01）;TH17數(shù)量顯著減少（1.63±0.11％，2.23±0.25％，2.17±0.24％，3.02±0.24％，P＜0.01）;15天生存率明顯延長(zhǎng)(60％，40％，30％，10％)。
　　結(jié)論:
　　表明聯(lián)合治療組通過(guò)平衡TH1、TH2和TH17之間的免疫反應(yīng)更