動(dòng)物性食品源沙門氏菌對抗生素和消毒劑的耐藥性研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是國際公認(rèn)的食品衛(wèi)生和耐藥性監(jiān)測重要的指示菌，廣泛存在自然界，可以通過食物鏈傳播，并感染人和動(dòng)物，導(dǎo)致腹瀉，感染致病性較強(qiáng)的血清型時(shí)還能致命。抗生素是預(yù)防和治療沙門氏菌等病原菌感染的重要手段，近年來由于抗生素的廣泛及不合理使用，食源性沙門氏菌對抗生素耐藥性增強(qiáng)。為了降低傳染的發(fā)生、阻止抗生素耐藥菌的進(jìn)一步危害，環(huán)境消毒控制成為控制病原菌傳播的主要措施，目前，季銨鹽類(Quaternary Ammonium

2、 Compounds，QACs)消毒劑已被廣泛用于養(yǎng)殖、食品加工等環(huán)境的消毒，然而消毒劑使用的增多是否會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌對消毒劑的耐藥也成為眾多學(xué)者關(guān)心的問題，已有報(bào)道發(fā)現(xiàn)抗生素可以與季銨鹽類消毒劑共同耐藥，但目前國內(nèi)關(guān)于動(dòng)物性食品源沙門氏菌對消毒劑耐藥及與抗生素共同耐藥的研究報(bào)道較少。
　　本研究采集四川省肉類樣品，分離沙門氏菌，并利用形態(tài)學(xué)、生理生化及特異基因進(jìn)行鑒定。按照CLSI推薦方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用瓊脂稀釋法測定沙門氏菌對9種不

3、同抗生素、兩種季銨鹽類消毒劑的MIC值，并應(yīng)用PCR方法檢測抗生素及消毒劑耐藥基因，分析沙門氏菌對消毒劑耐藥性與抗生素耐藥性之間的關(guān)系，并對沙門氏菌株進(jìn)行PFGE分型。本研究主要開展了以下研究:
　　(1)動(dòng)物性食品源沙門氏菌的分離、鑒定
　　2013-2014年從四川省不同地區(qū)采集肉類樣品327份包括:豬肉137份，雞肉91份，牛肉99份，利用選擇性培養(yǎng)基分離，invA基因檢測，鑒定出沙門氏菌163株(49.84％):豬肉

4、78株(56.93％)，雞肉46株(50.55％)，牛肉39株(39.39％)。沙門氏菌血清型最多的是德爾卑沙門氏菌(Salmonella Derby)，鼠傷寒沙門氏菌(S.Typhimurium)，羅森沙門氏菌(S.Rissen)，分別占分離菌株數(shù)的28.22％，14.11％及11.66％。
　　(2)動(dòng)物性食品源沙門氏菌對抗生素的耐藥性
　　154株(94.48％)沙門氏菌對9種抗生素表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，對土霉素和甲

5、氧芐啶的耐藥率最高。多重耐藥分析結(jié)果顯示，163株沙門氏菌中，71株(43.56％)為多重耐藥菌株，多重耐藥嚴(yán)重。各種耐藥譜型中，1-2耐菌株所占比例最大，其次為3耐，優(yōu)勢耐藥譜型分別為OTC-TMP和TMP。
　　(3)動(dòng)物性食品源性沙門氏菌對消毒劑的耐藥性
　　163株沙門氏菌對兩種季銨鹽消毒劑的MIC值較高，PCR擴(kuò)增5種季銨鹽類質(zhì)粒型消毒劑耐藥基因，分析其與沙門氏菌抗生素耐藥性之間的關(guān)系。結(jié)果表明各消毒劑MIC范圍是

6、:BC，8-128 mg/L; CTPC，8-256 mg/L。QACs耐藥基因檢出率為:qacE⊿1(10.42％;17/163)，qacF(17.17％;28/163)，未檢出qacE、qacG、sugE(p)。所有抗生素耐藥菌中qacE⊿1、qacF檢出率高于抗生素敏感菌(p＜0.05）。
　　(4)動(dòng)物性食品源沙門氏菌PFGE分型
　　對163株沙門氏菌進(jìn)行PFGE分型。結(jié)果表明沙門氏菌可以分為41個(gè)基因型，沙門氏菌

7、污染與肉類采集地點(diǎn)相關(guān)，部分同源性較高的沙門氏菌菌株中，抗生素耐藥譜型相似。部分菌株消毒劑耐藥基因與PFGE譜型相關(guān)。
　　本研究發(fā)現(xiàn)四川省動(dòng)物性食品源沙門氏菌污染情況較嚴(yán)重，菌株對抗生素的耐藥率及多重耐藥率較高，沙門氏菌對季銨鹽類消毒劑具有較高M(jìn)IC值，消毒劑耐藥基因檢出率高，消毒劑耐藥基因qacE⊿1、qacF與抗生素耐藥具有顯著相關(guān)性。耐藥沙門氏菌來源與肉類采集地點(diǎn)相關(guān)。可見，應(yīng)加強(qiáng)對動(dòng)物性食品源沙門氏菌污染及耐藥性監(jiān)測，并