簡(jiǎn)介：華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的EXOSOMES的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用的初步研究姓名任亞娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師高峰范華驊20070501華東師范大學(xué)2007屆碩士論文樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的EXOSOMES的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用的初步研究院系生僉拄堂堂睦專(zhuān)業(yè)壘塹絲堂盞金量生塹堂方向僉至魚(yú)疰堂研究生堡堊縫指導(dǎo)老師壺堅(jiān)盈壅屋堇坐壁煎窒基摘要樹(shù)突狀細(xì)胞DCS分泌的CXOSOMES是來(lái)源于內(nèi)吞途徑的小囊泡，表達(dá)MHCI、Ⅱ類(lèi)分子和共刺激分子等，能夠活化T細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答，在抗腫瘤免疫治療中有著誘人的前景。為了建立DCS分泌的EXOSOMESDEX的制各方法，分析其生物學(xué)特性和在抗腫瘤免疫中的功能，本研究從正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞中誘導(dǎo)未成熟DCSIMDC并使其負(fù)載K562腫瘤細(xì)胞的抗原，然后用脂多糖1IPOPOLYSACCHARIDE，IJPS誘導(dǎo)DCS成熟MDCS，通過(guò)多次超速離心結(jié)合膜超濾的方法提取IMDCS和MDCS分泌的EXOOME酷。檢測(cè)CXOSOMCS的粒徑并通過(guò)電子顯微鏡分析CXOSOMCS的形態(tài)，WESTERNBLOT法檢測(cè)EXOSOMES的表面分子。比較MDCS和IMDCS分泌的CXOSOLLLES引起的針對(duì)飚62抗原特異性T細(xì)胞的增殖、CD69的上調(diào)、細(xì)胞因子刀FN。Y的分泌及對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，制各的EXOSOMES為碟狀小囊泡，平均粒徑為723RIM，表達(dá)CD80、CD86、HIADR、FASL、CD54和MFGE8MILKFATGLOBULEEPIDERMALGROWTHFACTORFACTORVIⅡ。與IMDCS相比，MDCS分泌的EXOSOMES的CD80表達(dá)較高而MFGE8的表達(dá)較低，并且在體外MDCS分泌的EXOSOMES能夠更顯著地引起特異性T細(xì)胞的增殖和免疫應(yīng)答。體外在MDC存在的情況下，20PG／MLINDEX可有效活化T細(xì)胞，T細(xì)胞增殖后2

簡(jiǎn)介：南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文ABCG2在肺癌中的表達(dá)及其對(duì)肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名牛海艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師申洪20080415中文摘要胞。目前認(rèn)為ABCG2就是SP細(xì)胞的表型標(biāo)志，是潛在的干細(xì)胞標(biāo)志物。因此，ABCG2既是一個(gè)新的耐藥基因，又和SP細(xì)胞、腫瘤干細(xì)胞密切相關(guān)，研究其在肺癌中的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，揭示其對(duì)肺癌細(xì)胞基本生物學(xué)特性的影響，有助于深入研究ABCG2與肺癌的關(guān)系，可能會(huì)為肺癌的發(fā)生和防治提供新策略。方法1．ABCG2在肺癌中表達(dá)的定量研究1應(yīng)用免疫組化SP法觀察了86例肺癌鱗癌42例、腺癌31例、大細(xì)胞癌5例，小細(xì)胞癌8例，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者33例和24例癌周肺組織距腫物5CMABCG2蛋白的表達(dá)2應(yīng)用原位雜交觀察了86例肺癌組織中鱗癌42例、腺癌31例、大細(xì)胞癌5例，小細(xì)胞癌8例ABCG2MRNA的表達(dá)3應(yīng)用顯微圖像定量分析，測(cè)試靶細(xì)胞ABCG2蛋白及MRNA表達(dá)的陽(yáng)性單位PU值。2．ABCG2基因沉默對(duì)肺癌細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響I在倒置顯微鏡下觀察肺腺癌細(xì)胞GLC．82和A549的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；應(yīng)用HE細(xì)胞爬片和組織切片比較二者形態(tài)異同；應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞原位雜交、RT熒光定量PCR、WESTERNBLOT和HOECHST33342染色比較GLC．82和A549中ABCG2基因表達(dá)程度。2應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染方法，將含有不同片段的4個(gè)干擾質(zhì)粒、一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒和一個(gè)陰性對(duì)照質(zhì)粒，通過(guò)脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)入GLC．82，用G418反復(fù)篩選純化克隆。用RTPCR法鑒定陽(yáng)性對(duì)照中GAPDH的干擾效率，再用RT熒光定量PCRRTQPCR法鑒定各干擾各隆的干擾效率，并通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)和WESTEMBLOT驗(yàn)證。3應(yīng)用MTR法測(cè)OD值并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布，克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)單細(xì)胞克隆形成率，比較干擾前后細(xì)胞生長(zhǎng)增殖能力Ⅱ

簡(jiǎn)介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)基因馬鈴薯表達(dá)體系中人白細(xì)胞介素12的純化及生物學(xué)活性的鑒定姓名黃進(jìn)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師葛正龍20080501遵義醫(yī)學(xué)院顧I學(xué)位論文轉(zhuǎn)皋L大I馬鈴薯表達(dá)休系中人山細(xì)胞介索一12的純化及生物學(xué)活代的糝定遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。學(xué)位論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均已在學(xué)位論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名簽字日期年月日遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解遵義醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即遵義醫(yī)學(xué)院有權(quán)保留并向有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)遵義醫(yī)學(xué)院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存學(xué)位論文，即遵義醫(yī)學(xué)院具有學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)，信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū)。學(xué)位論文作者簽名簽字日期年月日導(dǎo)師簽名簽字日期年月日

簡(jiǎn)介：西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文STAT3基因轉(zhuǎn)染牛乳腺上皮細(xì)胞及轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的生物學(xué)特性觀察姓名劉甲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師張涌20080501THEB10LOGICALCHARACTERISTICSOFBOVN呵EMAMMARYEPITHELIALCELLSTRANSFECTEDWITHSTAT3GENEABSTRACTSTATSARELATENTTRANSCRIPTIONFACTORS也ATMEDIATECUT拋NE鋤DGROWTHFACTORDIRETED仃蜀11LS謝PTIONKMANYHMNALLCANCERS吼D仃觚SFOMED∞LLLINES，STAT3ISPERSISTENTLYACTICATED，ANDINCENCULTⅧC，ACTIVESTAT3ISEITHERREQUIRED南R仃ANSFOMATION，E11HANCES仃孤SF0MATION，ORBLOCKSAPOPTOSISSTAT3GELLESWERE仃ALLSCRIPTIONFACTORSRALHERACTIVCLYSTLLDIEDINRECEILTYEARSMANYRESE∞CHRESULTSSHOWEDTHATSTAT3EXPRESSEDABNONNALLYINLOTSOF劬MORTISSUESANDCEUSYSTEMS，W，HICHW部CLOSELYRCLATCDT0MEPROLIFERATION鋤DDI任打E加『TIATIONOFTUMOR，CELLAPOPTOSIS，HNMUNEESCAPE，GEILESISOFBLOODVESSELS，ANDIILVASIONMDMETASTASISTHISEXPCRIMENT仃AILS斷EDTHEP1撇IDWHICHWAS誦THSTAT3GENETOBOVINEM鋤M哪EPITLLELIALCELLSN啪UGHTHE1IPOFACT鋤INE2000A11DSTUDIEDNLE111EBI010百CALCHARACT鰣STICSOFBOVINEM鋤MARREPITHELIALCELLS，PUTA劬D鋤EN謝ST印SFORPRODUCING仃ANSGELLICA11IMALSANDCELLIMMORTALIZATION1、BOVINEM鋤儺ARY印ITHELIALCELLSWEREIS01ATED鋤DP戚矗EDBYUSINGCOLLAGENASEDIGESTIONOFTHEM鋤MARR西AILDTISSUEFORMEPFIMA巧CELL伽LTURE，ANDSUBSCQU鋤TLYUSING仃YPSINSELECTEDDIGESTIONOFME饑1衄司CELLSFORODLP嘶FICATIONMO訕0109ICAL0BSERVATIONREVEALEDMATT11ECULTLLRCDCELLSPOSSESSEDTLLETYPICALCHARACTCROF印ITHELIALCELLS2、STAT3SI朗ALTRANSDUCERANDACTIVATOROFTRANS嘶PTION3GENEWASAMPLIFIED舶MPOTB7PLASMID訛CHCONTAINEDHUM鋤STAT3GCLLECDNA矗孵NEILT，TLLEILINS叭EDMOPEGFPCLVECTORTOCONS仃UCTREC0MBINANTPLASMID3、WBCULTILREDTHEBOVINEMAMMA巧EPITHELIALCELLSUSINGDMEMWITH15％FBS，也EN竹ANS斷EDTHESTAT3GEILETOCELLSOF廿LISTYPEMROU曲NLELIPOFACT鋤INE2000ANER48H，WEEX鋤INCDTLLEEXPRESSIONOFEGFPUSILLGNUORESCENTMICROSCOPE，24HOURSAREREXPO則RETOTHERECOMBINANTPL砌IDTLLE乜眥SFECTIONRALEOFTHEBEVCELLSW部L6％，SCREELLEDⅡLECLONEUSING600U咖LG418，也％MAKEDTHEDONEPFOPAGANDAUSING300UG／MLG4184、D舐VEDRNA舶MPOSITIVECLONECDLSALLDDESI弘EDTHEP枷CULARPRIMERTOGOT0THEIMPCRST印ATLAST，MEPOSITIVECELLSSHOWTHEAIMBAND2332BP，THENEGATIVECELLSHAVENOTHESAMEBAND5、FLOWCYTOME缸YWASUSEDT0ANDIYZEMECELLCYCLES、MULTIPLICATIONCAPACITYAND

簡(jiǎn)介：Y927257分類(lèi)號(hào)UDC學(xué)校代碼密級(jí)學(xué)位論文人細(xì)胞中HIW1因子生物學(xué)特性的研究劉長(zhǎng)國(guó)指導(dǎo)教師姓名睦國(guó)塞絲籃塹劌盤(pán)堂婆蒸塹劌IQQ2絲監(jiān)盎盟壅亟主盟瞳亟堡壘直塹I墾室QQ申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別盛學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)勉塹遣堡直壁魚(yú)鳘墮論文提交日期2QQ魚(yú)生5旦論文答辯日期2QQ魚(yú)生三旦學(xué)位授予單位塹劌盤(pán)鱟學(xué)位授予日期答辯委員會(huì)主席堂選煎攮論文評(píng)閱人型叢生塹塞基周盈揚(yáng)墊絲盆主墊塾籃2006年5月16℃表達(dá)16H能夠產(chǎn)生更高的產(chǎn)量。將大腸桿菌破碎液的上清加入到NINTA純化柱中，然后用含20RAM咪唑的PBS充分洗滌后，最后用含LOOMM咪唑的PBS能純化得到質(zhì)量較好的PET22BN391。13將純化得到的HIWSL一N391蛋白免疫大白兔制各多克隆抗體，該抗體特異地識(shí)別AL834178所預(yù)測(cè)蛋白上的第3至391位氨基酸。用該抗體對(duì)HCTLL6細(xì)胞中總蛋白進(jìn)行WESTERN雜交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果有兩個(gè)蛋白被特異性地識(shí)別，其中信號(hào)最強(qiáng)的蛋白大小約92KDA，與AL834178所預(yù)測(cè)蛋白的分子量一致。該結(jié)果證明人細(xì)胞中存在HIWSL蛋白因子，并進(jìn)一步表明該因子嚴(yán)格地遵循GENBANK中AL834178所預(yù)測(cè)的ORF。2小鼠1WSLMLWSL的組織表達(dá)分析由于HIWSI與它的小鼠同源物MOUSEIWSL，MIWSL具有很高的同源性84％的相似性，因此本研究利用小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象研究動(dòng)物中IWSI的組織表達(dá)分布情況。首先從小鼠體內(nèi)分離出有關(guān)器官組織，其中包括大腦、心臟、肝臟、肺、脾臟、胃、腎臟、前列腺、睪丸、子宮、大腸與小腸。接著將這些器官組織中的總RNA提取出來(lái)并反轉(zhuǎn)錄成EDNA，然后以這些EDNA為模板進(jìn)行半定量RTPCR分析。結(jié)果表明MIWSL是個(gè)組織器官普遍性表達(dá)的因子；并且在不同器官組織中的表達(dá)量差異較大，其中腎臟中表達(dá)量最高，其次是睪丸、大腸、小腸與脾臟，而心臟中的表達(dá)量最低。這些結(jié)果意味著IWSL對(duì)于動(dòng)物機(jī)體是個(gè)必需因子，并且它的功能具有組織偏好性。3HIWSL的亞細(xì)胞定位、31將HLWSI的全長(zhǎng)EDNA構(gòu)建到綠色熒光蛋白質(zhì)粒PEGFPC1中，然后將該重組質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HCTLL6和U20S細(xì)胞。熒光顯微鏡觀察結(jié)果表明GFPHIWSI在細(xì)胞中表達(dá)后主要定位在細(xì)胞核中，說(shuō)明HIWSL因子是個(gè)核蛋白。32針對(duì)HIWSL的核蛋白特性，對(duì)HIWSI因子的肽鏈序列進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在HIWSL因子的兩個(gè)功能域的銜接區(qū)第350至557位氨基酸之間有幾個(gè)類(lèi)似核定位信號(hào)NUCLEARLOCALIZATIONSIGNALS，NLSS的基序。為了檢驗(yàn)這個(gè)銜接區(qū)是否具有NLSS作用，將HIWSLEDNA的各種缺失突變體構(gòu)建到綠色熒光蛋白質(zhì)粒PEGFPC1中，然后將這些重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HCTLL6。熒光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果表明GFPN391分布在細(xì)胞核內(nèi)，而GFPN355主要分布在細(xì)胞質(zhì)中，這些結(jié)果表明在HLWSL因子的第356位至第391位氨基酸之間含有NLSS。類(lèi)似地，GFPC389

簡(jiǎn)介：Y1414211學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)B2005252中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生畢業(yè)學(xué)位論文小鼠多潛能成體干細(xì)胞生物學(xué)特性及向樹(shù)突狀細(xì)胞分化的研究BIOLOGICALCHARACTERISTICSOFMOUSEADULTPIURIPOTENTSTEMCESANDDIFFBRENTIATIONINTODENDRITICCELLS所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專(zhuān)業(yè)研究方向完成日期基礎(chǔ)學(xué)院劉瑞趙春華教授趙春華組內(nèi)科學(xué)成體干細(xì)胞2008年6月英文摘要中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文MOSTOFT11EADULTSTEMCELLSR10T011LYGENERATETHOSEMATURECELLT，PESCORRESPONDINGT0T11EI“SSUEOFORIGIN，BUTALSOCROSSTISSUEORGEMLAYERBOUND撕EST0GENERATECELLT，PESOFDI丘ERENTLINEAGES，W11ICHW懿I砌EDASADULTSTEMCELLPLASTICI饑HO、ⅣEVER，TLLEEXPLANATIONSOFADULTSTEMCEUPLASTIC塒REMAINAPOINTOFDISCUSSION鋤DCONTROVERSYONE、ⅣELLACCEPTEDPOSSIBLEMECHANISMFOROBSEN，ATIONOFADULTSTEMCELLPLASTICITRRELATESTOTHEACTIONOFRAREPLURIPOTENTSTEMCELLSPSCSPRESENTINTILETESTCELLPOPULATIONILLTHEFIRSTPART，WEHAVESUCCEEDEDINISOLATINGSCA1CD117LIN。塒MITI、，EPLURIPOTENTSTEMCELLS丘。OMMEMOUSEEMBRYOILICFIBROBLASTPOPULAITONTHISCEUPOPULATIONPOSSESSESTLLEMAINCHARACTERISTICSOFPRIMITIVEPL嘶POTEMSTEMCELLS，INCLUDINGEXPRESSIONOFEMB驢MCSTEMCELLSESCSM婦R’ABIL時(shí)OFGIVINGRISETOMULTIPLE咖ESOFT11REEGE珊LAYERSA11DPOTENTIALOFIMMUNOREGULATIONINVIVOSTUDIESINDICATEDTLLATNLECELLPOPULATIONCOULDPROLONGTHESUⅣIVALOFALLOGENEICSKIILGRARS，AILDSTRILINGLYPROMOTET11ESKINB啪W(wǎng)OULDHEALINGBYDI疏RENTIATINGINTOMULTIPLET，PESOFCELLSMMEDEMALANDEPIDE肌ALTISSUESOUR咖DYWILLHELPUSBETTER吼DERSTAILDTHEPROPERTIESOFPLASTIC時(shí)ANDMAYGREATLYCONTRIBUTETOTHEUSEOFSTEMCELLS嬲ATA】唱ETFORCELLTMSPLAILTATIONANDGENE11LESECONDPARTIILDICATEDTHATT11ESCA1CDLL7。LINPLURIPOTENTSTEMCELLSCOULDBEMDUCEDT0DI位RENTIATEINTOCD11BH訕I(yè)ALOWCD11C10WDEND礬CCELLSDCS晰TLLS仃ONGREGULATO巧缸LCTIONSC印ABLEOFSUPPRESSINGMIXEDLYMPHOCYTEREACTION，ALLOGENEICDELAYEDTYPEHYPERSENSITIVITRA11DREJECTIONOFALLOGENEICSHNGMFTSTHEIII】衄UILEREGULATO巧缸1CTIOILSOFTLLESEDENDRITICCELLSWEREFOULLDT0BEMEDIATEDBYJAGGED2OURSTLJDIESREVEALEDTHATESCLIKEPLURIPOTENTSTEMCELLSEXISTIIL丘ESLLLYISOLATEDMOUSEEN】【BRROILICFIBROBLASTPOPULATIONAILDTHEYC孤DI髓RENTIATEIMODCS晰THS們NGREGULATO巧矗MCTIONSKEYWORDSPLURIPOTENTSTEMCELLSPSCS，MESENCHYMALSTEMCELLSMSCS，DENDRITICCELLSDCS，DIFRERENTIATIOIL，JAGGED3

簡(jiǎn)介：本文對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定及生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。文章通過(guò)穿刺抽取兔髂骨骨髓，用密度梯度離心法和貼壁培養(yǎng)法相結(jié)合，分離兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)擴(kuò)增，繪制其生長(zhǎng)曲線(xiàn)，計(jì)算倍增時(shí)間，測(cè)定細(xì)胞貼壁率和細(xì)胞活力，用倒置顯微鏡、透射電鏡觀察細(xì)胞的生物學(xué)性狀。通過(guò)免疫熒光組織化學(xué)鑒定細(xì)胞，了解其部分表型特點(diǎn)。研究表明密度梯度離心與貼壁培養(yǎng)相結(jié)合，可有效分離和擴(kuò)增骨髓MSCS；分離培養(yǎng)的骨髓MSCS生長(zhǎng)穩(wěn)定，增殖力強(qiáng)，可選用前5代傳代細(xì)胞作為軟骨組織工程的種子細(xì)胞細(xì)胞表面標(biāo)志CD34陰性、CD44陽(yáng)性可作為鑒定骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MSCS的一種方法。

簡(jiǎn)介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人粒細(xì)胞集落刺激因子的克隆、表達(dá)、純化和PEG單修飾以及修飾前后的體內(nèi)外生物學(xué)活性姓名張兵申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師宋禮華20080501學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說(shuō)明并表示謝意學(xué)位論文作者簽名臺(tái)JL日期的越K巴纊學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門(mén)或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)將學(xué)位論文用于非目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，有權(quán)將學(xué)位論又的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論義在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名純要、導(dǎo)師簽日期塒摻彳日

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文論文題目建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的細(xì)胞分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究論文題目建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的細(xì)胞分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究作者姓名作者姓名徐鶯徐鶯指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師施農(nóng)農(nóng)教授施農(nóng)農(nóng)教授學(xué)科專(zhuān)業(yè)學(xué)科專(zhuān)業(yè)遺傳學(xué)遺傳學(xué)所在學(xué)院所在學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院提交日期提交日期2008年4月1日2008年4月1日STUDYOFMOLECULARCELLBIOLOGYANDIMMUNOLOGYOFCYMBIDIUMMOSAICVIRUSANDODONTOGLOSSUMRINGSPOTVIRUSADISSERTATIONFORMASTER’SDEGREESUBMITTEDTOTHEGRADUATESCHOOL,HANGZHOUNORMALUNIVERSITYHANGZHOU,ZHEJIANG,CHINAGRADUATESTUDENTXUYINGSUPERVISORPROFESSORSHINONGNONGMAJORGENETICSAPRIL2008

簡(jiǎn)介：廈門(mén)大學(xué)博士后學(xué)位論文蘭花生殖生物學(xué)研究雄配子體發(fā)育觀察及精細(xì)胞、胚囊、合子、胚分離操作姓名伍成厚申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士后專(zhuān)業(yè)植物學(xué)指導(dǎo)教師田惠橋20081101ABSTRACTABSTRACTBASEDONTHEMATERIALSOFDORITISPULCHERRIMAANDPHALAENOPSISHYBRID，THEDEVELOPMENTOFMALEGAMETOPHYTESWEREOBSERVEDBYTHEMETHODSOFPARAFFINSECTIONSANDPOLLENCOMPRESSIONTHEISOLATIONOFSPERMCELLS，LIVINGEMBRYOSACS，EGGOCELLS，ZYGOTES，ANDPROEMBRYOSINTHESETWOKINDSOFORCHIDWERESTUDIEDRESULTSPRESENTEDINTHISTHESISCANBESUMMARIZEDASFOLLOWS一THEMICROSPORETETRADSARETETRAHEDRAL，ISOBILATERAL，DECUSSATE，TSHAPEDANDREMAININMASSULAEATMATURESTAGETHEPOLLENGRAINSARE2CELLEDPOLLENTUBESWEREINDUCEDINTHEOVARYAFTERMANUALPOLLINATIONANDSPERMCELLSWEREISOLATEDFROMTHETUBESBYIMMEDIATEBLOWUPINABROKENSOLUTIONCONTAINING5％12％MANNIT01THETWOSPERMCELLSISOLATEDWEREDIMORPHISMONEISBIGANDTHEOTHERISSMALL，ANDTHEFLUORESCENTINTENSITYWASDISTINCTLYTHETWOSPERMCELLSCANBEDIVIDEDINTOTWOINDIVIDUALGROUPSBYUSINGAMICROMANIPULATOR一LIVINGEMBRYOSACSCOULDBEISOLATEDBYMANUALMICRODISSECTIONFROMOVLUESAFTERAPRETREATMENTOFCOMBINNATINGENZYMATICMACERATIONWITHSHAKING，BUTEGGCELLSWERENOTISOLATEDINTHEEXPERIMENTSZYGOTESANDPREEMBRYOSCOULDBEISOLATEDBYMANUALMICRODISSECTIONCOMBINNATEDWITHENZYMATICMACERATIONTOTHEOVULESTHEISOLATIONOFMATUREEMBRYOSNEEDNOTENZYMATICTREATMENTKEYWORDSORCHIDACEAE，SPERMCELL，EMBRYOSAC，ZYGOTE，EMBRYO，ISOLATION

簡(jiǎn)介：匪河瞎蓮科六蠆碩士研究生畢業(yè)論文SCF和G．CSF聯(lián)合動(dòng)員小鼠外周血培養(yǎng)問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性的初步研究研究生王東來(lái)導(dǎo)師馮建剛教授專(zhuān)業(yè)二級(jí)學(xué)院研究起止日期提交日期外科學(xué)第四臨床醫(yī)學(xué)院2004年9月2006年3月2006年3月中文摘要對(duì)照，兩組均采用密度梯度離心結(jié)合貼壁法篩選MSC。用含15％胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，48小時(shí)后首次換液，去除未貼壁細(xì)胞，以后35天換液一次，3周左右傳代。取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞進(jìn)行生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定、細(xì)胞周期檢測(cè)、貼壁率檢測(cè)、克隆形成能力檢測(cè)，并應(yīng)用流式細(xì)胞分析結(jié)合免疫組化方法鑒定MSC。同時(shí)利用含有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子．PTGF．B1的高糖DMEM培養(yǎng)液誘導(dǎo)第三代MSC向軟骨細(xì)胞分化，應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)II型膠原的表達(dá)情況。結(jié)果1對(duì)照組無(wú)一份培養(yǎng)出MSC，試驗(yàn)組7份成功培養(yǎng)出MSC。原代MSC首次傳代時(shí)間為4周左右，細(xì)胞形態(tài)趨向于多角形，傳代之后細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯增快，經(jīng)過(guò)35天的潛伏期后，出現(xiàn)5．7天的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，而后進(jìn)入平臺(tái)期，約3周左右傳代，細(xì)胞呈均勻分布的集落樣生長(zhǎng)，形態(tài)更趨向于長(zhǎng)梭形，細(xì)胞的均質(zhì)性明顯提高，傳至第五代時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)老化。2細(xì)胞周期檢測(cè)發(fā)現(xiàn)第三代的MSC中SG2M期的細(xì)胞占21．4％，GO／GL期的細(xì)胞約占78．6％，說(shuō)明絕大多數(shù)細(xì)胞處于靜止期。貼壁率檢測(cè)發(fā)現(xiàn)24小時(shí)貼壁率達(dá)到45％，48小時(shí)貼壁率為81．5％。PO代細(xì)胞平均細(xì)胞集落形成率為L(zhǎng)。25／106，P】、P3、P5代細(xì)胞的平均細(xì)胞集落形成率分別為21．32％，16．13％，9．63％。37份生長(zhǎng)良好的第三代貼壁細(xì)胞行表面標(biāo)志物檢測(cè)，流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示表達(dá)相關(guān)的抗原標(biāo)記CD29和CD44，不表達(dá)造血細(xì)胞系的表面標(biāo)志CD34和CD45。4免疫組化顯示第三代MSC的II型膠原，層粘連蛋白

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多非編碼RNA HULC促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移及侵襲的生物學(xué)作用及分子機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：Y1022二08後旦大學(xué)學(xué)校代碼10246學(xué)號(hào)031107172博士學(xué)位論文小鼠心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞的生物學(xué)特性及其相關(guān)基因研究院系蘭型苧墮專(zhuān)姓業(yè)名指導(dǎo)教師完成日期兒科學(xué)彭濤黃國(guó)英教授2006年10月15曰C143基因敲除小鼠圓錐動(dòng)脈干畸形的發(fā)病機(jī)制研究中文摘要小鼠心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞的生物學(xué)特性及其相關(guān)基因研究中文摘要圓錐動(dòng)脈干是在心臟胚胎發(fā)育時(shí)期連接動(dòng)脈弓的動(dòng)脈干和連接心室的圓錐部的總稱(chēng)。心臟圓錐動(dòng)脈干缺損是圓錐動(dòng)脈干發(fā)育障礙所造成的一類(lèi)先天性心臟病，包括法洛四聯(lián)癥、大動(dòng)脈轉(zhuǎn)位、右室雙出口、永存動(dòng)脈干等多種導(dǎo)致紫紺和低氧血癥的心臟復(fù)雜畸形，這類(lèi)復(fù)雜心血管畸形約占先天性心臟病的30％。人類(lèi)CID的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，但近二十年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)提示，CO蚰EXIN43CX43基因及心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞與心臟錐干部發(fā)育密切相關(guān)心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞是從枕部神經(jīng)嵴分化出來(lái)的一群細(xì)胞，這群細(xì)胞通過(guò)第3，4，6咽弓向原始心管遷移，最后停留在動(dòng)脈干和動(dòng)脈圓錐等部位分化為問(wèn)充質(zhì)細(xì)胞，主要參與心臟流出道隔及大血管的形成。研究發(fā)現(xiàn)，如果在遷移之前切除散發(fā)到第3、4、6咽弓的神經(jīng)嵴細(xì)胞，就會(huì)出現(xiàn)永存動(dòng)脈干、主動(dòng)脈騎跨、右室雙出口、主動(dòng)脈弓畸型和室間隔缺損等心血管畸形，且切除的長(zhǎng)度與畸形的種類(lèi)相關(guān)，如切除長(zhǎng)度大于兩個(gè)體節(jié)可產(chǎn)生永存動(dòng)脈干，切除長(zhǎng)度小于兩個(gè)體節(jié)則產(chǎn)生右室雙流出道，由此可見(jiàn)，心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞對(duì)于心臟圓錐部的發(fā)育意義重大。CX43是細(xì)胞縫隙連接基因家族的成員之一，近年的研究發(fā)現(xiàn)其與心血管發(fā)育密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，CX43基因剔除小鼠、過(guò)量表達(dá)CX43的CMV43轉(zhuǎn)基因小鼠和顯性失活抑制CX43組成的細(xì)胞間隙的信息交流的FC轉(zhuǎn)基因小鼠均可見(jiàn)右室流出道畸形和梗阻，從而說(shuō)明，精確的C“3基因表達(dá)對(duì)于圓錐部的發(fā)育至關(guān)重要。在小鼠胚胎發(fā)育過(guò)程中，CX43大量表達(dá)于遷移性神經(jīng)嵴細(xì)胞之上最早于ED95D即可見(jiàn)，并參與形成心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞的縫隙連接。越來(lái)越多的研究提示CX43可能通過(guò)調(diào)節(jié)心臟神經(jīng)嵴的行為而間接影響心臟的形態(tài)發(fā)生。因此，本課題利用CX43基因剔除1MOCKOUT，K0小鼠模型結(jié)合日益發(fā)展的基因芯片技術(shù)進(jìn)行研究，旨在研究CX43基因?qū)π呐K神經(jīng)嵴的誘導(dǎo)、發(fā)生、分離、遷移、分化的調(diào)控機(jī)制，進(jìn)一步闡明CX43影響心臟圓錐發(fā)育過(guò)程其可能的分子機(jī)制2

簡(jiǎn)介：中南林業(yè)科技大學(xué)博士學(xué)位論文擬南芥懸浮細(xì)胞生物學(xué)及其遺傳轉(zhuǎn)化模式姓名李建安申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)森林培育指導(dǎo)教師胡芳名譚曉風(fēng)20060618“白化”的穩(wěn)定效果。有關(guān)懸浮細(xì)胞“白化”原因及頭孢霉素逆轉(zhuǎn)效應(yīng)機(jī)理，有待進(jìn)一步研究。3、擬南芥懸浮細(xì)胞耐受性試驗(yàn)選擇與其遺傳轉(zhuǎn)化相關(guān)的常溫靜置、低溫靜置、高溫振蕩、蔗糖饑餓和常溫振蕩對(duì)照幾種不同處理方式，從其生長(zhǎng)和細(xì)胞活性?xún)蓚€(gè)方面，研究其對(duì)環(huán)境脅迫的耐受性，以更好地制定擬南芥懸浮細(xì)胞基因轉(zhuǎn)化時(shí)細(xì)胞同步化或預(yù)處理及共培養(yǎng)的方案和條件。結(jié)果表明擬南芥懸浮細(xì)胞對(duì)各種脅迫處理的耐受性表現(xiàn)出明顯的差異，整體耐受性強(qiáng)弱依次為常溫振蕩對(duì)照蔗糖饑餓高溫振蕩低溫靜置常溫靜置，常溫靜置最低。擬南芥懸浮細(xì)胞對(duì)脅迫處理的不適應(yīng)表現(xiàn)在多個(gè)方面，總生物量增長(zhǎng)很少或不能增長(zhǎng)，細(xì)胞相對(duì)活性及活細(xì)胞生物量不斷下降，耐受系數(shù)低。隨著時(shí)間的變化，擬南芥懸浮細(xì)胞對(duì)脅迫處理的耐受性或不適應(yīng)性的表現(xiàn)呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律，這種變化的可能機(jī)制與細(xì)胞間協(xié)同與競(jìng)爭(zhēng)、細(xì)胞自我適應(yīng)機(jī)制的調(diào)節(jié)等有關(guān)。4、擬南芥懸浮細(xì)胞超低溫保存試驗(yàn)探索一般實(shí)驗(yàn)室條件下擬南芥懸浮細(xì)胞的簡(jiǎn)便保存技術(shù)，為中長(zhǎng)期保存遺傳背景穩(wěn)定一致的擬南芥懸浮細(xì)胞起始材料提供有效的方法。通過(guò)一系列試驗(yàn)，本文獲得了擬南芥超低溫保存的適宜方法。優(yōu)化方案如下選擇繼代后2D的擬南芥懸浮細(xì)胞，洗滌1次，細(xì)胞沉淀重懸浮于6％蔗糖培養(yǎng)基，于40C低溫下鍛煉6H；濃縮細(xì)胞使之有較高的細(xì)胞密度0250309／M1，加入16％W／V甘油作為冰凍保護(hù)劑，直接置于一80℃深冷冰箱保存；使用時(shí)以37℃快速解凍，離心后除去保護(hù)劑，然后可用去離子水洗滌后進(jìn)行活性檢測(cè)，也可用基本培養(yǎng)基洗滌后重新進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。此方法保存30D后的細(xì)胞相對(duì)活性達(dá)O8左右，可以滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)室一般研究用。如果對(duì)其保存后的活性要求不很?chē)?yán)，還可以進(jìn)一步簡(jiǎn)化，例如，預(yù)處理前以懸浮細(xì)胞自然沉降代替離心洗滌后收集細(xì)胞沉淀免去高滲預(yù)處理，直接加入冰凍保護(hù)劑后在低溫下鍛煉6H；室溫下解凍等。5、農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化與制備對(duì)本文擬使用的PBIB／GUS、PBM／SARS、PBINMGFP5ER等幾種質(zhì)粒載體構(gòu)建和工程菌制備及其生長(zhǎng)特性等進(jìn)行了系列試驗(yàn)。通過(guò)酶切和PCR檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，證明所構(gòu)建的PBIB／GUS、PBIB／SARS載體正確，含有相應(yīng)的標(biāo)志基因，可以用于后續(xù)的擬南芥懸浮細(xì)胞基因轉(zhuǎn)化。采用電轉(zhuǎn)化法，成功地將PBINMGFP5ER質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌細(xì)胞，轉(zhuǎn)化頻率為2152X104個(gè)舢G質(zhì)粒，并在一系列檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中得到證明。擬用的幾種不同質(zhì)粒具有基本相似但不完全相同的生長(zhǎng)特性，而且接種量及培養(yǎng)條件等，對(duì)其生長(zhǎng)量有很大影響。采用本文方法，成功地制備了可用于植物基因轉(zhuǎn)化的一系列工程菌株。6、轉(zhuǎn)化模式與轉(zhuǎn)化細(xì)胞選擇比較3種擬南芥懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)化方案，共培養(yǎng)后均獲得GUS的瞬時(shí)表達(dá)，但僅模式Ⅲ成功地獲得抗性愈傷組織。在模式Ⅲ基礎(chǔ)上，對(duì)所獲得的抗性愈傷組織Ⅱ

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文骨髓源肝干細(xì)胞的克隆化及其生物學(xué)特性的研究姓名陳少紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)病理學(xué)指導(dǎo)教師趙國(guó)強(qiáng)20060516骨髓源肝干細(xì)胞的克隆化及其生物學(xué)特性的研究方法富集的細(xì)胞是不是一致性的。因?yàn)闆](méi)有一種或一組聯(lián)合抗體對(duì)MSCS是特異性的。即使現(xiàn)今報(bào)道的非常純化的群體由于在傳代中分化祖細(xì)胞，即過(guò)渡細(xì)胞的產(chǎn)生，使得這種純化的細(xì)胞群體也異質(zhì)化。而且，隨著傳代，某些MSCS會(huì)保留其多向分化潛能，但也有一些要么只能朝某個(gè)特定方向分化，要么開(kāi)始衰老死亡。因此，成體干細(xì)胞在體外傳代和擴(kuò)增的困難極大地限制了它們的應(yīng)用。很明顯，在L臨床廣泛應(yīng)用之前，必須要建立一種在體外大量擴(kuò)展MSCS，但又不能影響其分化潛能的方法。我們基于非平衡細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的抑甫0SACKN論，應(yīng)用了一種新的方法去建立成體干細(xì)胞株系并在體外培養(yǎng)擴(kuò)增。非平衡細(xì)胞動(dòng)力學(xué)對(duì)于成體干細(xì)胞保持其在體內(nèi)的功能是必需的，卻是體外擴(kuò)增的阻力，因此，從非平衡細(xì)胞動(dòng)力學(xué)向平衡細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的轉(zhuǎn)變將促使成體干細(xì)胞的指數(shù)增殖并保持其在體外長(zhǎng)期傳代的穩(wěn)定性。黃苷XS便充當(dāng)了這種角色。在前期工作中，我們以2AAF／CCL4程序構(gòu)建急性肝損傷動(dòng)物模型，取損傷后的肝臟萃取物作為骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)組刺激物進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，用RTPCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞分子表面標(biāo)志的變化。結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組BMSCS誘導(dǎo)至1LD表達(dá)幼稚肝細(xì)胞標(biāo)志M2一PK、GSTP，而對(duì)照組誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)此改變，這說(shuō)明損傷的肝臟能夠產(chǎn)生某種因子，可以激活干細(xì)胞向肝細(xì)胞方向的分化。那么，本實(shí)驗(yàn)所得到的單細(xì)胞克隆能否對(duì)這些因子產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng)了通過(guò)這種誘導(dǎo)的方法，我們可以篩選出能夠向肝細(xì)胞方向分化的干細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)方法1、利用貼壁法分離培養(yǎng)原代雄性大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞，培液中含400LAMXS和1NG／MLEGF，2、再高度稀釋這種混合細(xì)胞并以單細(xì)胞接種于96孔板。記錄并培養(yǎng)擴(kuò)增單細(xì)胞的克隆。3、采用3％2．AAF／CCL4急性肝損傷模型雌性SD大鼠的肝組織勻漿誘導(dǎo)這些單細(xì)胞克隆，取誘導(dǎo)第十一天和第二十天細(xì)胞，R11PCR檢測(cè)BSTL、GSTP、M2．PK及ALBMNINMRNA的表達(dá)；同時(shí)用正常同種雌性大鼠肝勻漿作對(duì)照培養(yǎng)。4、對(duì)比培養(yǎng)細(xì)胞，優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)方法。結(jié)果L、得到14株單細(xì)胞克隆，記為C1、C2、C3??C14等；II