辛夷脂素對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：
　　實驗室前期研究結(jié)果表明，辛夷脂素在心肌細胞膜色譜（CM/CMC）有明顯的色譜保留，提示辛夷脂素可能具有改善缺血心肌的作用，本課題進一步研究了辛夷脂素的作用部位、作用靶點及對β1腎上腺素受體（β1-AR）的抑制作用，并且較全面的評價了辛夷脂素對心肌的作用及可能的作用機制。
　　方法：
　　（1）分離大鼠的心肌細胞和高表達β1-AR中國倉鼠卵巢S亞型（β1-AR/CHO-S）細胞的細胞膜，分別利用這兩種細胞建立

2、CM/CMC和β1-AR/CMC分析方法；將辛夷脂素分別注入CM/CMC和β1-AR/CMC分析系統(tǒng)中，考察辛夷脂素與心肌細胞膜和β1-AR的親和作用。（2）通過ISO損傷β1-AR/CHO-S細胞，ELISA法測定辛夷脂素（1、5μM）對β1-AR下游指標cAMP、PKA等表達水平的影響，從細胞水平評價辛夷脂素可能是β1-AR的拮抗劑。（3）建立在體心肌的缺血/再灌注（MI/R）損傷模型，分別通過股靜脈的方式注入辛夷脂素溶液（0.15

3、μmol/kg）和美托洛爾注射液（4μmol/kg），通過測定梗死面積、心律失?？傇u分、血清、組織中指標的改變，考察對于MI/R的損傷，辛夷脂素的保護作用。
　　結(jié)果：
　　（1）辛夷脂素在CM/CMC和β1-AR/CMC上均具有較強的色譜保留，提示辛夷脂素可以與心肌細胞膜上的β1-AR結(jié)合。（2）在0.1-5μM濃度范圍里，辛夷脂素對β1-AR/CHO-S細胞活力沒有影響；辛夷脂素可明顯降低ISO損傷β1-AR/CHO-S

4、細胞中cAMP和PKA水平。（3）辛夷脂素可以明顯的降低MI/R后心律失常的總評分，以及CK和LDH的釋放；同時，在測定梗死面積和心肌形態(tài)學時，均顯示出可以改善的類似結(jié)果；辛夷脂素能夠降低組織中總ROS以及MDA的釋放但是可以增加SOD、CAT、GSH-Px活力；辛夷脂素能夠減少細胞發(fā)生凋亡的數(shù)目和抑制caspase-3的活性。
　　結(jié)論：
　　結(jié)合辛夷脂素在CM/CMC和β1-AR/CMC分析方法中的色譜保留特點與細胞水平