磁性納米人工切斷試劑的研制和應(yīng)用.pdf

1、化學(xué)小分子與生物火分子的相互作用，尤其是人工核酸定位切斷試劑對DNA的切斷在 DNA序列測定、染色體分析、基因治療以及DNA重組方面有著廣泛的用途，目前對人工合成的核酸切斷試劑的研究已引起人們的廣泛關(guān)注。另一方面，二氧化硅包裹的磁性納米粒子由于其獨有的特性如大比表面、生物相容性、磁場導(dǎo)航功能等，使其不斷向生命科學(xué)領(lǐng)域滲透，來研究和解決生命科學(xué)領(lǐng)域中的重大問題，這使得磁性納米人工切斷試劑進(jìn)入細(xì)胞進(jìn)行作用成為了可能。本論文在磁性納米粒子與人

2、工核酸定位切斷試劑的交叉領(lǐng)域進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，另外還研究了鈰離子誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的條件，為以后的工作奠定了基礎(chǔ)，取得了以下幾個有意義的結(jié)果： (1)通過化學(xué)鍵將以O(shè)DN為識別系統(tǒng)、Ce(IV)/EDTA為切斷系統(tǒng)的人工切斷試劑連接到了磁性納米粒子的表面，得到了基于磁性納米粒子的ODN人工核酸切割試劑(即ODN-磁性納米人工切斷試劑)，隨后我們利用其在生理條件下對目標(biāo)單鏈DNA進(jìn)行了定位切斷實驗，實驗結(jié)果表明，該ODN磁性納米

3、人工切斷試劑，在合適的條件下，能夠有效的對目標(biāo)單鏈DNA進(jìn)行切斷；切斷位點是由ODN連接EDTA的剛性接頭的空間效應(yīng)決定的，即切斷位點會沿著ODN延長5個堿基左右，可以利用這一點和設(shè)計識別序列的長短從而獲得預(yù)想的切斷片段的長短。 (2)通過硫硫鍵將以PNA為識別系統(tǒng)的核酸定位切割試劑連接到磁性納米粒子上，制成了基于磁性納米粒子的PNA磁性納米人工切斷試劑，并對目標(biāo)單鏈DNA進(jìn)行了初步的定位切斷實驗。實驗結(jié)果表明，合成的PNA磁性