脂氧素A4對(duì)早期1型糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注損傷的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立早期1型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注模型，觀察脂氧素A4(LXA4)對(duì)糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注損傷的影響并初步探索其可能的分子機(jī)制，以期為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法:健康成年雄性SD大鼠60只，體重220～250g，隨機(jī)分為6組:非糖尿病假手術(shù)組(NS組)、糖尿病假手術(shù)組(DS組)、非糖尿病心肌缺血/再灌注組(NI/R組)、糖尿病心肌缺血/再灌注組(DI/R組)、非糖尿病心肌缺血/再灌注+LXA4組（NLX組）和糖

2、尿病心肌缺血/再灌注+LXA4組(DLX組)，每組10只。采用腹腔注射檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(pH=4.2)溶解的鏈脲佐菌素55 mg/kg制備1型糖尿病大鼠模型，非糖尿病各組腹腔注射等體積檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。糖尿病模型制備成功1周時(shí)，通過結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支30m in、再灌注240 min，建立心肌缺血/再灌注模型。NS組、DS組僅穿線，不結(jié)扎，曠置270m in; NI/R組、DI/R組于缺血前5 min經(jīng)股靜脈注射生理鹽

3、水1ml/只;NLX組、DLX組于缺血前5min經(jīng)股靜脈注射LXA42.5μg/kg（用生理鹽水稀釋至1ml）。觀察各組大鼠血糖、體重及一般狀態(tài)的變化;通過HE染色在光鏡下觀察心肌組織病理學(xué)改變;應(yīng)用ELISA試劑盒檢測(cè)血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)濃度;TUNEL試劑盒檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡情況;RT-PCR及Western blot法測(cè)定心肌組織Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:1型糖尿病

4、模型建立成功1周時(shí)，糖尿病各組血糖值顯著高于非糖尿病各組，體重明顯低于非糖尿病各組(P＜0.05);與其基礎(chǔ)值比較，糖尿病各組血糖值明顯升高(P＜0.05)，體重不增(P＞0.05)。缺血/再灌注后，光鏡下可見NI/R組和DI/R組心肌纖維排列紊亂、橫紋不清或消失，細(xì)胞腫脹，局部細(xì)胞出現(xiàn)溶解，肌纖維間可見大量紅細(xì)胞及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，DI/R組心肌組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)較NI/R組嚴(yán)重;NLX組、DLX組心肌組織病理學(xué)損傷較NI/R組、DI/R組

5、有所改善。大鼠再灌注結(jié)束即刻，DS組、NI/R組、DI/R組、NLX組和DLX組血清TNF-α濃度、細(xì)胞凋亡率均明顯高于NS組(P＜0.05); NLX組血清TNF-α濃度、細(xì)胞凋亡率均明顯低于NI/R組，而DI/R組上述指標(biāo)則明顯高于NI/R組(P＜0.05);與DI/R組比較，DLX組血清TNF-α濃度、細(xì)胞凋亡率降低明顯（P＜0.05）。與NS組比較，DS組Caspase-3 mRNA和蛋白，NI/R組、DI/R組、NLX組和DL

6、X組Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA表達(dá)量均增加(P＜0.05);與NI/R組比較，NLX組Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表達(dá)量均減少，而Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)量增加，DI/R組Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)量明顯較NI/R組增多(P＜0.05);與DFR組比較，DLX組Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表達(dá)量減少，而Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)量增加，差異有顯著性(P＜0.05)。