功能化磁性微球的合成及在血紅蛋白分離中的應(yīng)用研究.pdf

1、眾所周知，蛋白質(zhì)組學(xué)的進步主要取決于大規(guī)模高通量蛋白質(zhì)分離和分析方法的革新和進步。近年來，研究者們設(shè)計合成不同類型的功能化磁性微球，表面功能基團通過靜電吸附或親和作用可以識別或可逆結(jié)合蛋白質(zhì)中的目標位點來實現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。本論文采用交聯(lián)法和蒸餾沉淀聚合法合成了兩種表面功能化的磁性微球，并成功將其應(yīng)用于血紅蛋白的分離。
　　1、首先通過改進的溶劑熱法合成Fe3O4磁性微球，其次通過溶膠凝膠法合成具有核殼式結(jié)構(gòu)的Fe3O4@SiO2，

2、然后通過硅烷化反應(yīng)將3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)修飾到Fe3O4@SiO2表面，使其表面含有豐富的氨基官能團。最后，通過交聯(lián)反應(yīng)，以戊二醛為交聯(lián)劑，將2-氨基噻唑鍵合到3-氨基丙基修飾的磁性微球表面上，合成噻唑功能化磁性微球Fe3O4@SiO2@AT。針對其進行高豐度蛋白血紅蛋白的分離性能研究，實驗結(jié)果表明其具有較高血紅蛋白負載量、優(yōu)異的選擇性分離血紅蛋白的性能。
　　2、分別通過改進的溶劑熱法和溶膠凝膠法合成Fe3O4

3、和Fe3O4@SiO2，進一步硅烷化反應(yīng)將γ-（甲基丙烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷(MPS)修飾到Fe3O4@SiO2表面，使其表面含有豐富的雙鍵官能團，然后通過表面的雙鍵與單體氯甲基苯乙烯發(fā)生蒸餾沉淀聚合反應(yīng)，在磁性微球表面修飾上一層聚氯甲基。表面修飾的氯甲基和N-甲基咪唑反應(yīng)，形成甲基咪唑基離子液體，合成咪唑陽離子功能化磁性微球Fe3O4@SiO2@pVBC@IL。進行蛋白質(zhì)等溫吸附、選擇性吸附和吸附動力學(xué)研究實驗，并將其應(yīng)用于人全血實