分子生物學(xué)試題及答案重點(diǎn)版

1、1廣石化分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋1．cDNA cDNA 與 cccDNA cccDNA：cDNA 是由 mRNA 通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈 DNA；cccDNA 是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形 DNA。2．標(biāo)準(zhǔn)折疊單位 標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元 α－螺旋與 β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因

2、此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3．CAP CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白 CRP（cAMP receptor protein ） ，cAMP 與 CRP 結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白 CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列 回文序列：DNA 片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。5．micRNA micRNA：互補(bǔ)干擾 RNA 或稱反義 RNA，與 mRNA 序列互補(bǔ)，可抑制 mRNA

3、的翻譯。6．核酶 核酶：具有催化活性的 RNA，在 RNA 的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7．模體 模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8．信號(hào)肽 信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中 N 端有 15~36 個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9．弱化子 弱化子：在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10．魔斑 魔斑：當(dāng)細(xì)菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，

4、停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp） 。PpGpp 與 pppGpp 的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。11．上游啟動(dòng)子元件 上游啟動(dòng)子元件：是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的 DNA 序列，-10 區(qū)的TATA、-35 區(qū)的 TGACA 及增強(qiáng)子，弱化子等。12．DNA DNA 探針 探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列 DNA，用以

5、檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。13．SD SD 序列 序列：是核糖體與 mRNA 結(jié)合序列，對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14．單克隆抗體 單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。15．考斯質(zhì)粒 考斯質(zhì)粒：是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源 DNA 載體，保留噬菌體兩端的 COS 區(qū)，與質(zhì)粒連接構(gòu)成。16．藍(lán)-白斑篩選 白斑篩選：含 LacZ 基因（編碼 β 半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物 X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半

6、乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源 DNA 插入后，LacZ 基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)-白斑篩選。17．順式作用元件 順式作用元件：在 DNA 中一段特殊的堿基序列，對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。18．Klenow Klenow 酶：DNA 聚合酶 I 大片段，只是從 DNA 聚合酶 I 全酶中去除了 5’ → 3’外切酶活性19．錨定 錨定 PCR PCR：用于擴(kuò)增已知一端序列的目的 DNA。

7、在未知序列一端加上一段多聚 dG 的尾巴，然后分別用多聚 dC 和已知的序列作為引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增。20．融合蛋白 融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填 空1． DNA 的物理圖譜是 DNA 分子的（限制性內(nèi)切酶酶解 限制性內(nèi)切酶酶解 ）片段的排列順序。2． RNA 酶的剪切分為（自體催化 自體催化 ） 、 （異體催化 異體催化 ）兩種類型。3．原核生物中有三種

8、起始因子分別是（IF-1 IF-1） 、 （ IF-2 IF-2 ）和（IF-3 IF-3 ） 。4．蛋白質(zhì)的跨膜需要（ 信號(hào)肽 信號(hào)肽 ）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象3分別是（ TFIID ） 、 （ SP-1 SP-1 ）和（ CTF/NF1 CTF/NF1 ） 。21．RNA 聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E 他們的結(jié)合順序是： （ D、A、B、E ） 。其中 TFII

9、-D 的功能是（與 TATA TATA 盒結(jié)合 盒結(jié)合 ） 。22．與 DNA 結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用，轉(zhuǎn)錄因子與 DNA 結(jié)合的功能域常見有以下幾種（ 螺旋 螺旋-轉(zhuǎn)角 轉(zhuǎn)角-螺旋 螺旋 ） 、 （ 鋅指模體 鋅指模體 ） 、 （堿性 堿性-亮氨酸拉鏈模體 亮氨酸拉鏈模體 ） 。23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸 在對(duì)稱軸 5' 5' 側(cè)切割產(chǎn)生 側(cè)切割產(chǎn)生 5' 5'

10、 粘端 粘端 ） 、 （在對(duì)稱軸 對(duì)稱軸 3' 3' 側(cè)切割產(chǎn)生 側(cè)切割產(chǎn)生 3' 3' 粘端 粘端） （在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段 在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段） 。24．質(zhì)粒 DNA 具有三種不同的構(gòu)型分別是：（ SC SC 構(gòu)型 構(gòu)型 ） 、 （ oc oc 構(gòu)型 構(gòu)型 ） 、 （ L 構(gòu)型 構(gòu)型 ） 。在電泳中最前面的是（ SC SC 構(gòu)型 構(gòu)型 ） 。25．外源基因表達(dá)系統(tǒng)，主要有（大腸桿菌

11、大腸桿菌 ） 、 （ 酵母 酵母） 、 （ 昆蟲 昆蟲 ）和（ 哺乳類細(xì)胞表 哺乳類細(xì)胞表 ） 。26．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有：（逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法） 、 （DNA DNA 顯微注射法 顯微注射法） 、 （胚胎干細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞法 ） 。三、簡 答1． 分別說出 分別說出 5 種以上 種以上 RNA RNA 的功能？ 的功能？轉(zhuǎn)運(yùn) RNA tRNA 轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸 ；核蛋白體 RNA rRNA 核蛋白體

12、組成成 ；信使 RNA mRNA 蛋白質(zhì)合成模板 ；不均一核 RNA hnRNA 成熟 mRNA 的前體 ；小核 RNA snRNA 參與 hnRNA 的剪接；小胞漿 RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分；反義 RNA anRNA/micRNA 對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)節(jié)作用；核酶 Ribozyme RNA 有酶活性的 RNA2．原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要差別？ ．原核生物與真

13、核生物啟動(dòng)子的主要差別？原核生物TTGACA --- TATAAT------起始位點(diǎn) -35 -10真核生物增強(qiáng)子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位點(diǎn) -110 -70 -253．對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？ ．對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？天然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對(duì)之進(jìn)行改造構(gòu)建：a、加入合適的選擇標(biāo)記基因，如兩個(gè)以上，易于用作選擇,通常是抗生素基

14、因。b、增加或減少合適的酶切位點(diǎn)，便于重組。 c、縮短長度，切去不必要的片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。d、改變復(fù)制子，變嚴(yán)緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件 4．舉例說明差示篩選組織特異 ．舉例說明差示篩選組織特異 cDNA cDNA 的方法？ 的方法？制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá)，在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。 例如：在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中