在毛細(xì)管電泳中應(yīng)用移動(dòng)反應(yīng)界面法富集和檢測大鼠血漿中的氧化苦參堿和苦參堿.pdf

1、毛細(xì)管電泳(CE) 是近年來發(fā)展迅速的新型分析分離技術(shù)。與液相色譜和薄層層析相比，毛細(xì)管電泳具有速度快，分離度高，上樣量小等優(yōu)點(diǎn)。這一檢測技術(shù)被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、化工、環(huán)境等領(lǐng)域。但是由于毛細(xì)管的尺寸限制了檢測靈敏度，導(dǎo)致檢出限（LOD）無法達(dá)到其它一些色譜技術(shù)的水平。例如，毛細(xì)管的體積限制了樣品的上樣量。另外，由于檢測光路太短，影響了常用的光學(xué)檢測方法，如紫外檢測的效果。 為了適應(yīng)低濃度樣品分離測定的要求，近幾年在毛細(xì)管區(qū)

2、帶電泳中發(fā)展了許多在線富集的技術(shù)。通過設(shè)計(jì)方法壓縮毛細(xì)管中的樣品條帶，這些技術(shù)可以增加樣品注射的體積而不影響分離效率。本文首先介紹了毛細(xì)管區(qū)帶電泳中在線富集的若干方法，及其作用機(jī)制和應(yīng)用。其次結(jié)合移動(dòng)反應(yīng)界面（MRB）這一樣品在線富集技術(shù)，將這一技術(shù)應(yīng)用到生物堿的檢測和富集中。 實(shí)驗(yàn)采用建立在移動(dòng)反應(yīng)界面理論上的體系進(jìn)行大鼠血漿中氧化苦參堿和苦參堿的富集與定量檢測。與傳統(tǒng)的毛細(xì)管電泳相比，體系中引入了富集相和分離相。最優(yōu)化的條件

3、如下：20 mM HCOONa（用氨水調(diào)節(jié)pH至10.70）樣品緩沖溶液，40 mM HCOOH-HCOONa（pH 2.60）富集緩沖溶液，100 mM HCOOH-HCOONa (pH 4.80) 分離緩沖液， 3 min 樣品相上樣，氧化苦參堿和苦參堿的檢出限分別為1.03和0.38 μg/mL。在不到20分鐘的操作時(shí)間內(nèi)富集倍數(shù)提高到原來的60倍。氧化苦參堿在1.30-65.00 μg/mL的濃度范圍內(nèi)，苦參堿在0.84-42.