艾塞那肽對糖耐量減低大鼠肝臟糖原合成的影響.pdf

1、目的：
　　通過新型降糖藥艾塞那肽(Exendin-4)干預(yù)糖耐量減低的(IGT)大鼠，比較藥物干預(yù)后大鼠肝臟葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)和糖原含量的變化，探討艾塞那肽對糖耐量減低(IGT)大鼠肝臟糖原合成的影響。
　　方法：
　　以健康大鼠為研究對象，將研究對象分為2組，一組(正常組)18只，另一組(模型組)36只。正常組大鼠喂養(yǎng)的飼料根據(jù)脂肪(提供10.3％的熱量)、蛋白質(zhì)(提供23.7%的熱量)、碳水化合物(提

2、供66.0%的熱量)所占總熱量的比例進(jìn)行飼料配比并喂養(yǎng)；模型組喂養(yǎng)的食物同樣按脂肪(提供56%的熱量)、蛋白質(zhì)(提供7.0%的熱量)、碳水化合物(提供37%的熱量)所占總熱量的比例進(jìn)行飼料的配比并喂養(yǎng)[1]。所有大鼠不限制飲水和活動，一日予2次投食。喂養(yǎng)至12周時，前一天停止喂養(yǎng)，至次日空腹8h后，從大鼠靜脈采血檢測空腹血糖(FBG)和餐后血糖(PBG)，以7.8mmol/L≤PBG<11.1 mmol/l為模型組造成功[1]。正常組大

3、鼠血糖水平都在正常上下限內(nèi)，設(shè)為血糖水平正常組(NGT組，n=18只)。模型組28只大鼠建造模型成功，有78%的大鼠餐后血糖升高，可設(shè)為糖耐量減低組[1]。將血糖升高大鼠在分成對照組(IGT+NaCl組，有14只)和治療組(IGT+Ex組，有14只)。NGT組大鼠繼續(xù)予非高糖脂食物投食喂養(yǎng)，IGT+NaCl組和IGT+Ex組大鼠予高糖脂飼料投食喂養(yǎng)，同時IGT+Ex組予降糖藥艾塞那肽-劑量為5ug每公斤腹部注射，早注射一次，晚注射一次，

4、NGT組與IGT+NaCl組給予5ug每公斤的生理鹽水腹部注射[2]，同樣次數(shù)。4周后行OGTT試驗，高糖灌大鼠胃，并檢測空腹和餐后血糖以及膽固醇、甘油三酯水平。次日折斷大鼠頸椎致死，然后在最短時間內(nèi)取大鼠肝臟用甲醛保持離體前狀態(tài)，脫水，石蠟包埋組織，切片機(jī)切薄片，免疫組織化學(xué)染色，顯微鏡下觀察肝葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2表達(dá)的變化，過碘酸染色(PAS)觀察肝糖原含量的變化。肝GLUT2顯色結(jié)果采用IPP6.0系統(tǒng)，根據(jù)肝細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2標(biāo)記

5、陽性面積百分比進(jìn)行定量分析，每張切片選則5個視野區(qū)域，計算GLUT2的平均面積百分比進(jìn)行統(tǒng)計的分析。肝臟糖原PAS染色后采用病理分析系統(tǒng)，在光鏡下測定每個視野肝糖原染色面積所占總面積的百分比，選擇3個視野區(qū)域，計算其平均的糖原含量并分析[3]。所有計量資料以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差( x±s)表示，采用SPSS17.0軟件，各組間比較采用LSD-t檢驗進(jìn)行均數(shù)的比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　各組大鼠血糖的比

6、較：與IGT+NaCl組相比，IGT+Ex組PBG明顯降低(10.38±0.38vs.7.17±0.36)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，F(xiàn)BG(5.08±0.46vs.5.04±0.47)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與NGT組相比較，IGT+Ex組大鼠的FBG和PBG(4.86±0.52vs.5.04±0.47)(5.76±0.54vs.7.17±0.36)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各組大鼠血脂的比較：與IGT+N

7、aCl組比，IGT+Ex組TG和TC均降低(2.24±0.16vs.1.06±0.13)(2.11±0.19vs.1.02±0.09)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)；與正常組相比較，TC和TG(0.88±0.22vs.1.06±0.13)(0.84±0.19vs.1.02±0.09)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。各組大鼠肝細(xì)胞表面的GLUT2蛋白表達(dá)水平比較：與IGT+NaCl組相比較，IGT+Ex組肝臟GLUT2蛋白表達(dá)的

8、水平明顯升高(30.93±2.57vs.17.70±2.26)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)；與NGT相比較，IGT+Ex組肝GLUT2表達(dá)的水平(32.64±4.28vs.30.93±2.57)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各組大鼠肝糖原含量的比較：與IGT+NaCl組相比較，IGT+Ex組大鼠肝臟糖原含量明顯上升(37.62±5.36vs.17.95±3.05)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與正常組相比較，Ex組大鼠肝