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文檔簡介
1、測定頭發(fā)中類固醇物質(zhì)水平越來越多被應(yīng)用于臨床、神經(jīng)內(nèi)分泌和慢性應(yīng)激等研究領(lǐng)域。其中,皮質(zhì)醇、可的松、脫氫表雄酮(DHEA)、孕酮和睪酮等5種類固醇激素對人類的認(rèn)知、記憶和情緒等有重要作用。
本研究建立了一種靈敏、可靠、可同時測定頭發(fā)中上述五種類固醇激素的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)。樣品處理方法為:近頭皮、長度為1厘米的30mg發(fā)段經(jīng)剪碎后加入一定濃度的五種物質(zhì)的內(nèi)標(biāo)溶液,在甲醇中室溫孵育24小時;再將離心后的孵
2、育液經(jīng)過C18固相萃取柱進(jìn)行除雜、富集,然后經(jīng)過20倍濃縮進(jìn)入LC-MS/MS系統(tǒng)進(jìn)行檢測和定量。檢測在大氣壓化學(xué)電離(APCI)正離子多反應(yīng)模式(MRM)下進(jìn)行。前處理過程中固相萃取技術(shù)的使用有效的降低了基質(zhì)效應(yīng)的影響。該方法的線性范圍符合頭發(fā)中物質(zhì)的含量范圍;方法的定量限可達(dá)到0.5 pg/mg(皮質(zhì)醇、可的松和睪酮)、1 pg/mg(孕酮)和2.5 pg/mg(DHEA);日內(nèi)、日間精密度在10%以內(nèi);五種物質(zhì)的加標(biāo)回收率在96-
3、103%。
將該方法應(yīng)用于324名高一學(xué)生(男生133名,女生191名)和229名大一男生,測定兩組人群頭發(fā)樣本中的上述五種類固醇含量。結(jié)果顯示,高一男生可的松和睪酮含量顯著高于女生(p<0.05);高一男生可的松含量顯著高于大一男生(p<0.001),而睪酮含量則相反(p<0.05)。中/重度抑郁的大一男生,其皮質(zhì)醇和可的松含量均著高于非抑郁人群(p<0.05),而DHEA含量則相反(p<0.05);同時,中/重度抑郁組的可
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