雌激素和拮抗劑對三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關基因表達的影響.pdf

1、池塘養(yǎng)殖三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢發(fā)育不良是制約其養(yǎng)殖效益的重要因素之一，其卵巢發(fā)育不良可能與體內的生殖內分泌調控有關。雌二醇(Estradiol,E2)是甲殼動物體內最主要的活性雌激素，但有關于其對甲殼動物卵巢發(fā)育的調控機制尚不清楚。本研究采用E2和雌激素拮抗劑(Tamoxifen,TAM)活體注射技術，分別研究了不同濃度E2和TAM對不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關基因表達水平的影響，旨

2、在為進一步研究甲殼動物的雌激素調控機制提供基礎資料。具體研究結果如下:
　　1.外源雌激素對不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達的影響
　　三疣梭子蟹的卵黃發(fā)生過程分為內源性卵黃發(fā)生期和外源性卵黃發(fā)生期兩個階段。本研究采用活體注射和熒光定量PCR(qRT-PCR)技術，分別研究了外源 E2對內、外源性卵黃發(fā)生期雌體成活率、血淋巴中雌激素含量、卵巢發(fā)育及相關基因表達的影響。
　　結果表明:
　　(1)注射外源

3、E2可顯著提高內、外源性卵黃發(fā)生期雌體血淋巴中E2的含量;
　　(2)對處于內、外源性卵黃發(fā)生期雌體而言，注射外源E2對其存活率和肝胰腺指數(shù)(HSI)均無顯著影響，但外源E2能夠顯著增加內源性卵黃發(fā)生期雌體的卵巢指數(shù)(GSI);
　　(3)注射外源E2可顯著促進內、外源性卵黃發(fā)生期雌體卵巢與肝胰腺中卵黃蛋白原(Vitellogenin,Vg)基因的表達，就雌激素相關受體(Estrogen-related receptor,E

4、RR)基因而言，注射外源E2可顯著促進內源性卵黃發(fā)生期雌體的眼柄和大顎器中，ERR基因的表達，但對卵巢、肝胰腺和胸神經(jīng)節(jié)中ERR基因的表達有一定的抑制作用。對于外源性卵黃發(fā)生期雌體，外源 E2僅顯著促進眼柄中ERR基因的表達。綜上，外源E2能夠顯著促進內源性卵黃發(fā)生期雌體的卵巢發(fā)育，但對外源性卵黃發(fā)生期雌體的卵巢發(fā)育無顯著促進作用,雌激素可能會通過調節(jié)ERR基因的表達以影響眼柄和大顎器等內分泌器官中相應激素的分泌來調節(jié)卵巢發(fā)育。

5、　　2.不同濃度外源雌激素拮抗劑對三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達的影響
　　雌激素是調控甲殼動物卵巢發(fā)育的重要性類固醇激素，TAM是研究雌激素作用機制的一種常用雌激素拮抗劑。本研究研究了不同濃度TAM對三疣梭子蟹雌體成活率、GSI、HSI及卵巢發(fā)育相關基因表達的影響。
　　結果顯示:
　　(1)不同濃度TAM對雌體存活率和HSI均無顯著影響，但在一定程度上抑制了GSI;
　　(2)外源注射TAM對三疣梭子蟹不同組織

6、中的Vg、ERR、維甲酸受體(retinoid X receptor,RXR)和蛻皮激素受體(Ecdysone receptor,EcR)基因表達均產(chǎn)生一定影響：Vg基因在卵巢和肝胰腺中的表達水平明顯受到TAM的抑制；低濃度TAM組(6.7和13.4μg/g)促進了卵巢和胸神經(jīng)節(jié)中的ERR，但高濃度TAM(20μg/g)抑制了大部分組織中的ERR表達水平；外源注射TAM對三疣梭子蟹卵巢和肝胰腺中的EcR基因表達的變化模式與ERR基因基本