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簡介:廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文角質(zhì)細(xì)胞生長因子在大腸桿菌中的表達(dá)、純化及生物學(xué)活性研究姓名黃新強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師鄭忠輝宋思揚(yáng)200171ABSTRCTUEXPRESSIONOFKERATINOCYTEGROWTHFACTORINESCHERICHIACOLIANDITSPURIFICATIONANDBIOACTIVITYABSTRACTKERATINOCYTEGROWTHFACTORKGFISAMEMBEROFFIBROBLASTGROWTHFACTORFGF71BYACTINGPREDOMINANTLYINAPARAERINEN%ANNERKGFCXTNSTIMULATETHEPROLIFERATION,DIFFERENTIATIONANDMIGRATINNOFEPITHELIALCEILSASERIOUSSTUDIESHAVEPROVIDEDINSIGHTINTOTHEFUNCTIONOFKGFINR礎(chǔ)PROCESSESOFVARIOUSTISSUESANDORGARTS,INELUDINGSKIN,CORNEA,BOWELINADDITIONITISAPROTECTIVEFACTORFORGASTROINTESTINALINJURYINDUCEDBYRADIATIONANDCHEMOTHERAPYINTERESTINPRODUCING】ARGEAMOUNTANDBIOACTIVEKGFTHROU曲GENETICENGINEERINGMETHODHASBEENHEIGHTENEDDUETOTHELIMITEDAMOUNTOFKGFINTHEBODYBASEDONPREVIOUSWORK,THISP卵ERFOCUSONTHEEXPRESSIONPURIFICATIONANDBIOACTIVETESTOFKGFFOR也ESAKEOFPROVIDINGGROUNDWORKFORFUTURESTUDYBYCHANGINGTHEINDUCINGTEMPERATUREINDUCER1PTGCONCENTRATIONTHEDENSITYOFBACTERIAANDINDUCINGTIME,THESATISFYINGCONDITIONFOREXPRESSIONOFSOLUBLEFUSIONPROTEINGSHGFCOULDBEOBTAINEDAT25℃03MMOL,LIPTG,OD600EQUALSTO097,5HINDUCINGTIMEUNDERTHEIMPROVEDCONDITIONTHESOLUBLEGSTKGFCOMPRISEDABOUT420OFTOTALEELLULARPROTELNAND25RAGGSTKGFCOULDBEHARVESTEDINLLFERMENTATIONAMETHODWHICHCOMBINEDTWOSTEPOFAMILITYCHROMATOGRAPHYANDTRYPSININCUBATIONWASUSEDTOACHIEVEKGFPURIFICATIONSINCETHEFUSIONPROTEINGSTKGFCOULDBINDTOGSHSEPHAROSO4BANDHEPARINSEPHAROSACL6BANDHEPARINSEPHAROSECL石BPROTECTSTHEACTIVECORCOFKGFFROM自啊SINPROTEOLYSISTHE17KDKGFDERIVEDFROMGSTKGFWASPURIFIEDTOHOMOGENEITY52RAGPURIFIEDKGFATOTALRECOVERYOF泓KGF懈HARVESTEDWRESTEMBLOTANAL|RSISSHOWEDTHATTHEPMIFIEDKGFCOULDBEDETECTEDBYRABBITAGAIBSTHUMANKGFMTTASSAYWASUSEDTOINVESTIGATETHEEFFECTOFRECOMBINEDKGFONTHEPROLIFERATIONOFMOUSECORNEALEPITHELIALCELLSWHICHWERECULTUREDTHROUGH
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簡介:復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文中國人CTLA4的單克隆抗體制備及其生物學(xué)活性研究姓名蔡雷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師朱乃碩2002522摘要ABSTRACTABSTRACTINENGLISHWEPRODUCED,SELECTEDANDCLONEDHYBFIDOMASTHATSECRETEMONOCLONALANTIBODIESAGAINSTHUMANCTLA4.ONEOFTHEMCORRESPONDEDTOTHEIGGL,ONEOFTHEMCORRESPONDEDTOTHEIGG2A,ANDTWOOFTHEMCORRESPONDEDTOTHEIGG3HAVEBEENPREPAREDBYUSINGRECOMBINANTCTLA4PROTEINPRODUCEDINOURLAB.FOURMONOCLONALANTIBODIESDESIGNATEDAS1H7、2G2,2F11AND3A7WITHHIGHAFFINITYWERESCREENEDANDCONFIRMEDBYELISAINCLUDINGINDIRECT,SANDWICHANDCOMPETITIVEELISAANDIMMUNOBLOTTINGMETHODS.WITHTWOMETHODSMLRANDSTIMULATINGLYMPHOCYTESBYCONA,THEEFFECTSOFCTLA一4ONTHEACTIVATEDCEILSWEREDETERMINED,ANDWITHTHEBINDINGEXPERIMENTS,THEBACKGROUNDSOFCTLA4EXPRESSEDBYLYMPHOCYTESISDESCRIBED.THERESULTSSHOWEDTHATALLOFTHEFOURMONOCLONALANTIBODIESCOULDBINDBOTHHUMANCTLA4IGWITHRESEMBLINGNATURECONFORMATIONANDRENATUREDHUMANCTLA一4PROTEINPREPAREDINOURLAB.THEFOURMONOCLONALANTIBODIESCOULDCOMBINEWITHDIFFERENTEPITOPESOFHUMANCTLA419.THE3A7MABCOULDALSOSPECIALLYBINDWITHTHEDENATUREDPROTEINANDBLOCKEDTHECOSTIMULATORNEGATIVESIGNALTRANSMITTINGSONOTABLYPROMOTEDTHEPROLIFERATIONOFACTIVATEDLYMPHOCYTES.FURTHERMORE,THE3A7COULDBINDBOTHHUMANCTLA4ANDMOUSECTLA一4,ANDITCOULDBEFOUNDTHATTHEMOUSESPLEENCELLSCOULDEXPRESSTHEMOSTCTLA一4ONTHETHIRDDAYAFTERACTIVATED,LESSONTHESECONDDAYANDTHEFORTHDAY,THELEASTONTHEFIRSTDAY,ARERSTIMULATEDBYCONAINVITRO.ANDAFTERMOUSESPLEENCELLSSTIMULATEDBYCONAORNOTANDCULTUREDINVITROFOR72HR,THEREWASINTENSEFLUORESCENCEEXISTEDONTHECELLMEMBRANEANDINTHECYTOPLAST,WHILEOFINACTIVATEDLYMPHOCYTES,THEREWASONLYINTENSEFLUORESCENCEINTHECYTOPLASTNOTONTHECELLMEMBRANE.THUS,CTLA4PEAKEDONTHETHIRDDAYAFTERACTIVATED,ANDEXISTEDONTHECELLMEMBRANEANDINTHECYTOPLASTOFACTIVATEDMOUSESPLEENLYMPHOCYTESWHILEONLYEXISTEDINTHECYTOPLASTOFINACTIVATEDMOUSESPLEENTYMPHOCYTES.KEYWORDSCTLA一4,MONOCLONALANTIBODY,TCEILACTIVATION,F(xiàn)LUORESCENCE3
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簡介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文同翅目昆蟲專性病原真菌飛虱蟲癘霉的固體培養(yǎng)法及其蟲尸模擬培養(yǎng)物的生物學(xué)特性與功能姓名梁勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)生態(tài)學(xué)指導(dǎo)教師馮明光20030701中文摘要飛虱蟲癘霉PANDORADELPHACISHORIHUMBER是同翅目昆蟲的專性昆蟲病原真菌,分類上屬于接合菌ⅣF3ZYGOMYEOTINA的蟲霉目ENTOMOPHTHORALES,常引發(fā)飛虱、葉蟬的流行病,也侵染蚜蟲、沫蟬等寄主。侵染體的高效低成本繁殖長期困擾蟲霉的基礎(chǔ)與應(yīng)用研究。針對(duì)這一普遍性的技術(shù)難題,本研究以飛虱蟲癘霉F95129菌株為對(duì)象,以黍米、粟米為基本材料,探索建立簡便易行的侵染體繁殖技術(shù)體系,并對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行了產(chǎn)孢潛能及其影響因子的評(píng)價(jià)以及針對(duì)桃蚜MYZUSPERSICAESULZERFF々侵染性測(cè)定和時(shí)間一劑量一死亡率模型模擬。主要研究內(nèi)容和結(jié)果分述如下固體培養(yǎng)篩選確定了以黍米PANICUMMILIACEUML,俗稱黃米和粟米SETARIAITALICAL,俗稱小米為最適固體培養(yǎng)基質(zhì),對(duì)飛虱蟲癘霉進(jìn)行了成功的繁殖試驗(yàn)。將菌絲生物量約為25MEDML的菌絲液按20%的比例V/W接入經(jīng)高溫濕熱滅菌并適度熟化、含水量分別為45%和42%的黍米及粟米中。在25℃和12L12D條件下直接培養(yǎng),所獲3~17D黍米和粟米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能和有效產(chǎn)孢時(shí)間因培養(yǎng)天數(shù)不同而異。采用自行設(shè)計(jì)的采孢裝置和精確定量測(cè)定方法,黍米培養(yǎng)物以培養(yǎng)5D的產(chǎn)孢量最大,達(dá)1711_3X104個(gè)孢子,粒,培養(yǎng)7~11D的黍米產(chǎn)孢量為13O139X104個(gè)孢子/粒。粟米培養(yǎng)物以培養(yǎng)7D的產(chǎn)孢量最大,達(dá)109TO62X104個(gè)孢子/粒,培養(yǎng)3~5D和9~LLD的產(chǎn)孢量為85~107X104個(gè)孢予/粒。相對(duì)于新鮮蚜尸2303X104個(gè)孢子/頭的平均產(chǎn)孢量和≤60H的有效產(chǎn)孢時(shí)間,5~11D黍米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能高出56~74倍,3~11D的粟米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能則高出37468倍,有效產(chǎn)孢時(shí)間均延長L倍以上。在培養(yǎng)物侵染性的定性測(cè)定中,黍米培養(yǎng)物接種7D內(nèi)導(dǎo)致桃蚜感病死亡698%,粟米培養(yǎng)物引起感病死亡687%。結(jié)果表明,飛虱蟲癘霉黍米和粟米培養(yǎng)物的生物學(xué)性狀類似于該菌侵染致死的蚜尸,故單顆米粒培養(yǎng)物相當(dāng)于天然蟲尸的模擬物,但單顆米粒的產(chǎn)孢潛能和有效產(chǎn)孢時(shí)間遠(yuǎn)優(yōu)于單頭天然蚜尸。由此首次建立了利用谷物直接培養(yǎng)蟲癘霉而制各人工模擬蟲尸的技術(shù)體系和評(píng)價(jià)方法。黍米培養(yǎng)物的侵染性及毒力用飛虱蟲癘霉黍米培養(yǎng)物作為侵染體源對(duì)桃蚜2~3齡若蚜進(jìn)行了9個(gè)序列孢子劑量O4~501個(gè)孢子/MM2的生物測(cè)定和時(shí)間一劑量一死亡率模型模擬分析?!版哂柙 苯臃N后第5~7D的LCSO分別為30、17和12個(gè)孢子/MM2,LTSO從45個(gè)孢子/MM2的46D下降到263個(gè)孢子/MM2的32D,所有感病
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簡介:分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文桔小實(shí)蠅與番石榴實(shí)蠅的生物學(xué)特性及桔小實(shí)蠅與番石榴實(shí)蠅的生物學(xué)特性及種間競爭研究種間競爭研究THEBIOLOGICALCHARACTERISTICSANDTHEINTERSPECIFICCOMPETITIONOFORIENTALFRUITFLYANDGUAVAFRUITFLY碩士研究士研究生劉娜指導(dǎo)教師陶玫教授教授申請(qǐng)學(xué)位類別申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治培養(yǎng)學(xué)院院植物保護(hù)學(xué)院植物保護(hù)學(xué)院二〇一二〇一四年五月
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簡介:廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文氮、碳離子注入甜菊的生物學(xué)效應(yīng)研究姓名張向紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師沈明山200071●碳離子注入明顯提高ST和總糖苷含量,置信度為95%;RA含量也有明顯提高,置信度分別為80%和95%。氮、碳離子注入甜菊的ST和的正變比例分別為31%和75%;RA正變比例分別為11%和35%。說明氮、碳離子注入確實(shí)能提高糖苷的含量。氮、碳離子注入使RA含量范圍變寬,這對(duì)于篩選高RA含量的優(yōu)良品種極為有利。根據(jù)毛細(xì)管電泳結(jié)果,選RA含量接近平均值的三株對(duì)照和氮、碳離子注入組中兩株含量最高和最低的一株,進(jìn)行POD同工酶和可溶性蛋白質(zhì)的電泳分析。POD同工酶和可溶性蛋白質(zhì)電泳發(fā)現(xiàn)氮、碳離子注入的兩株RA含量最高的單株帶型與對(duì)照基本一致,最低單株都有缺帶現(xiàn)象。N20的可溶性蛋白質(zhì)還有帶的增加。第一次發(fā)現(xiàn)氮、碳離子注入會(huì)影響到基因的表達(dá),并且甜菊糖苷的合成與POD同工酶及可溶性蛋白質(zhì)有一定關(guān)系。并且,通過上述實(shí)驗(yàn)還對(duì)氮、碳離子注入的作用進(jìn)行比較,碳離子注入的大部分指標(biāo)優(yōu)于氮注入,且能量為75KEV,劑量為10”/CM2為甜菊云賓品種較適宜的注入能量和劑量。J/一一關(guān)鍵詞甜菊,氮、碳離予注入,生物學(xué)效應(yīng)本研究是國家自然科學(xué)基金重大項(xiàng)目19890300子課題的部分研究內(nèi)容
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簡介:Y68448獨(dú)創(chuàng)聲明不人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論又中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得注如沒有其他需要特別聲明的,本欄可空或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽字運(yùn)場(chǎng)矛7未冬簽字日期2004年閃月釗日簽字日期2004年尸月74日鹽芥TTHELLUNGIELLAHALOPHILA耐鹽生理及分子生物學(xué)簽礎(chǔ)研究鹽脅迫下NAK離子在鹽芥、擬南芥中變化趨勢(shì)不同。相同鹽度下擬南芥K離子含量的降低幅度要比鹽芥大。鹽芥根中NA含量隨著鹽濃度的升高變化并不大而擬南芥根中NA含量一直隨鹽濃度的升高而升高。擬南芥比鹽芥積累更多的脯氨酸和可溶性糖,滲透勢(shì)降低幅度大于鹽芥,可能50300MMOLLNACL沒有對(duì)鹽芥造成明顯的滲透脅迫。鹽脅迫下鹽芥葉中MDA含量幾乎不變,而擬南芥MDA含量隨鹽濃度的升高明顯增加。研究結(jié)果表明鹽芥耐鹽性遠(yuǎn)高于擬南芥。3鹽芥THPSCS基因克隆及在脅迫條件下的表達(dá)分析利用EST隨機(jī)挑取克隆測(cè)序的策略從鹽芥葉片CDNA文庫分離得到編碼鹽芥0一二氫毗咯一5狡酸合成酶基因的部分。DNA序列。該CDNA片段長約824BP,它編碼‘一二氫毗咯一5梭酸合成酶近C一端的154個(gè)氨基酸。BLAST同源性分析表明,該CDNA與已報(bào)道的擬南芥P5CS基因同源性最高。NORTHEM分析表明NACLABA、低溫、PEG均誘導(dǎo)P5CS基因的表達(dá),而且P5CS基因的表達(dá)具有組織特異性和發(fā)育階段特異性。4鹽芥THTRXHTHGOLS和THSOS3基因克隆及功能分析利用EST隨機(jī)挑取克隆測(cè)序的策略從鹽芥葉片CDNA文庫分別分離得到編碼鹽芥硫氧還蛋白HTHTRXH、肌醇半乳搪昔合酶THGOLS、鈣感應(yīng)蛋白THSOS3的全長CDNA序列。鹽芥硫氧還蛋白HCDNA序列全長663BP,編碼118個(gè)氨基酸殘基,分子量約129KDA。存在保守的活性中心序列“WCPGPC“ONORTHEM分析表明鹽芥THTRXH基因表達(dá)受NACLABAPEG誘導(dǎo),不受低溫誘導(dǎo),也沒有組織特異性。THTRXHGST融合蛋白體外表達(dá)及活性實(shí)驗(yàn)表明,鹽芥硫氧還蛋白H的確具有H型的活性,最大反應(yīng)速度VMAX為。0254A650MIRIKM值為。437PMOVL。同時(shí)THTRXH也在擬南芥中過量表達(dá),并得到轉(zhuǎn)基因株系。肌醇半乳糖昔合酶THGOLSCDNA序列全長1322BP,編碼337個(gè)氨基酸殘基。與其它物種來源的肌醉半乳糖昔合酶具有較高的氨基酸序列相似性。ABANACL均誘導(dǎo)了肌醇半乳糖昔合酶基因在葉中表達(dá)在根中的表達(dá)與葉不同,明顯受ABA誘導(dǎo),而NACL的誘導(dǎo)作用非常微弱PEG、低溫既能上調(diào)葉中THGOLS的表達(dá),又能誘導(dǎo)根中THGOLS的表達(dá),說明肌醇半乳糖昔合酶的表達(dá)存在組織差異和脅迫誘導(dǎo)的差異。肌醇半乳糖合酶基因THGOLS在擬南芥中過量表達(dá)提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥種子在含NACL、甘露醇培養(yǎng)基上的萌發(fā)率,根的相對(duì)伸長率以及對(duì)LICL的耐受能力也明顯好于野生型擬南芥。在幼苗生長階段轉(zhuǎn)基因植株鮮重、干重均高于野生型,尤其是在NACL脅迫下其干物質(zhì)積累明顯較野生型增多。經(jīng)NACL處理的野生型和轉(zhuǎn)基因擬南芥其凈光合速率PN、氣孔導(dǎo)度CI和胞間C伍濃度均降低,但轉(zhuǎn)基因株系光合速率、氣孔導(dǎo)度、胞間C02濃度仍高于野生型擬南芥。野生型擬南芥的氣孔導(dǎo)度對(duì)NACI的反應(yīng)也較轉(zhuǎn)基因株系敏感。山東師范大學(xué)博士學(xué)位論文
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簡介:福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文乳源木蓮群落生態(tài)及混交栽培生物學(xué)基礎(chǔ)研究姓名曹永慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)森林培育指導(dǎo)教師陳存及200241T米慧乳琢本蓮并暮生尚置曩史栽培蟲袖學(xué)童礎(chǔ)研克它冠層指標(biāo)間的差異。不同徑階葉面積在相同垂舂層次以及相同徑階葉面積在不同垂直層次上均存在顯著差異。而葉面積垂直分布差異主要體現(xiàn)在葉片數(shù)目上。通徑分析表明,對(duì)乳源木蓮材積生長有利的冠層特性應(yīng)為葉面積多集中于中層內(nèi)部以及下層的內(nèi)、外部的冠層分布。8應(yīng)用異速生長模型,對(duì)不同時(shí)間間伐的混交林中乳源木蓮的樹冠結(jié)構(gòu)研究表明,若間伐不及時(shí),木蓮樹冠生長受限制不能充分?jǐn)U展,樹冠形狀近似拋物線形,枝長分布方式對(duì)下部層次造成遮蔭,不利于林木的光合作用。間伐及時(shí)、合理,木蓮具有圓錐形樹冠、較大的枝傾角和較高的葉面積指數(shù),因此有利于對(duì)光的截獲,有利于培育乳源木蓮大徑材。9適宜的造林密度和混交比例有利于乳源木蓮大徑材的培育。早間伐與晚間伐兩種類型混交林生長分析結(jié)果表明,為達(dá)到培育乳源木蓮大徑材的培育目標(biāo),首先應(yīng)適當(dāng)降低混交林的初植密度,尤其是在生長階段控制好經(jīng)營密度,適當(dāng)減少單位面積內(nèi)乳源木蓮的株數(shù),以促進(jìn)木蓮樹商和胸徑生長其次,杉蓮混交比不宜過低,乳源木蓮混交比例一般應(yīng)控制在20~25%以內(nèi),并結(jié)合適時(shí)的撫育間伐促進(jìn)木蓮的快速增粗。10通過早、晚間伐現(xiàn)有林分的比較,杉蓮混交林較合理的初植密度應(yīng)為20002300株/HM2,并在9~10年生間伐部分杉木,保存密度1200~1500株/HM2,杉蓮混交比例調(diào)整為31或更高的混交比。到第15年左右應(yīng)第二次間伐,最終保留750900株/HM2左右,以利培育木蓮和杉木共優(yōu)的大徑材。11研究造林地環(huán)境與乳源木蓮栽培的關(guān)系,對(duì)于選擇適宜的造林地具有重要指導(dǎo)意義。方差分析表明.坡位、坡向是影響乳源木蓮干材生長的主要立地因子,坡度作用不太顯著。12及時(shí)、合理間伐可改善立木徑級(jí)結(jié)構(gòu)及冠幅結(jié)構(gòu),尤其是改善混交林各樹種的空間分布結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)種間關(guān)系。間伐后,混交林中木蓮競爭指數(shù)的下降主要是由于木蓮種內(nèi)競爭程度下降,此外,杉木對(duì)術(shù)蓮的種閫競爭程度也有下降,因而木蓮競爭壓力減輕,可表現(xiàn)出一定的增產(chǎn)作用。13混交林中,乳源木蓮競爭指數(shù)與對(duì)象木個(gè)體大小的關(guān)系均近似服從冪函數(shù)關(guān)系,即乳源木蓮種內(nèi)、種間及與整個(gè)林分的競爭強(qiáng)度隨著對(duì)象木個(gè)體的增大而下降,當(dāng)對(duì)象木增大到一定程度胸徑20CM隊(duì)后,競爭強(qiáng)度基本保持不變。一/關(guān)鍵詞乳源木蓮F群落生態(tài)特征;杉蓮混交藤生長特點(diǎn);生物學(xué)基礎(chǔ)主題詞乳源木蓮群落生態(tài)學(xué)混交林’栽培生物學(xué)。中圖分類號(hào)0791.272
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簡介:廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文高抗多種重金屬鹽的PENICILLIUMJANTHINELLUMGXCR1突變體生物學(xué)特性的研究姓名黃素申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師李有志20050601廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文STUDYONTHEBIOLOGICALCHARACTERIZATL0NOFTHEMUTANTSOFHEAVYMETALTOLERANTPENICILLILYDANTHINELLUMGXCRLABSTRACTTHEGROWTHCHARACTERISTICSOFENICILLIM向THINELLUMGXCRLANDITSMUTANTS,MGXCRL、SMLANDSM2,WERESTUDIEDITSHOWEDTHATTHEOPTIMUMGROWTHTEMPERATUREOFSM2CONFORMEDTOTHEGXCRLWERE32℃,OFTHEMGXCRLANDSMLWAS28℃AND37℃RESPECTIVELYTHEOPTIMUMGROWTHPHVALUEOFTHEFUNGIWAS5070THEFUNGOUSABILITYOFRESISTINGANDADSORBINGDIFFERENTHEAVYMETALWASSTUDIEDITSHOWEDTHATTHEABILITYOFRESISTINGCUS04,ZNS04ANDA12S043INTURNWASGXCRLMGXCRLSM2SML,OFRESISTINGMNS04INTURNWASSM2GXCRIMGXCRISMLTHEABILITYOFADSORBINGCU”INTURNWASGXCRISM2MGXCRISMI;OFADSORBINGZN“WASSM2MGXCRISMIGXCRIOFADSORBINGA1”WASGXCRISMIMGXCRISM2OFADSORBINGMN“WASSM2MGXCRIGXCRISMLTHEFUNGOUSABILITYOFRESISTINGDIFFERENTHEAVYMETALANDTHEABILITYOFADSORPTIONWASNOTDIRECTLYINTERRELATEDTHEEFFECTOFTIME,PH,ANDHEAVYMETALONTHEPRODUCTIONOFTHEEXTRACELLULARPROTEINANDTHEPHOFEXTRACELLULARPRODUCTIONWASINEONSISTENTTODIFFERENTFUNGOUSEXTRACELLULARIII
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簡介:雨生紅球藻因富含蝦青素而受到國內(nèi)外微藻工作者的廣泛關(guān)注,蝦青素是一種次生類胡蘿卜素,因具有超強(qiáng)抗氧化性和良好的著色效果在保健品工業(yè)和飼料工業(yè)上廣泛使用,具有廣闊的市場(chǎng)前景。雨生紅球藻是自然界天然蝦青素含量最高的生物,國內(nèi)外學(xué)者對(duì)其展開研究已經(jīng)有幾十年的歷史,但是大多都集中在基礎(chǔ)生物學(xué)研究和蝦青素積累機(jī)理研究上,雨生紅球藻生產(chǎn)開發(fā)中遇到的生長較慢和細(xì)胞壁厚導(dǎo)致蝦青素提取成本增加等問題卻一直沒有解決。誘變育種是一種需要儀器設(shè)備簡單、操作方便、低成本、高效率的種質(zhì)改良方法,現(xiàn)有資料表明藻類較易發(fā)生突變,而且突變體具有良好的遺傳穩(wěn)定性,因此本題擬用誘變育種的手段,誘變、篩選出生長較快、細(xì)胞壁薄、蝦青素含量較高的突變?cè)逯瓴⑼度肷a(chǎn),這對(duì)實(shí)現(xiàn)雨生紅球藻的產(chǎn)業(yè)化,搶占國際市場(chǎng)具有重要意義。本文首先用一系列單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)研究了雨生紅球藻的適宜培養(yǎng)條件,經(jīng)正交試驗(yàn)證明,雨生紅球藻培養(yǎng)的適宜條件應(yīng)為KNO3300MGL,KH2PO420MGL40MGL,F(xiàn)ESO47H2O05MGL,NAHCO3200MGL,MNSO4025MGL,EDTANA210MGL,VB16103MGL,VB125102ΜGL;最適培養(yǎng)溫度30℃,最適光照7000LX。關(guān)于環(huán)境條件對(duì)雨生紅球藻中蝦青素積累調(diào)控究竟有何影響這一問題,目前國內(nèi)外學(xué)者的眾多研究結(jié)果相差較大,作者將可能影響雨生紅球藻蝦青素積累調(diào)控的因子以及爭議的焦點(diǎn)因素等都考慮在內(nèi),設(shè)置了7因素2水平的正交表,試驗(yàn)結(jié)果表明為取得最高藻液或者細(xì)胞蝦青素含量應(yīng)該選用水平是30℃,KH2PO410MGL,F(xiàn)ESO47H2O25MGL,7000LX,KNO3100MGL,CH3COONA2MMOLL,H2O20MMOLL。在用紫外線、亞硝基胍、迭氮鈉、Γ射線和X射線對(duì)雨生紅球藻進(jìn)行誘變處理后發(fā)現(xiàn),各種處理對(duì)雨生紅球藻都有致死效應(yīng),而且隨著處理劑量的增加致死效應(yīng)加強(qiáng);紫外線、亞硝基胍和迭氮鈉處理都能夠刺激雨生紅球藻細(xì)胞中蝦青素積累;紫外線和亞硝基胍處理能夠使紅球藻細(xì)胞SOD和POD活性升高,但對(duì)CAT活性沒有明顯影響;迭氮鈉處理抑制了紅球藻細(xì)胞中SOD和CAT活性,使POD活性升高;紫外線、亞硝基胍、迭氮鈉、Γ射線和X射線處理都能使細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)不同程度的受到損傷。同時(shí)采用二苯胺篩選、FE2VC羥自由基誘生系統(tǒng)篩選、H2O2的篩選、高光誘導(dǎo)篩選等幾種篩選方法對(duì)不同誘變處理存活藻株進(jìn)行了篩選,對(duì)具有生長較快或者蝦青素含量較高等優(yōu)良性狀之一的突變株進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn),最后篩選出4株蝦青素含量較高突變株HZ2A、HZ2B、HZ2C和HZ3,這幾株突變株都是通過高光誘導(dǎo)法篩選,證實(shí)了高光誘導(dǎo)篩選法在篩選雨生紅球藻突變株時(shí)切實(shí)可行;通過二苯胺對(duì)雨生紅球藻各突變株的影響試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),二苯胺有篩選出雨生紅球藻蝦青素高產(chǎn)株的可能性,但是本次試驗(yàn)通過二苯胺并未篩選到突變株。迭氮鈉和亞硝基胍誘變處理組中都沒有篩選到有優(yōu)良性狀的突變株,暗示化學(xué)誘變可能對(duì)雨生紅球藻的誘變育種不太適合,4株突變株都是由紫外線誘變處理獲得,表明紫外誘變對(duì)雨生紅球藻是一種優(yōu)良的誘變方法。
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簡介:陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文苦皮藤再生體系的建立及超聲生物學(xué)效應(yīng)的研究姓名馬艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)植物學(xué)指導(dǎo)教師肖婭萍20040401核、葉綠體等細(xì)胞器有輕微損傷,隨著處理時(shí)間的延長,細(xì)胞質(zhì)與核內(nèi)出現(xiàn)空區(qū),質(zhì)膜有剝離現(xiàn)象,說明超聲對(duì)細(xì)胞的損傷隨著處理時(shí)間的延長而增大。3超聲刺激增強(qiáng)了植物體內(nèi)保護(hù)酶活性對(duì)苦皮藤組培苗進(jìn)行27KHZ的超聲波5MIN和7MIN的處理后,繼續(xù)培養(yǎng),并分別于OD,3D,6D,9D,12D,15D,18D,21D測(cè)定其超氧化物歧化酶SOD、過氧化物酶POD和過氧化氫酶CAT的活性。結(jié)果表明,超聲處理不同程度地增強(qiáng)了這些保護(hù)酶的活性。關(guān)鍵詞苦皮藤組織培養(yǎng)超微結(jié)構(gòu)功率超聲
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簡介:中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文鉤端螺旋體去甲?;傅慕Y(jié)構(gòu)生物學(xué)研究姓名周兆才申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)結(jié)構(gòu)生物學(xué)指導(dǎo)教師龔為民20040401中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文鉤端螺旋體去甲酰化酶的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究2中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)院中科甓結(jié)構(gòu)生物學(xué)開放實(shí)驗(yàn)室周兆才摘要本論文描述勾端螺旋體去甲?;窵IPDF的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究。蛋白質(zhì)的生物合成均起始于甲硫氨酸。在大多數(shù)情況下,N一端的甲硫氨酸在成熟蛋白中被去除。一股認(rèn)為只有在細(xì)菌中,N一端甲硫氨酸在蛋白合成之前被甲?;T诜g后加工中,N一端甲硫氨酸先在去甲?;窹EPTIDEDEFORMYLASE,PDF作用下被去甲?;?,才可以被正確切除。研究表明細(xì)菌中PDF的抑制會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌的死亡,即PDF對(duì)手細(xì)菌存活是必需的。而在真核生物中,目前發(fā)現(xiàn)蛋白的翻譯后加工工程不涉及PDF的作用。因此,PDF是一個(gè)很好的藥物設(shè)計(jì)靶蛋白。本實(shí)驗(yàn)室在成功克隆鉤端螺旋體PDF基因并獲得高表達(dá)重組蛋白,進(jìn)行了一系列酶學(xué)性質(zhì)研究的基礎(chǔ)上,近來又在晶體結(jié)構(gòu)解析方面獲得了具有一定突破性的研究成果。現(xiàn)有PDF根據(jù)氨基酸序列主要?jiǎng)澐譃閮煞N類型,并且這兩類PDF都表現(xiàn)出明顯的金屬離子特異性。對(duì)鉤體PDF?級(jí)序列的分析表明該酶不屬于已有的兩種類型,可能代表了一個(gè)新的家族。我們先后測(cè)定了鉤體PDF母體第一個(gè)具有較高活性的鋅結(jié)合的PDF結(jié)構(gòu)以及鉤體PDF與ACTINONIN一種天然的PDF的抑制荊結(jié)合復(fù)合物的X射線晶體結(jié)構(gòu)。隨后的結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)R若干獨(dú)特的三維結(jié)構(gòu)特征,從而印證了一級(jí)序列分析的結(jié)果,即鉤體PDF屬于新的PDF家族。這些獨(dú)特的三維結(jié)構(gòu)特征主要包括穩(wěn)定的生物學(xué)二體活性中心“蓋子”結(jié)構(gòu);疏水C末端取向。鉤體PDF與抑制劑復(fù)合物P2??臻g群晶體獨(dú)立區(qū)中有八個(gè)分予,其中仍然保留了與母體P4。2。2或P3.2L空間群相同的二體對(duì)稱性。該穩(wěn)定二體的牛物學(xué)意義尚待進(jìn)一步探究。有趣的是,底物結(jié)合口袋在母體結(jié)構(gòu)中處于“關(guān)閉”狀態(tài),I而在復(fù)合物結(jié)構(gòu)中則處于一一定程度的“開放”狀態(tài)。比較發(fā)現(xiàn),ARGL09在構(gòu)象變化中發(fā)揮了類似于“天窗”1樣的開合作用,它在閉合與開放構(gòu)象結(jié)構(gòu)中分別與TYR72和TRP99形成明顯的CATJONPI相互作用。基于這種底物結(jié)合口袋的構(gòu)象變化,我們提出了以“構(gòu)成態(tài)分布移動(dòng)”為特征的底物結(jié)合機(jī)理。從該模型出發(fā)所得理論分析的結(jié)果與我們掌握的鉤體PDF的生化數(shù)據(jù)吻合較好。這在PDF超家族中亦屬首次。另~方面,電荷分析表明鉤體PDF活性中心基本是電中性的,與已經(jīng)報(bào)道的I型和II型PDF存在明顯的差異,這可能是導(dǎo)致鉤體PDF具有鋅離子活性的主要原因之?。同時(shí),抑制劑與活性口袋的相互作用分析則為進(jìn)一步的基于抑制劑改造的藥物設(shè)計(jì)提供了比較可靠和可行的方案。關(guān)鍵詞鉤端螺旋體去甲?;甘杷w底物結(jié)合口袋抑制劑構(gòu)象亞態(tài)分布移動(dòng)BA01008028,ZHAOCAIZHOU,LABOFSTRUCTURALBIOLOGY,SCHOOLOFLIFESCIENCES,USTC,RRCHINA2004
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簡介:第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文銅綠假單胞菌噬菌體PAP2生物學(xué)特性及其基因組學(xué)的研究姓名黃建軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師胡福泉20040401第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文英文縮寫AABPBLASTBSACDNACTABCIUDADDH20DNADNASEIDSDNASSDNADNTPECOLIEBEDTAEPHIPTGKBKDKGLB13MEMGMLN英文縮寫一覽表英文全稱中文全稱AMINOACID氨基酸BASEPAIR堿基對(duì)BASICLOCALALIGNMENTSEARCHTOOL局域相似性比對(duì)分析BOVINESENLMALBUMIN牛血清白蛋白COMPLEMENTARYDEOXYRIBONUCLEICACID互補(bǔ)脫氧核糖核酸DIOCTYLTRIMETHYLAMINOBROMINE十六烷基三甲基溴化胺COLONYFORMINGUNIT菌落形成單位DALTON道爾頓DEIONICDISTILLEDWATER去離子蒸餾水DEOXYRJBONUCLEJCACID脫氧核糖核酸DEOXYRIBONUCLEASEI脫氧核糖核酸酶IDOUBLESTRANDDNA雙鏈DNASINGLESTRANDDNA單鏈DNADEOXYRIBONUCLEOSIDETRIPHOSPHATE脫氧核苷三磷酸ESCHERICHIACOLI大腸桿菌ETHIDIUMBROMIDE溴化乙錠ETHYLENEDIAMINETETRAACETICACID乙二胺四乙酸EPPENDORF微量離心管GRAM克HOUR小時(shí)ISOPROPYL一1THIO一0一DGALACTOSIDE異丙基硫代一BD一半乳糖苷KILOBASE千堿基KILODALTON千道爾頓KILOGRAM千克LURIABERTANINBROTHLB培養(yǎng)基BMERCAPTOETHANOLB一巰基乙醇MILLIGRAM毫克MINUTE分鐘
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簡介:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛蛙T、B淋巴細(xì)胞的主要生物學(xué)特性研究姓名鄧時(shí)銘申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師肖克宇20040401培養(yǎng)結(jié)果顯示只有1000№/ML慶大霉素組中T、B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒數(shù)為69.94±4.51%和72.36±1.89%,其它均低于50.00%。溫度增至28℃時(shí),環(huán)磷酰胺對(duì)T淋巴細(xì)胞有毒性作用,對(duì)B淋巴細(xì)胞無毒性作用;慶大霉素在500№/M1以上對(duì)T、B淋巴細(xì)胞均有毒性作用;鏈霉素250¨∥M1以上對(duì)T、B淋巴細(xì)胞均有毒性作用。關(guān)鍵詞牛蛙T淋巴細(xì)胞B淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞表面標(biāo)志免疫抑制
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簡介:浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文美洲商陸抗病毒蛋白Ⅰ的基因克隆和表達(dá)及其生物學(xué)活性分析姓名王煒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師詹金彪20060501浙江太學(xué)碩士擎柱靜文王婷挑取轉(zhuǎn)化成功單克隆菌落擴(kuò)增,少量抽提質(zhì)粒,雙酶切、小量表達(dá)鑒定煎組質(zhì)粒。將禽霄燕確表遮藏俸PE44AL鼬諍L瀚轉(zhuǎn)純麓BL2巧E3∥硒誘導(dǎo)裘速,鬏集藩體沉淀,將沉淀超聲破菌,將耀聲所褥沉淀發(fā)復(fù)洗滌,尿素潞鼴包含體,透析笈性。炭性蛋自溶液用BLUE,SEPHAROSC6B崇和層析純化,經(jīng)SDS零AGE電泳穩(wěn)濺,熙M疆法梭濺紹黲毒性。鼴統(tǒng)計(jì)學(xué)方法魄較融PL綴翮瑚陡綴對(duì)照組纓施存活率的差髯。瓊脂糖凝膠電泳檢濺爨白的DNA酶圣管用,ELISA方法驗(yàn)證其向鞠聚麴翊蔓終爰,分子模瓠熬方法建立莢濺囊淤撬癀毒凝是與疆R露援豹模型。綣隳PC鼗產(chǎn)物經(jīng)1%瓊目旨游電泳,溴乙錠染色后,在紫辨斃下可撼一條絹黢懿約S糖醣酶舞帶,與預(yù)計(jì)戇釋靜冀段長度大奪一致。露贍冀莰與曦俸連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)JM109,長出白色克隆,抽提膜粒用恤I和脅槲HI雙酶切確諼辯涕片段插入,經(jīng)潮序涯寅該片段序歹|J舞掰扳道翡魏謹(jǐn)I孩菅酸簿麴基本一致。爨組質(zhì)靛PET44張蹬湄撤齠L和磁積LII漱酶切,1%璩顯簿糖凝膠漱泳??梢姶笮〖s5500BP和800BP的兩個(gè)片段,說明PAPL的編碼基因融插入PE鍛曩。含重縫予PE囂犍8鶼L瓣太弱籽菌B磁L綴F婚誘導(dǎo)裘遮,蓉波及菌體怒聲破菌艏沉淀和上清12%SDS樅6濺電泳,綴誘導(dǎo)菌液泳道及超聲沉淀泳遂臻可覓一分子萋約為2效D蘸蛋巍條帶,與Ⅳ瀠L豹分子萋湊合,囂來誘鼯蔚液與超聲上漓無相癩條帶,這說疆配API戮包含體形茂正確表達(dá)。包含體愛復(fù)洗滌精縫度達(dá)70%鞋上,尿素溶解,透析復(fù)慷所得產(chǎn)物純度約3輯6,笈性率較低。愛性滾經(jīng)BL黔S印撩FOSE6B純化,SDS。黝心E檢測(cè),維暴攝示其純度大予90%。W鞭法進(jìn)筇耀毪捻溺,表驥笈蛙純化囂的粉母I其柯麓蓖辯毒素A鏈殳1’A耀鎂戇纓照毒慳。魏往瓣美濺蠢醛撬癜湊蠶皇L瓣癌纓熬蠢黌黧懿殺傷俸耀,簸夠作用與超螺旋DNA具甯核酸內(nèi)切活性,與朋淑能夠相甄作用??澱摲顚?shí)駿袈鯔剽F二PCR熬窮法,獲美潮巍港春醴孛竟隆褥囊了菠漉囂秘撩I旗因,并將其插入到載體質(zhì)粒P㈧時(shí)一中,成功構(gòu)建了N“I的表達(dá)質(zhì)粒PET_44A融PI。蘸綴質(zhì)敉轉(zhuǎn)純靜天腸稈蓊BL2LDE3在L黻℃誘警下,表達(dá)出分予爨約為291【D的蛋囪震,與耳豹餐皇分子爨一致。覆蛋爨艨電泳表爨嗣鶼蛋自囊藤以包含體形式袈逸,所得包含體經(jīng)反篾洗滌麝純度可遮70%以上。洗滌后的甑禽體綴艨豢溶鰓,透櫥復(fù)性,霹褥銎F少爨鮑菱髏蛋自,縫度在30%左右。復(fù)性渡經(jīng)BH一齜磚A∞SE6磐親和魄他渣,得到90%以TI掩純度。M疆法測(cè)定魏”L稻雕A2
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簡介:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文花絨堅(jiān)甲生物學(xué)特性、種群動(dòng)態(tài)及其飼養(yǎng)方法研究姓名王小東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師許維岸許再福20040614山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要森林是世界上最大的生態(tài)系統(tǒng),林業(yè)是我國生態(tài)安全的基礎(chǔ),在可持續(xù)發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。近年來森林病蟲害不斷地加重和蔓延,給生態(tài)環(huán)境、外貿(mào)出口和經(jīng)濟(jì)發(fā)展造成很大影響。在南方,特別是廣東地區(qū)以松褐天牛MONOCHAMUSALTERNATUSHOPE危害為主。由于不合理大量使用化學(xué)藥劑,不僅效果甚微,還污染環(huán)境,殺傷天敵,形成惡性循環(huán)。全世界人們呼吁及社會(huì)發(fā)展需要,要求綠色安全的方法出現(xiàn)。生物防治方法顯得更加重要,必將取代農(nóng)藥的主導(dǎo)地位,逐漸為人們所接受。花絨堅(jiān)甲DASTARCUSHELOPHOROIDESFAIRMAIRE是大中型天牛等昆蟲的重要天敵,對(duì)抑制這類害蟲發(fā)生危害起著非常重要的作用。對(duì)于寄生松褐天牛的花絨堅(jiān)甲,國內(nèi)外相關(guān)的研究較少。本次研究發(fā)現(xiàn),廣東省松褐天牛上有花絨堅(jiān)甲寄生,進(jìn)而對(duì)花絨堅(jiān)甲的生物學(xué)特性和種群動(dòng)態(tài)進(jìn)行了深入地研究,為今后很好地利用花絨堅(jiān)甲控制松褐天牛的種群數(shù)量,為控制松材線蟲病的傳播與蔓延提供必要的理論基礎(chǔ)與科學(xué)依據(jù)。筆者從2002年8月~2004年5月,對(duì)廣東地區(qū)花絨堅(jiān)甲的發(fā)生情況進(jìn)行了系統(tǒng)地調(diào)查,對(duì)花絨堅(jiān)甲的生物學(xué)特性、種群動(dòng)態(tài)及其飼養(yǎng)方法進(jìn)行了初步研究,主要研究內(nèi)容及結(jié)果為1初步掌握了花絨堅(jiān)甲在廣東省大體分布?;ńq堅(jiān)甲主要分布在廣東地區(qū)馬尾松PINUSM鯽。珂婦NDLAMB林內(nèi),在林間花絨堅(jiān)甲對(duì)松褐天牛幼蟲和蛹有較高的寄生率。通過調(diào)查結(jié)果統(tǒng)計(jì)當(dāng)馬尾松受到松褐天牛危害較重時(shí),花絨堅(jiān)甲種群數(shù)量隨之增長;在野外花絨堅(jiān)甲對(duì)馬尾松枯死木內(nèi)松褐天牛上寄生率,單株最高寄生率可達(dá)791%。2在廣東省林業(yè)科學(xué)研究院實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)花絨堅(jiān)甲的外部形態(tài)和種群動(dòng)態(tài)等方面做了一系列研究?;菊莆樟嘶ńq堅(jiān)甲在廣東野外種群動(dòng)態(tài)規(guī)律,野外花絨堅(jiān)甲與松褐天牛的種群動(dòng)態(tài)具有緊密的跟隨關(guān)系,為今后花絨堅(jiān)甲的繁殖飼養(yǎng)、保護(hù)利用和野外釋放等提供科學(xué)依據(jù)。3對(duì)廣東省花絨堅(jiān)甲的生物學(xué)特性進(jìn)行了深入地研究,通過測(cè)定得出了花絨堅(jiān)甲幼蟲、蛹和成蟲等蟲態(tài)的發(fā)育歷期。幼蟲期平均53D,蛹期平均264D,成蟲壽命平均2005D。
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