紫花松果菊菊苣酸提取與生物活性研究.pdf

1、I摘要紫花松果菊（EchinaceapurpureaL.）即紫錐菊，為菊科松果菊屬多年生草本植物。由于其具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫、抗氧化、抗病毒等作用，目前在世界各地廣泛種植并用于各種商業(yè)用途。菊苣酸屬于咖啡酸衍生物，是紫花松果菊中含量最豐富的酚類化合物之一，也是其主要特征成分和重要的免疫活性成分之一。本文一方面優(yōu)化了紫花松果菊中菊苣酸的提取、純化工藝；另一方面研究了菊苣酸對酪氨酸酶的抑制活性及其抗氧化和抗炎活性。具體研究結(jié)果如下：1

2、.采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化了紫花松果菊中菊苣酸的提取工藝，進(jìn)一步通過樹脂吸附、乙醇洗脫、萃取等過程純化菊苣酸，最終確定了最佳提取純化工藝：15倍量的40%乙醇提取溶液，在70℃下提取3次，每次提取1h；合并菊苣酸提取液過AB8樹脂柱吸附然后用去離子水洗至流出液無色再用50%乙醇溶液洗脫；合并樹脂純化后菊苣酸洗脫液，濃縮至原體積的110，回收乙醇，用3molL鹽酸和5%NaOH調(diào)溶液pH值為3，用醋酸乙酯萃取4次，收集萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮6

3、0℃下真空蒸干得到淺黃色粉末；最終HPLC法檢測其含量為60.23%。2.研究了菊苣酸提取物對酪氨酸酶的活性影響，結(jié)果表明菊苣酸提取物對酪氨酸酶活性有不同程度的抑制作用。隨著濃度的增加，紫花松果菊中菊苣酸對酪氨酸酶抑制率增大。菊苣酸濃度為20mgmL時，菊苣酸對酪氨酸酶單酚酶的抑制作用最大，抑制率為78.25%；菊苣酸濃度為10mgmL時即可100%抑制酪氨酸酶雙酚酶的活性。3.研究了紫花松果菊中菊苣酸提取物的抗氧化活性，以Vc為對照，

4、測定了其對有機(jī)自由基(DPPH)、羥基自由基清除能力、脂質(zhì)體過氧化的抑制作用；同時以BHA、BHT為對照，測定了菊苣酸提取物對菜籽油和豬油的抗氧化作用。結(jié)果表明：紫花松果菊菊苣酸提取物能夠有效地清除DPPH自由基、羥基自由基，同時能夠抑制脂質(zhì)體過氧化；菊苣酸提取物能顯著抑制豬油和菜籽油的氧化和酸敗，5gkg的菊苣酸提取物的抗氧化能力比0.2gkg的BHT、BHA略高，且其對豬油的抗氧化作用較菜籽油作用強(qiáng)；以上實(shí)驗(yàn)中菊苣酸提取物的抗氧化作

5、用均表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。4.采用蛋清至足腫脹、腹腔毛細(xì)血管通透性小鼠急性炎癥及膠原蛋白誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠慢性炎癥模型，研究了紫花松果菊中菊苣酸提取物的抗炎活性。結(jié)果表明：紫花松果菊中菊苣酸提取物能明顯抑制蛋清性小鼠足腫脹，且隨著菊苣酸提取物濃度的增加，抑制作用增強(qiáng)，有明顯的量效關(guān)系；菊苣酸提取物能降低醋酸所致毛細(xì)血管通透性的增加，對炎癥早期的滲出和水腫有顯著的抑制作用，且隨劑量增大而增強(qiáng)，高劑量組的菊苣酸提取物（40mg∕kg）與陽性對照