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簡介：第一章、緒論第一章、緒論11細胞生物學細胞生物學研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學，它從不同層次上組要研究細胞結構與功能，細胞增殖、分化、衰老與凋亡，細胞信號轉導，細胞基因表達與調(diào)控，細胞起源于進化等22細胞生物學研究內(nèi)容細胞生物學研究內(nèi)容①細胞核、染色體以及基因表達的研究②生物膜與細胞器的研究③細胞骨架體系的研究④細胞增殖及其調(diào)控⑤細胞分化及其調(diào)控⑥細胞的衰老與凋亡⑦細胞的起源與進化⑧細胞工程3細胞的發(fā)現(xiàn)細胞的發(fā)現(xiàn)①1665英國人胡克用自己設計與制造的顯微鏡觀察了軟木（櫟樹皮的薄片。②荷蘭人列文虎克是第一個看到活細胞的人。4．細胞學說的建立及其意義細胞學說的建立及其意義18381839德國人SCHLEIDEN和SCHWANN提出CELLTHEORY（①有機體是由細胞構成的；②細胞是構成有機體的基本單位；③新細胞來源于已存在細胞的分裂。）1858德國人VIRCHOW提出“一切細胞來源于細胞”的著名論斷，進一步完善了細胞學說。5細胞學形成細胞學形成①細胞學的經(jīng)典時期②實驗細胞學與細胞學的分支及發(fā)展6相關期刊、雜志相關期刊、雜志NATURESCIENCECELL中國科學科學通報ZZZZZZＺＺＺＺＺＺＺ分子細胞生物學報第二章、細胞的統(tǒng)一性與多樣性第二章、細胞的統(tǒng)一性與多樣性1細胞的統(tǒng)一性細胞的統(tǒng)一性基本單位細胞共性①一切有機體都由細胞構成，細胞是構成有機體的基本單位②細胞具有獨立的、有序的自控代謝體系，細胞是代謝與功能的基本單位③細胞是有機體生長與發(fā)育的基礎④細胞是遺傳的基本單位，細胞具有遺傳的全能性⑤沒有細胞就沒有完整的生命⑥關于細胞概念的一些新思考2細胞的多樣性細胞的多樣性原核原核細胞原核細胞沒有核膜，DNA為裸露的環(huán)狀分子，通常沒有結合蛋白。沒有恒定的內(nèi)膜系統(tǒng)，核糖體為70S型，通常稱為細菌基本特點基本特點①遺傳信息量小，主要的遺傳信息載體僅由一個環(huán)狀DNA構成②細胞內(nèi)沒有分化出以膜為基礎的具有專門結構與功能的細胞器和細胞核真核真核細胞特點1、細胞分裂分為核分裂和細胞質(zhì)分裂，并且分開進2、DNA和蛋白質(zhì)結合壓縮成染色體結構，形成有絲分裂的結構3、具有復雜的內(nèi)膜系統(tǒng)和細胞內(nèi)的膜結構如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、過氧化物酶體、乙醛酸循環(huán)體、胞內(nèi)體等4、具有特異的進行有氧呼吸的細胞器線粒體和光合作用的細胞器葉綠體5、具有復雜的骨架系統(tǒng)包括微絲、中間纖維和微管6、有復雜的鞭毛和纖毛7、具有小泡運輸系統(tǒng)胞吞作用和胞吐作用8、含有纖維素的細胞壁如植物細胞9、利用微管形成的紡錘體進行細胞分裂和染色體分離10、每個細胞中的遺傳物質(zhì)成雙存在，二倍體分別來自于兩個親本11、通過減數(shù)分裂和受精作用進行有性生殖相同點相同點1都具有類似的細胞質(zhì)膜結構2都以DNA作為遺傳物質(zhì)，并使用相同的遺傳密碼3都是以一分為二的方式進行細胞分裂4具有相同的遺傳信息轉錄和翻譯機制，有類似的核糖體結構5代謝機制相同如糖酵解和TCA循環(huán)6具有相同的化學能貯能機制，如ATP合成酶原核位于細胞質(zhì)膜，真核位于線粒體膜上（三）激光掃描共焦顯微境特點①用激光作掃描光源，逐點、逐行、逐面快速掃描成像②分辨率大約是普通光學顯微鏡的3倍③能顯示細胞樣品的立體結構④用途類似熒光顯微鏡,但能掃描不同層次,形成立體圖像⑤掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡，物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點，也是瞬時成像的物點四相差顯微鏡在構造上，相差顯微鏡有不同于普通光學顯微鏡兩個特殊之處①環(huán)形光闌位于光源與聚光器之間，作用是使透過聚光器的光線形成空心光錐，焦聚到標本上。②相位板在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4Λ五暗視野顯微鏡六倒置顯微鏡用于觀察培養(yǎng)的活細胞，通常具有相差或DIC物鏡，有的還具有熒光裝置電子顯微鏡電子顯微鏡超薄切片超薄切片厚度僅50NM左右，用超薄切片機制作超薄切片技術的過程為超薄切片技術的過程為固定、脫水、包埋、切片、染色。冰凍蝕刻標本置于100度的干冰或196度的液氮中，進行快速冰凍。用冷刀驟然將標本斷開，升溫，冰在真空條件下迅即升華，暴露出斷面結構蝕刻向斷面以45度角噴涂一層蒸汽鉑，再以90度角噴涂一層碳，加強反差和強度。然后用次氯酸鈉溶液消化樣品，把碳和鉑的膜剝下來，此膜即為復膜。復膜顯示出了標本蝕刻面的形態(tài)，在電鏡下得到的影像即代表標本中細胞斷裂面處的結構。22細胞組分的分析方法細胞組分的分析方法一、離心技術一、離心技術細胞破碎細胞破碎差速離心在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級離心，用于分離不同大小的細胞和細胞器。差速離心只用于分離大小懸殊的細胞，更多用于分離細胞器。通過差速離心可將細胞器初步分離密度梯度離心1、速度沉降用途用于分離密度相近而大小不等的細胞或細胞器特點介質(zhì)密度較低，介質(zhì)的最大密度應小于被分離生物顆粒的最小密度原理介質(zhì)密度梯度十分平緩,生物顆粒（細胞或細器）按各自的沉降系數(shù)以不同的速度沉降而達到分離2、等密度沉降用途用于分離密度不等的顆粒特點介質(zhì)密度較高,陡度大,介質(zhì)的最高密度應大于被分離組分的最大密度所需要的力場通常比速率沉降法大10100倍，故往往需要高速或超速離心原理細胞或細胞器在連續(xù)梯度的介質(zhì)中經(jīng)足夠大離心力或足夠長時間則沉降或漂浮到與自身密度相等的介質(zhì)處，并停留在那里達到平衡，從而將不同密度的細胞或細胞器分離二、細胞化學技術二、細胞化學技術DNADNA原位顯示原位顯示福爾根反應的原理福爾根反應的原理酸水解可以去除RNA，僅保留DNA，并除去DNA上嘌呤脫氧核苷酸鍵的嘌呤，使脫氧核糖的醛基暴露。所暴露的自由醛基與希夫試劑反應呈紫紅色。免疫熒光技術免疫熒光技術熒光素異硫氰酸熒光素、羅丹明免疫電鏡技術免疫電鏡技術免疫酶標技術辣根過氧化物酶免疫膠體金技術金膠體顆粒定量細胞化學分析技術定量細胞化學分析技術1流式細胞儀原理原理包在鞘液中的細胞通過高頻振蕩控制的噴嘴，形成包含單個細胞的液滴，在激光束的照射下，這些細胞發(fā)出散射光和熒光，經(jīng)探測器檢測，轉換為電信號，送入計算機處理，輸出統(tǒng)計結果，并可根據(jù)這些性質(zhì)分選出高純度的細胞亞群，分離純度可達99。包被細胞的液流稱為鞘液，所用儀器稱為流式細胞計2顯微光譜分析技術顯微分光光度測定技術（主要有紫外光顯微分光光度測定法和可見光顯微分光光度測定法）原理利用細胞中有一些成分具有特定的吸收光譜的特性，測定細胞中某些物質(zhì)的含量。DNA含量50A33細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術一動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)1原代培養(yǎng)2原代細胞3細胞貼壁4接觸抑制5傳代培養(yǎng)6傳代細胞7細胞系度8轉化細胞9細胞株二細胞工程細胞工程細胞融合細胞融合應用單克隆抗體技術（過程過程單個B淋巴細胞→抗體（單一物質(zhì)→專一性）

簡介：細胞生物學（翟中和）配套習題細胞生物學（翟中和）配套習題第一章緒論第一章緒論1、填空題1、細胞生物學是細胞整體、超微結構和分子水平上研究及其規(guī)律的科學。、2、名詞解釋1、細胞學說（CELLTHEORY）3、選擇題1、現(xiàn)今世界上最有影響的學術期刊是。ANATUNEBCELLCPNASDSCIENCE2、自然界最小的細胞是（A）病毒（B）支原體（C）血小板（D）細菌4、是非題1、現(xiàn)代細胞生物學的基本特征是把細胞的生命活動和亞細胞的分子結構變化聯(lián)系起來。（）5、問答題1當前細胞生物學研究的熱點課題哪些2細胞學說的基本要點是什么細胞學說在細胞學發(fā)展中有什么重大意義3細胞生物學的發(fā)展可劃分為哪幾個階段各階段的主要特點是什么第二章細胞基本知識概要第二章細胞基本知識概要1、名詞解釋1血影（GHOST）2通道形成蛋白（PORIN）3纖維冠（FIBROUSCORONA）2、選擇題1、立克次氏體是（A）一類病毒（B）一種細胞器（C）原核生物（D）真核生物2、原核細胞的呼吸酶定位在（A）細胞質(zhì)中（B）質(zhì)膜上（C）線粒體內(nèi)膜上（D）類核區(qū)內(nèi)3、最小的細胞是3為什么說支原體可能是最小最簡單的細胞存在形式4說明真核細胞與原核細胞在遺傳裝置，基因表達及調(diào)控方面的區(qū)別。5真核細胞在亞顯微結構水平可以劃分為哪三大基本結構體系（據(jù)說在國內(nèi)，這是翟中和先提出來的）6細胞與病毒在起源上的關系有哪幾種假說你比較同意哪一種為什么（必須同意生物大分子→細胞→病毒這種，論據(jù)P26）7請簡要說明病毒的增殖過程。（今年SARS流行，而且陳建國和鄧宏魁現(xiàn)在都在研究SARS，還要看一下SARS病毒基本的結構和增殖途徑）8在生命起源和進化過程中化學進化與生物進化的關系如何9MILLER實驗的方案是怎樣設計的有什么重要意義10微球學說和團聚體學說的主要內(nèi)容是什么11如何評價真核生物起源的內(nèi)共生假說和經(jīng)典假說12葉綠體可能起源于原核綠藻和藍細菌（藍藻）的觀點的根據(jù)是什么13HIV的分子結構特征是什么HIV的英文全稱是什么14列出原核細胞與真核細胞的主要差異。15蛋白質(zhì)組是什么1、RE走近蛋白質(zhì)組研究轉發(fā)自中華基因網(wǎng),非常謝謝PROTEOME（蛋白質(zhì)組），這個在各種字典里都還查不到的詞組，近幾年來開始在生命科學領域逐漸浮出水面，曝光頻率越來越高，蛋白質(zhì)組是什么它與我們有什么關系讓我們來揭開其神秘的面紗，一睹其迷人的風采。一、什么是蛋白質(zhì)組研究基因，尤其是基因組研究形成了20世紀生命科學研究一道亮麗的風景線，取得了巨大的成就。那么，知道了人類的全部基因組序列，就可以解決各種醫(yī)學問題嗎其實并不是這么簡單。僅憑基因組學這只單腳圓規(guī)，很難繪出完美的圓圈。隨著人類基因組計劃的逐步完成，科學家們又進一步提出了后基因組計劃，蛋白質(zhì)組研究是其中一個很重要的內(nèi)容。在人體內(nèi)真正發(fā)揮作用的是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)扮演著構筑生命大廈的“磚塊”角色，是生命活動的真正執(zhí)行者和體現(xiàn)者?；蚝帽纫粡堉圃祜w機和坦克的圖紙，蛋白質(zhì)就是根據(jù)圖紙制造的真正進行戰(zhàn)斗的飛機和坦克。雖然目前已完成了對人類基因的全部序列測定，但是單憑制造飛機和坦克的圖紙，不可能演繹出一場戰(zhàn)爭，也不會知道一場戰(zhàn)爭是如何發(fā)生、如何進行的?；虻闹饕δ苁峭ㄟ^其表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)來實現(xiàn)的，而蛋白質(zhì)亦具有自身特有的活動規(guī)律，隨著生命活動的進程表現(xiàn)出極其動態(tài)的緊密協(xié)調(diào)的變化，蛋白質(zhì)在合成之后具有相對獨立的修飾、轉運和相互間作用能力，同時還具有對外界因素發(fā)生反應的能力。因此，只有從蛋白質(zhì)組學的角度對所有蛋白質(zhì)的總和進行研究，即開展蛋白質(zhì)組學研究，才能更加貼近對生命現(xiàn)象和本質(zhì)的掌握，生命活動的本質(zhì)和活動規(guī)律才能找到答案。正是因為這樣，國際科學界預言，在21世紀，生命科學的熱點將從基因組學轉向蛋白質(zhì)組學，使后者成為新的前沿。蛋白質(zhì)組學研究不但對了解生命本質(zhì)有重要的意義，而且在疾病診斷治療、藥物篩選等有廣泛應用前景。其中蘊藏著開發(fā)疾病診斷方法和新藥的線索。二、蛋白質(zhì)組能給我們帶來什么人體內(nèi)的每一細胞是由一萬余個不同蛋白質(zhì)的有機組合，不同蛋白質(zhì)的組合就構成不同細胞的功能。要想把細胞內(nèi)部這些功能和信息全部展現(xiàn)出來，唯一的方法是利用蛋白質(zhì)組學技術，得到一張擁有各種蛋白質(zhì)點的“繁星圖“，利用現(xiàn)代科學分析技術，將此圖變成開發(fā)新藥的“探寶圖”，了解其藥物的細胞內(nèi)作用與運轉機制，成為藥物發(fā)現(xiàn)的“路標”。蛋白質(zhì)組的研究不僅是探索生命奧秘的必須工作，也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑，為人類健康事業(yè)帶來巨大的利益?，F(xiàn)在已經(jīng)知道，在疾病中只有一小部分是起因于基因突變，而各種疾病都有蛋白質(zhì)譜的動態(tài)變化，每種疾病在不同的發(fā)病階段，在任何癥狀出現(xiàn)之前，在蛋白質(zhì)水平方

簡介：微生物學微生物第四次形考_0001四川電大形成性測評系統(tǒng)課程代碼5110230參考資料、單項選擇題（共20道試題，共100分。）1固氮作用是一個厭氧的還原作用，環(huán)境中氧的濃度對固氮作用會產(chǎn)生較大的影響。A對B錯參考答案A2化能異養(yǎng)固氮菌只有在環(huán)境中有豐富的碳化物而缺少化合態(tài)氮時，才能進行固氮作用。A對B錯參考答案A3下列哪項不屬于根瘤形成的幾個階段之一。A感染B繁殖C發(fā)育D成熟參考答案B4抗菌素的抗菌作用主要表現(xiàn)為抑菌、殺菌和溶菌三種現(xiàn)象。A對B錯參考答案A5下面哪一項不是微生物之間的互惠關系下列土壤生物類群中，被稱為土壤生物先行者的是A細菌B真菌C藻類D放線菌參考答案C10地球上所有生命有機體及其圍繞它們的非生物環(huán)境的總稱為生態(tài)系統(tǒng)。A對B錯參考答案B11下面哪一項不是土壤具有微生物生活的良好環(huán)境特征。A富含營養(yǎng)物質(zhì)B水分充足CPH適合D溫差較大參考答案D12土壤中有一部分微生物在有新鮮有機殘體進入時便大量發(fā)育占優(yōu)勢，而新鮮有機體則有被迅速分解衰退，這類微生物稱之為A發(fā)酵型微生物區(qū)系B土著型微生物區(qū)系C清水型水生微生物

簡介：1、正常菌群在機體抵抗力降低時可改變寄居部位轉化為________。選擇一項A性菌毛B毒力C條件致病菌D普通菌毛正確答案是條件致病菌2、包膜病毒體的釋放方式主要是____________。選擇一項A包膜B核衣殼C出芽D細胞裂解正確答案是出芽3、裸露病毒體的釋放方式是__________。選擇一項A出芽B細胞裂解C包膜D核衣殼正確答案是細胞裂解4、裸露病毒體即由_______構成。選擇一項A出芽B細胞裂解C核衣殼B莢膜C菌毛D脂多糖正確答案是脂多糖9、G＋菌細胞壁的特有結構是_______。選擇一項A磷壁酸B脂多糖C菌毛D莢膜正確答案是磷壁酸10、細菌的測量單位是_____。選擇一項A皮膚黏膜屏障B吞噬細胞和體液殺菌物質(zhì)C納米D微米正確答案是微米11、病毒的測量單位是__________。選擇一項A皮膚黏膜屏障B微米C納米D吞噬細胞和體液殺菌物質(zhì)正確答案是納米12、細菌致病性主要取決于細菌的_____和侵入的數(shù)量。

簡介：單項選擇題（每題2分，共50題）題目1不正確獲得200分中的000分未標記標記題目題干關于Ⅳ型超敏反應描述正確的是（）選擇一項A抗原注入后4小時達到反應高峰不正確B以單個核細胞浸潤為主的炎癥C能通過血清IG被動轉移D補體參與炎癥的發(fā)生E以中性粒細胞浸潤為主的炎癥反饋你的回答不正確正確答案是以單個核細胞浸潤為主的炎癥題目2未回答滿分200未標記標記題目題干初次免疫應答的特點是（）選擇一項A抗體滴度較高B抗原提呈細胞是B細胞C抗體產(chǎn)生慢，維持時間長D抗體產(chǎn)生慢，維持時間短E抗體產(chǎn)生快，維持時間短反饋你的回答不正確正確答案是抗體產(chǎn)生慢，維持時間短題目3未回答滿分200未標記標記題目題干在抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學基團稱為（）選擇一項A異嗜性抗原B半抗原C完全抗原A發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能的場所B成熟T細胞定居的場所CB細胞分化發(fā)育成熟的場所DT細胞發(fā)生免疫應答的場所ET細胞分化發(fā)育成熟的場所反饋你的回答不正確正確答案是B細胞分化發(fā)育成熟的場所題目7未回答滿分200未標記標記題目題干再次免疫應答的特點是（）選擇一項A抗體產(chǎn)生快，維持時間短B可由TD抗原和TI抗原引起C抗體產(chǎn)生快且滴度高D抗體主要是IGM和IGGE抗體產(chǎn)生少反饋你的回答不正確正確答案是抗體產(chǎn)生快且滴度高題目8未回答滿分200未標記標記題目題干由B細胞活化后分化而成并生產(chǎn)抗體的是（）選擇一項ANK細胞B巨噬細胞C樹突狀細胞D漿細胞ET細胞反饋你的回答不正確正確答案是漿細胞題目9未回答滿分200未標記標記題目題干預防RH血型不合的新生兒溶血癥的方法是（）

簡介：1廣石化分子生物學試題及答案一、名詞解釋1．CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過反轉錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2．標準折疊單位標準折疊單位蛋白質(zhì)二級結構單元Α－螺旋與Β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結構塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級結構。幾乎所有的三級結構都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標準折疊單位。3．CAPCAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTORPROTEIN），CAMP與CRP結合后所形成的復合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4．回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。5．MICRNAMICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補，可抑制MRNA的翻譯。6．核酶核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7．模體模體蛋白質(zhì)分子空間結構中存在著某些立體形狀和拓撲結構頗為類似的局部區(qū)域8．信號肽信號肽在蛋白質(zhì)合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段，引導蛋白質(zhì)的跨膜。9．弱化子弱化子在操縱區(qū)與結構基因之間的一段可以終止轉錄作用的核苷酸序列。10．魔斑魔斑當細菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時，細菌將會產(chǎn)生一個應急反應，停止全部基因的表達。產(chǎn)生這一應急反應的信號是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸（PPPGPP）。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個或幾個操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級調(diào)控子或稱為魔斑。11．上游啟動子元件上游啟動子元件是指對啟動子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列，10區(qū)的TATA、35區(qū)的TGACA及增強子，弱化子等。12．DNADNA探針探針是帶有標記的一段已知序列DNA，用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應用。13．SDSD序列序列是核糖體與MRNA結合序列，對翻譯起到調(diào)控作用。14．單克隆抗體單克隆抗體只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。15．考斯質(zhì)?？妓官|(zhì)粒是經(jīng)過人工構建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩端的COS區(qū)，與質(zhì)粒連接構成。16．藍白斑篩選白斑篩選含LACZ基因（編碼Β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產(chǎn)生藍色，從而使菌株變藍。當外源DNA插入后，LACZ基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細菌。稱之為藍白斑篩選。17．順式作用元件順式作用元件在DNA中一段特殊的堿基序列，對基因的表達起到調(diào)控作用的基因元件。18．KLENOWKLENOW酶DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性19．錨定錨定PCRPCR用于擴增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚DG的尾巴，然后分別用多聚DC和已知的序列作為引物進行PCR擴增。20．融合蛋白融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接，同時表達翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填空1．DNA的物理圖譜是DNA分子的（限制性內(nèi)切酶酶解限制性內(nèi)切酶酶解）片段的排列順序。2．RNA酶的剪切分為（自體催化自體催化）、（異體催化異體催化）兩種類型。3．原核生物中有三種起始因子分別是（IF1IF1）、（IF2IF2）和（IF3IF3）。4．蛋白質(zhì)的跨膜需要（信號肽信號肽）的引導，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構象3分別是（TFIID）、（SP1SP1）和（CTF/NF1CTF/NF1）。21．RNA聚合酶Ⅱ的基本轉錄因子有、TFⅡA、TFⅡB、TFIID、TFⅡE他們的結合順序是（D、A、B、E）。其中TFIID的功能是（與TATATATA盒結合盒結合）。22．與DNA結合的轉錄因子大多以二聚體形式起作用，轉錄因子與DNA結合的功能域常見有以下幾種（螺旋螺旋轉角轉角螺旋螺旋）、（鋅指模體鋅指模體）、（堿性堿性亮氨酸拉鏈模體亮氨酸拉鏈模體）。23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對稱軸在對稱軸55側切割產(chǎn)生側切割產(chǎn)生55粘端粘端）、（在對稱軸對稱軸33側切割產(chǎn)生側切割產(chǎn)生33粘端粘端）（在對稱軸處切割產(chǎn)生平段在對稱軸處切割產(chǎn)生平段）。24．質(zhì)粒DNA具有三種不同的構型分別是（SCSC構型構型）、（OCOC構型構型）、（L構型構型）。在電泳中最前面的是（SCSC構型構型）。25．外源基因表達系統(tǒng)，主要有（大腸桿菌大腸桿菌）、（酵母酵母）、（昆蟲昆蟲）和（哺乳類細胞表哺乳類細胞表）。26．轉基因動物常用的方法有（逆轉錄病毒感染法逆轉錄病毒感染法）、（DNADNA顯微注射法顯微注射法）、（胚胎干細胞胚胎干細胞法）。三、簡答1．分別說出分別說出5種以上種以上RNARNA的功能的功能轉運RNATRNA轉運氨基酸；核蛋白體RNARRNA核蛋白體組成成；信使RNAMRNA蛋白質(zhì)合成模板；不均一核RNAHNRNA成熟MRNA的前體；小核RNASNRNA參與HNRNA的剪接；小胞漿RNASCRNA/7SLRNA蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號識別體的組成成分；反義RNAANRNA/MICRNA對基因的表達起調(diào)節(jié)作用；核酶RIBOZYMERNA有酶活性的RNA2．原核生物與真核生物啟動子的主要差別．原核生物與真核生物啟動子的主要差別原核生物TTGACATATAAT起始位點3510真核生物增強子GCCAATTATAA5MGPP起始位點11070253．對天然質(zhì)粒的人工構建主要表現(xiàn)在哪些方面．對天然質(zhì)粒的人工構建主要表現(xiàn)在哪些方面天然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對之進行改造構建A、加入合適的選擇標記基因，如兩個以上，易于用作選擇,通常是抗生素基因。B、增加或減少合適的酶切位點，便于重組。C、縮短長度，切去不必要的片段，提高導入效率，增加裝載量。D、改變復制子，變嚴緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。E、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件4．舉例說明差示篩選組織特異．舉例說明差示篩選組織特異CDNACDNA的方法的方法制備兩種細胞群體，目的基因在其中一種細胞中表達或高表達，在另一種細胞中不表達或低表達，然后通過雜交對比找到目的基因。例如在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細胞會呈現(xiàn)與正常細胞表達水平不同的MRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關的基因。也可利用誘導的方法，篩選出誘導表達的基因。5．雜交瘤細胞系的產(chǎn)生與篩選．雜交瘤細胞系的產(chǎn)生與篩選脾B細胞骨髓瘤細胞，加聚乙二醇（PEG）促進細胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B骨髓瘤融合細胞繼續(xù)擴大培養(yǎng)。細胞融合物中包含脾脾融合細胞不能生長，脾細胞不能體外培養(yǎng)。

簡介：臨床微生物學病例床微生物學病例匯總試題匯總試題與答案與答案1958年某城市煉鋼工人不慎大面積燒傷，并造成細菌性感染，經(jīng)檢測為銅綠假單胞菌綠膿桿菌，使用了當時僅有的幾種抗生素治療，未取得明顯療效，后經(jīng)某醫(yī)學院分離出此菌，并找到該菌對應的特異性噬菌體，經(jīng)該噬菌體治療后取得明顯療效。思考題噬菌體治療后獲得明顯療效的相關機制及其此案例給予的啟示。王小姐前段時間嘴角邊長了一個小癤，紅腫間可見一小膿點，自覺不好看，就對著鏡子將小、腫癤擠了。可第二天起來發(fā)覺面部紅腫，并惡寒、發(fā)熱、頭痛、全身不適，到醫(yī)院后出現(xiàn)意識模糊，經(jīng)醫(yī)生檢查，診斷為顱內(nèi)化膿性感染。思考題患者面部癤腫為何導致顱內(nèi)化膿性感染患者，男，72歲。因反復咳嗽、咳痰20余年，加重5天就診，臨床診斷為慢性支氣管炎急性發(fā)作。該患者曾用過的抗菌藥物主要包括復方新諾明、氨芐西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、頭孢曲松、頭孢氨芐等，痰標本微生物學檢查發(fā)現(xiàn)肺炎克雷伯菌，藥物敏感試驗結果顯示該病原菌對復方新諾明、氨芐西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、頭孢曲松、頭孢氨芐均為耐藥。思考題1．該患者曾用過的抗菌藥物分別屬于哪些種類2．該細菌對這些不同種類抗菌藥物形成耐藥性的機制是什么3．在患者的后續(xù)治療中應當怎樣防止該細菌耐藥性的進一步形成與擴散女嬰，11個月，入院時，低熱，皮膚全身性紅斑。48小時后，全身大多數(shù)皮膚松馳起皺，繼以大片脫落。女嬰所患的不是急性病，但看起來像剛被燙傷過一樣。從她皮膚中未分離出不尋常的細菌，但在其外耳道分離出葡萄球菌噬菌體Ⅱ群菌株。住院10天后，女嬰全愈，沒有留下疤痕。⒈該女嬰最可能患有2該致病菌是如何傳播的患兒的這次臨床表現(xiàn)與3周前發(fā)熱咽痛是否有聯(lián)系一位7歲男孩因突然高熱（405℃）來看急診。他母親訴說兒子頸項強直，嗜睡，胸腹部出現(xiàn)紅疹，逐漸融合成一片片淤斑，并出現(xiàn)噴射狀嘔吐。腰穿刺檢查顯示腦脊液混濁，有大量中性粒細胞和革蘭陰性菌。⒈最可能感染的病原菌是A肺炎鏈球菌B流感嗜血桿菌C腦膜炎球菌D破傷風梭菌E傷寒沙門菌⒉治療首選藥物是A紅霉素B磺胺藥物C諾氟沙星D四環(huán)素E頭孢曲松⒊目前預防該病發(fā)生應接種哪類疫苗A單價莢膜多糖疫苗B多價莢膜多糖疫苗C類毒素D減毒口服活疫苗E基因工程疫苗一個4歲女孩因發(fā)燒、游走性關節(jié)炎和心肌炎而入院，其父母陳述大約兩周前，

簡介：目錄內(nèi)容提示I作者簡介I序II作者自序VIII第一部分丑陋的孔雀──人體審美的社會生物學1第一章沒有定義的“美”──比較的方法2第二章生物學的悲哀──走出死胡同3第三章丑陋的孔雀──殘疾的美7第四章女性美一脂肪的存積──欺騙與夸張11第五章女性美二容貌與形體──虛榮與務實之間23第六章男性美一男以強為貴──攻擊與力量的夸張32第七章男性美二將軍肚的炫耀──財富與經(jīng)驗的象征40第八章女性美三隱蔽的排卵──性欲的爆發(fā)戶45第九章女性美四女以弱為美──幼化與老化55第十章男性美三陽具崇拜──精子競爭64第十一章黑頭發(fā)的誘惑──東西方審美比較76第十二章兩性誰更美──上帝的回答81結語一美的定義──最后的比較84第二部分生殖的人──人類性行為的社會生物學87第十三章性行為的涵義──無限的話題90第十四章兒童性欲與女子性行為──生存與生殖94第十五章誰是孩子的父親──永恒的情結102第十六章男子的性對象錯亂與性別隱蔽──適應與變態(tài)110第十七章俄狄浦斯情結──性印記與符號刺激118第十八章女性的性選擇與性心理──萬種風情是自然127結語二弗洛伊德的社會生物學──超越性欲135第三部分軟弱的狼──人類宗教本能的社會生物學137第十九章軟弱的狼──狗和他的父親140第二十章馬的上進心──假想的敵人146第二十一章雞蟲得失──鳳凰的起源148第二十二章原罪──上帝的恩惠155第二十三章祖先崇拜──原始的宗教157第二十四章權威的誕生──自卑與壓抑160第二十五章水性的力量──恐懼與自虐164第二十六章藝術的起源──一只殘疾的孔雀168第二十七章看破紅塵──痛苦的生物學175第二十八章逃避自由──群體與安全179第二十九章共同的上帝──金錢的社會生物學起源186結語三孔雀的尾巴──人類本能的外衣191書評（一）生物學家看孔雀193攥著石頭，在茫茫夜色中尋找著回駐地的路。不巧進入藏獒的領地，他利用自己的行為學知識，與藏獒對峙，后安全脫險。促成這本書的寫作，大概還是在他的博士階段。他讀了博士之后，有段時間在北京學習。記得當時他常常騎著一輛破舊的自行車到北京圖書館（現(xiàn)在的國家圖書館）查閱文獻資料。當時我也在北京師范大學攻讀博士學位，他住在中關村。我們經(jīng)常在一起討論一些問題。再后來，我到了位于中關村的中國科學院動物研究所做博士后研究人員，這樣就有更多的機會與他在一起了。更巧的是，我們倆有段時間還在同一個辦公室，所以對他的思想和學問了解得就多了些。那時的他就很著迷人類行為的一些話題，經(jīng)常對一些社會問題和人類的行為表現(xiàn)發(fā)表一些見解，并試著用進化生物學的理論進行一些解釋。我當時就對他的一些觀點很感興趣，感嘆他思考問題的特殊視角，雖然知道人類的行為學特征是很復雜的，尤其是人的生物性和社會性合在一起就更不容易理出一個頭緒來了。序2當時關于人類行為進化的研究不是很多，學術著作很難見到。關于人類行為中最吸引人的當數(shù)性行為了。記得中國人民大學的一位教授敢于從社會學的角度研究國人的性行為，曾有文章和著作出版。當時國內(nèi)也翻譯出版了性學大師金西的人類男性性行為和人類女性性行為等經(jīng)典著作。這些著作是通過問卷調(diào)查的方式，科學地分析了人類性行為的一些模式和在各類人群中的分布情況，并沒有涉及性行為的起源和進化問題。在當時也有些翻譯出版的著作如波伏娃的女人──第二性和莫里斯的裸猿等，涉及了女性的生理和人類性行為的進化等問題。當然北京圖書館的一些學術期刊如行為生態(tài)學和社會生物學，是專門刊登動物或靈長類（包括人類）的行為學研究論文的，姜永進當時時常去閱讀這些刊物。從他的著作中所引用的資料尚可看到這些痕跡。再說說這部著作。作者稱，這部著作主要有三個目的，一是讓國人了解人類社會行為的生物學基礎，二是讓國人重新認識進化論，三是分析審美的生物學基礎?！坝懻搶徝赖纳飳W起源與發(fā)展，是本書的根本意圖”。在這本書里，姜永進“依據(jù)社會生物學的基礎理論，用通俗的語言、生動直觀的描述、廣泛的比較和嚴密的推論，深入淺出地闡釋了人體美的進化史和人類性行為的社會生物學含義”，向我們講述了“從毛茸茸的猿猴到冰清玉潔的女體，不是神話；人類體型的進化史就是生殖利益的競爭史；女人的進化過程是欺騙和夸張的過程；男人的進化過程則是競爭和精子競爭的過程”，最后得出了“欺騙導致和諧、夸張產(chǎn)生美、殘疾有利于生殖”這一所謂的生命界的審美起源的結論。真是語不驚人誓不休在這部著作中，作者以其超凡的思維和筆鋒，用進化生物學的觀點分析了男女差異、種族差異、配偶選擇、攻擊與服從、處女膜禁忌、同性戀、偷情、戀父、精子競爭等等問題，分析了為什么“楚王好細腰”，為什么“情人眼里出西施”，為什么男人喜歡漂亮的女性，女性喜歡強壯的男人為什么女人羞羞答答，男人爭強好勝為什么“鮮花”經(jīng)常會插在“牛糞”上盡管作者力圖用通俗易懂的語言進行描述，但我覺得要真正理解書中所涉及的內(nèi)容和相關的理論，達爾文和進化生物學的一些基本思想是需要了解和具備的。達爾文，這位偉大的生物學家，奠定了進化生物學的理論基礎。1859年出版了他的曠世之作物種起源，這標志著進化論的誕生。這部著作的核心思想是，物種是可變的，生物是不斷進化的；自然選擇是生物進化的動力。在生存競爭中，生存能力強的個體會有更多的機會生存和產(chǎn)生較多的后代，使種族得以繁衍下去；生存能力弱的個體則逐漸被淘汰。這就是所謂的“適者生存”。這個過程的結

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簡介：一、名詞解釋1SNP單核苷酸多態(tài)性SINGLENUCLEOTIDEPOLYMORPHISM，SNP,主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。它是人類可遺傳的變異中最常見的一種。占所有已知多態(tài)性的90以上。SNP在人類基因組中廣泛存在，平均每500～1000個堿基對中就有1個，估計其總數(shù)可達300萬個甚至更多。；2MRNA的選擇性剪切；的選擇性剪切；前體MRNA的剪接是基因表達調(diào)控中的重要環(huán)節(jié)，也是生物功能多樣性的分子機制之一目前已知它包括兩種互相關聯(lián)的機制組成性剪接和選擇性剪接或稱調(diào)節(jié)性剪接。在組成性剪接中，剪接位點不因細胞種類發(fā)育階段或環(huán)境而改變，因而最終形成的基因表達產(chǎn)物也是不變的。而選擇性剪接則不同，作為基因多樣性的分子機理，它選擇性地對內(nèi)含子或外顯子進行剪接，從而將同一種前體MRNA剪接成多種不同的成熟MRNA，進而表達多個可能具有不同生理學功能的蛋白質(zhì)，最終影響生理功能的調(diào)節(jié)3抑癌基因；抑癌基因；編碼對腫瘤形成起阻抑作用的蛋白質(zhì)的基因。正常情況下負責控制細胞生長和增殖。當這些基因不能表達，或者當其產(chǎn)物失去活性時，可導致細胞癌變。如P53基因和成視網(wǎng)膜細胞瘤基因RB基因。4基因芯片；基因芯片；固定有寡核苷酸、基因組DNA或互補DNA等的生物芯片。利用這類芯片與標記的生物樣品進行雜交，可對樣品的基因表達譜生物信息進行快速定性和定量分析。二、簡答題1限制性內(nèi)切酶及影響因素；限制性內(nèi)切酶及影響因素；生物體內(nèi)能識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內(nèi)切核酸酶。它可以將外來的DNA切斷，即能夠限制異源DNA的侵入并使之失去活力，但對自己的DNA卻無損害作用，這樣可以保護細胞原有的遺傳信息。由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進行的，故名限制性內(nèi)切酶簡稱限制酶。2熒光定量熒光定量PCR及影響因素；及影響因素；熒光定量PCR是一種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程，結合相應的軟件可以對產(chǎn)物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。引物的設計和選擇符合熒光PCR的探針并進行設計對于實時熒光PCR尤其重要。1靶基因的確定選擇檢測組共有的基因以避免檢測的假陰性漏檢。2檢測片段的確定選擇檢測組內(nèi)的保守突變少（避免假陰性）、組間特異的序列突變多（避免假陽性）作為引物探針的設計位置。片段長度70150BP。3引物長度1725BPGC含量3080退火溫度TM值5860℃；避免穩(wěn)定的引物二聚體（特別是多聯(lián)檢測）及發(fā)夾結構自由能大于35KC/M；序列不能出現(xiàn)連續(xù)的G，3’端避免G或C，最后5個堿基內(nèi)避免兩個以上的G或C。4探針長度2030BP（TAQMAN或1625BPMGB；GC含量3080；TM值為6870℃；避免穩(wěn)定的二聚體及發(fā)夾結構自由能大于35KC/M；5’端不能是G；位置盡量靠近上游引物；選擇波長差異較大（多聯(lián)檢測）或FAM單聯(lián)檢測）的熒光標記。5其他引物退火溫度,引物濃度引物、探針的純度和穩(wěn)定性熱啟動鎂離子濃度模板質(zhì)量模板濃度防止殘余CARRYOVER污染3癌基因活化的分子機制；癌基因活化的分子機制；（一）獲得啟動子與增強子。當逆轉錄病毒的長末端重復序列含強啟動子和增強子插入原癌基因附近或內(nèi)部時，啟動下游基因的轉錄，導致癌變。（二）基因易位染色體易位重排，導致原來無活性的原癌基因移至強啟動子或增強子附近而活化。（三）原癌基因擴抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，可對部分有明確基因突變的惡性腫瘤細胞如含有BCL/ABL或AML1/MTG8融合基因的白血病細胞產(chǎn)生凋亡誘導作用。此外尚可通過使用腫瘤特異性啟動子如HTERT啟動子、SURVIVIN啟動子或組織特異性啟動子如酪氨酸酶啟動子、骨鈣素啟動子引導針對某些癌基因或抗凋亡分子的SIRNA或SHRNA表達，從而達到特異性殺傷腫瘤細胞的目的。RNAI在整形外科領域的應用前景已證實NRAS或BRAF的激活型突變是引發(fā)黑素瘤的主要病因，其中66的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變?yōu)橄汆堰试斐傻?99位的纈氨酸突變?yōu)楣劝彼崴?。使用RNAI技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因治療奠定了基礎。最近研究表明趨化因子受體CXCR4是乳腺癌轉移的重要調(diào)節(jié)因素，其配體CXCL12可趨化腫瘤細胞并調(diào)節(jié)其增生和侵襲特性。使用RNAI干擾技術剔除CXCR4證實該分子為原位移植腫瘤生長和轉移所必需。此外，剔除BCRP表達可以逆轉其介導的腫瘤耐藥。瘢痕疙瘩是一種較為難治的疾病，目前尚無有確切療效的治療方法。使用特異性SIRNA剔除TGFΒII型受體表達可以抑制角膜成纖維細胞表達纖維粘連蛋白并降低其遷移能力。剔除CTGF表達可使皮膚成纖維細胞內(nèi)I型和III型前膠原蛋白、堿性成纖維細胞生長因子、組織金屬蛋白酶抑制因子（TISSUEINHIBITOROFMETALLOPROTEINASE，TIMP）1，TIMP2和TIMP3等基因表達水平降低。這些結果提示TGFΒ信號轉導通路和CTGF均可能是瘢痕疙瘩治療的潛在靶點。病毒性疾病的治療加州大學洛杉磯分校和加州理工學院的研究人員開發(fā)出使用RNAI技術來阻止艾滋病病毒進入人體細胞。這個研究小組設計合成的LENTI病毒載體引入SIRNA，激發(fā)RNAI使其抑制了HIV1的CORECEPTORCCR5進入人體外周T淋巴細胞，而不影響另一種HIV1主要的CORECEPTORCCR4，從而使以LENTI病毒載體為媒介引導SIRNA進入細胞內(nèi)產(chǎn)生了免疫應答，由此治療HIV1和其他病毒感染性疾病的可行性大大增加。RNAI還可應用于其它病毒感染如脊髓灰質(zhì)炎病毒等，SIRNA已證實介導人類細胞的細胞間抗病毒免疫，用SIRNA對MAGI細胞進行預處理可使其對病毒的抵抗能力增強。在最近全世界約30個國家和地區(qū)散發(fā)或流行的嚴重急性呼吸綜合征SEVEREACUTERESPIRATORYSYNDROME，SARS）的防治研究中，RNAI也受到了重視。SIRNA在感染的早期階段能有效地抑制病毒的復制，病毒感染能被針對病毒基因和相關宿主基因的SIRNA所阻斷，這些結果提示RNAI能勝任許多病毒的基因治療，RNAI將成為一種有效的抗病毒治療手段。這對于許多嚴重的動物傳染病的防治具有十分重大的意義。遺傳性疾病的治療美國西北大學的CARTHEWRW和日本基因研究所的ISHIZUKAA等人發(fā)現(xiàn)RNAI同脆性X染色體綜合征（與FMR1基因異常有關的導致智力低下的染色體?。┲g的關系密切，揭示了與RNAI相關機制的缺陷可能導致人類疾病的病理機制。遺傳性疾病的RNAI治療成為當今研究RNAI的又一大熱點。腫瘤病的治療腫瘤是多個基因相互作用的基因網(wǎng)絡調(diào)控的結果，傳統(tǒng)技術誘發(fā)的單一癌基因的阻斷不可能完全抑制或逆轉腫瘤的生長，而RNAI可以利用同一基因家族的多個基因具有一段同源性很高的保守序列這一特性，設計針對這一區(qū)段序列的DSRNA分子，只注射一種DSRNA即可以產(chǎn)生多個基因同時剔除的表現(xiàn)，也可以同時注射多種DSRNA而將多個序列不相關的基因同時剔除。MAEN等應用RNAI技術成功地阻斷了MCF7乳腺癌細胞中一種異常表達的與細胞增殖分化相關的核轉錄因子基因SP1的功能。盡管化療能有效消滅腫瘤細胞，卻不能有效的靶向腫瘤細胞，因此，在治療過程中導致很多正常細胞的死亡，實現(xiàn)靶向腫瘤細胞同樣也是以RNA干擾為基礎的腫瘤治療的重要發(fā)展方向。目前已有很多針對

簡介：最初在1954年HAVIDT10等人發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)主鏈氨基上的氫原子能夠和溶液中的D交換，。MANDELL15等人將MALDITOFMS和H/D交換聯(lián)合起來并將其作為研究蛋白質(zhì)之間H/D交換質(zhì)譜分析法在結構生物學研究中的應用袁航，劉艷，陳培燕，林東海，趙玉芬5101520（廈門大學化學化工學院，化學生物學系，化學生物學福建省重點實驗室，福建廈門361005）摘要氫氘交換和質(zhì)譜相結合的分析方法廣泛應用于蛋白質(zhì)的構象及其動力學研究，其具有樣品用量少、快速、靈敏、簡便的優(yōu)點。本論文著重從氫氘交換的原理及相關機制；影響氫氘交換的各個因素；氫氘交換質(zhì)譜法中常用質(zhì)譜檢測儀器，以及質(zhì)譜檢測分析法等四個方面進行概述。關鍵詞生物有機質(zhì)譜；氫氘交換；結構生物學；綜述H/DEXCHANGEANDMASSSPECTROMETRYINSTRUCTURALBIOLOGYYUANHANG,LIUYAN,CHENPEIYAN,LINDONGHAI,ZHAOYUFENKEYLABORATORYFORCHEMICALBIOLOGYOFFUJIANPROVINCE,DEPARTMENTOFCHEMICALBIOLOGY,DEPARTMENTOFCHEMISTRY,COLLEGEOFCHEMISTRYANDCHEMICALENGINEERING,XIAMENUNIVERSITY,FUJIANXIAMEN361005ABSTRACTTHECOMBINATIONOFH/DEXCHANGEHDXANDMASSSPECTROMETRYTECHNOLOGYISWIDELYAPPLIEDTOTHEKINETICANDCONFORMATIONALSTUDIESOFPROTEINSTHEHDXMSMETHODHASSOMEADVANTAGES,SUCHASFEWERSAMPLES,FASTDETECTIONANDMORESENSITIVETHANTHETRADITIONALMETHODSINTHISREVIEW,WEDISCUSSEDFOURMAINCONTENTSINDETAILS,CONTAININGTHEPRINCIPLEANDTHEMECHANISMOFTHEEXCHANGE,THEEFFECTSONTHEHDX,THEAPPLICATIONOFTHEEQUIPMENTS,ANDTHESPECIFICHDXMSMETHODSKEYWORDSBIOORGANICMASSSPECTROMETRYH/DEXCHANGESTRUCTURALBIOLOGYREVIEW250引言目前，結構生物學的研究方法主要包括XRAY1，NMR2和MS3等技術。XRAY能夠獲得詳細的結構信息，然而衍射效果好的蛋白質(zhì)晶體不容易得到，耗時長，往往事倍功半，因此這種方法具有很大的局限性47。NMR和MS是研究結構生物學最常用的兩種工具，但303540是NMR對濃度的要求要高于質(zhì)譜2個數(shù)量級，同時核磁的檢測受到蛋白質(zhì)大小的限制，在≦30KDA的條件下才能夠準確測定。此外，NMR的靈敏度、蛋白質(zhì)的溶解度、分析時間的長短、獨立氨基質(zhì)子的分配等也是NMR技術的障礙8。MS可以在FMOL水平上準確分析分子量高達幾萬到幾十萬的生物大分子，具有樣品消耗量少、分辨率高、準確性強、操作簡便的優(yōu)勢，并且能夠和其他的技術如液相色譜、氣相色譜、毛細管電泳技術聯(lián)用進行復雜樣品的分離分析9。〕從而通過對蛋白質(zhì)主鏈的氫氘交換來調(diào)控蛋白質(zhì)在溶液中的溶解度。1993年，ZHANG11等人將氫氘交換和MS聯(lián)用能夠在不改變蛋白質(zhì)結構的情況來探測蛋白質(zhì)的溶解度。NMR和H/D交換聯(lián)用可以測得蛋白質(zhì)特定位點的氫氘交換率，但是有些氨基上的氫原子交換速率太快，對于絕大部分的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)之間的相互作用的研究，采用NMR技術還是無法做到的1214基金項目教育部新教師基金（200803841009）作者簡介袁航，（1987），女，研究生，主要研究方向生物有機質(zhì)譜。通信聯(lián)系人劉艷，1976，女，副教授，主要研究方向生物有機質(zhì)譜EMAILSTACYLIUXMUEDUCN1圖2HDX交換機制示意圖。A為EX1機制，B為EX2機制。FIG2THEH/DEXCHANGEMECHANISMAEX1BEX275EX1機制（圖2A）中，氫氘交換速率K2遠遠大于重新折疊的速率；而EX2機制（圖2B）中，重新折疊和內(nèi)在的氫氘交換反應發(fā)生競爭，只有在發(fā)生了一部分重新折疊反應后，氫氘交換才能進行完全。EX機制用公式表示如下式1所示27XHCLOSEDKOPXHOPENKCHEXCHANGEKCL808590其中，KOP和KCL分別是特定交換位點的開關速率常數(shù)，KCH為化學交換速率常數(shù)，可以表征完全未被保護的氫的交換動力學，對于氨基上的氫，某位點上KCH值取決于其相鄰的氨基酸側鏈和PD值PDPH0428。在PH≥4時，化學交換速率受堿催化的影響，因此KEX隨著PH的增加而增大，因此可以依據(jù)KEX隨PH的變化來判斷EX1和EX223。從二肽模型化合物中獲得的參考數(shù)據(jù)對于任意溶劑條件下的KCH值的評估很有參考價值2931。在EX2機制中，KCLKCH，整體的交換速率常數(shù)為KEX。KEXKOPKCH，則KOPKOP/KCL是特定位點打開反應的速率常數(shù)，在EX2條件下，在交換反應未發(fā)生之前許多的位點處于打開的構象狀態(tài)。相反的，在EX1條件下，KCHKCL，在蛋白質(zhì)的開放區(qū)域將會發(fā)生完全的氘標記，此時KEXKOP〔32在自然狀態(tài)下，氨基HDX會遵循EX2機制，但是在蛋白質(zhì)失活的條件下，交換更傾向于EX13337。如果某種蛋白質(zhì)有兩種構象，當交換速率遠遠大于構象轉換速率時，質(zhì)譜會檢測到雙峰（EX1）；如果結構轉換速率遠遠大于交換速率時，只可能檢測到單峰，此時采用的是EX2機制，如圖3所示從圖3可以看出HMB在標記時間達21S時出現(xiàn)雙峰，這是由于EX2機制下其結構發(fā)生了改變，并且質(zhì)量大的碎片峰逐漸升高，質(zhì)量小的逐漸消失，這是由于EX1機制的作用。3

簡介：西北農(nóng)林科技大學微生物學試題庫填空每小題1分,共10分1真核微生物核糖體類型為80S線粒體和葉綠體中的核糖體為70S。2大腸桿菌長為20ΜM,寬為05ΜM,其大小表示為05ΜMX20ΜM。3研究細菌遺傳、代謝性能常采用對數(shù)生長時期的細胞。4酵母菌細胞壁的主要成份葡聚糖和甘露聚糖。5侵染寄主細胞后暫不引起細胞裂解的噬菌體稱溫和噬菌體（溶源性噬菌體）。6微生物細胞的主要組成元素是蛋白質(zhì)，核酸，類脂和碳水化合物。7食用菌是由營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲組成。8用物理或化學方法殺死物品上大部分微生物的過程稱滅菌。9細菌細胞的碳、氮營養(yǎng)比為6/1。10根瘤菌可與豆科植物共生固氮。二、單項選擇在每小題的四個備選答案中,選出一個正確的答案,并將其碼寫在題干的○內(nèi),每小題1分,共40分。1組成病毒粒子核髓的化學物質(zhì)是○①糖類②蛋白質(zhì)③核酸④脂肪2常用于飲水消毒的消毒劑是○①石灰②CUSO41③KMNO4④漂白粉3以高糖培養(yǎng)酵母菌,其培養(yǎng)基類型為○①加富培養(yǎng)基②選擇培養(yǎng)基③鑒別培養(yǎng)基④普通培養(yǎng)基4多數(shù)霉菌細胞壁的主要成分為○①纖維素②幾丁質(zhì)③肽聚糖④葡聚糖和甘露聚糖5屬于細菌細胞基本結構的為○①莢膜②細胞壁③芽胞④鞭毛6酵母菌常用于釀酒工業(yè)中,其主要產(chǎn)物為○①乙酸②乙醇③乳酸④丙醇7土壤中三大類群微生物以數(shù)量多少排序為○①細菌＞放線菌＞真菌②細菌＞真菌＞放線菌③放線菌＞真菌＞細菌④真菌＞細菌＞放線菌8噬菌體屬于病毒類別中的○①微生物病毒②昆蟲病毒③植物病毒④動物病毒9常用消毒酒精的濃度的○①30②70③95④100①子囊孢子②擔孢子③粉孢子④接合孢子27根霉和毛霉在形態(tài)上的不同點是○①菌絲無橫隔②多核③蓬松絮狀④假根28只在液體表面出現(xiàn)菌膜的微生物屬○①厭氧型微生物②兼性厭氧型微生物③好氧型微生物④微需氧型微生物29半固體培養(yǎng)基中,瓊脂使用濃度為○①0②0207③1520④50藍藻的營養(yǎng)類型為○①光能自養(yǎng)型②化能自養(yǎng)型③光能異養(yǎng)型④化能異養(yǎng)型31常用消毒酒精的濃度為○①998②30③70④502霉菌適宜生長的PH范圍為○①＜40②4060③6580④8033放線菌屬于○①病毒界②原核原生生物界③真菌界④真核原生生物界34土壤中三大類群微生物以數(shù)量多少排序為○①細菌＞放線菌＞真菌②細菌＞真菌＞放線菌③放線菌＞真菌＞細菌④真菌＞細菌＞放線菌35下列微生物中不能利用分子氮的是○①霉菌②弗蘭克氏菌③根瘤菌④圓褐固氮菌36屬于傘菌目的是○①銀耳②猴頭③香菇④木耳37加大接種量可控制少量污染菌的繁殖,是利用微生物間的○①互生關系②共生關系③競爭關系④拮抗關系38接種環(huán)常用的滅菌方法是○①火焰滅菌②干熱滅菌③高壓蒸汽滅菌④間歇滅菌39沼氣發(fā)酵中發(fā)酵液的最適PH值為○①＜55②5564③6。872④＞7640白僵菌為生產(chǎn)上應用最多的昆蟲病原○①細菌②放線菌③真菌④病毒三、判斷正誤認為正確的,在題后○內(nèi)打“√“錯誤的打““,并說明理由,不說明理由,該題無分。每小題2分,共10分1原核微生物的主要特征是細胞內(nèi)無核○√