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文檔簡介
1、燒傷在生產(chǎn)生活中經(jīng)常發(fā)生,其中深 II度燒傷很常見,其特點是創(chuàng)面腫脹蒼白,常伴有水皰。與I度和淺II度燒傷不同,深II度燒傷須經(jīng)醫(yī)學處理才能愈合良好,其中燒傷敷料是最常用的治療方法。敷料可提供創(chuàng)面適宜微環(huán)境,對創(chuàng)面愈合及后期修復起到關鍵作用,但目前還未有理想的燒傷敷料滿足深 II度燒傷創(chuàng)面愈合的多種需求,包括保護創(chuàng)面、吸收滲出、促進創(chuàng)面愈合、抗感染等。
靜電紡絲(Electrospinning)技術(shù)利用聚合物溶液或熔體在電場力
2、下帶電,并被拉伸產(chǎn)生形變,最終溶劑揮發(fā)固化形成纖維。靜電紡絲納米纖維的特點是尺度均一、長徑較長。納米纖維膜具有高孔隙率和高表面積體積比,與細胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)相似,適合作為創(chuàng)傷敷料。同軸納米纖維具有殼核狀或中空狀結(jié)構(gòu),賦予納米纖維特殊的性能。同軸納米纖維的制備利用改進的靜電紡絲工藝。該工藝采用不同的殼層溶液和芯層溶液,通過一個特殊的套管針頭同時靜電紡絲得到同軸納米纖維。
本文利用同軸靜電紡絲技術(shù),將具有強大吸水能力的海藻酸鈉、廣譜抗
3、菌性能的殼聚糖、成纖維性良好的聚乙烯醇(PVA)及促傷口愈合的活性藥物-積雪草總苷結(jié)合,制備得到芯層載積雪草總苷的海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜,并研究其對深II燒傷創(chuàng)面修復的促進作用。
1.靜電紡絲法制備同軸納米纖維膜的處方工藝
海藻酸鈉與 PVA混合作為同軸納米纖維的殼層材料,芯層添加殼聚糖,篩選了同軸靜電紡絲工藝中的電壓、接收距離、殼層及芯層溶液濃度、推注速度等條件,最終確定同軸靜電紡絲法制備納米纖維的
4、最佳處方及工藝參數(shù):殼層為0.8%(w/v)海藻酸鈉/7%(w/v)PVA混合溶液,芯層為3%(w/v)殼聚糖溶液;靜電紡絲工藝參數(shù):電壓為23 kV,針頭至接收屏的接收距離為15cm,殼層及芯層推注速度分別為0.8、0.2ml/h。掃描電子顯微鏡(Scanning electron microscope,SEM)觀察海藻酸鈉/PVA/殼聚糖同軸納米纖維膜表面光滑,串珠結(jié)構(gòu)較少,平均直徑為373.74±90.74nm,分布均勻。
5、 2.同軸納米纖維膜的結(jié)構(gòu)及性能
透射電子顯微鏡(Transmission electron microscope,TEM)觀察同軸納米纖維膜具有明顯的核-殼結(jié)構(gòu),其中芯層直徑為99.2nm,殼層厚度為33.8nm。X射線衍射(X-ray diffraction,XRD)和傅里葉紅外光譜(Fourier transform infrared spectrum,F(xiàn)TIR)方法表征其結(jié)構(gòu),證明了同軸納米纖維膜中各成分之間發(fā)生了一
6、定的相互作用,形成了與物理混合物不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)??疾炝送S納米纖維膜的吸水性能,證明加入海藻酸鈉后能明顯提高納米纖維膜的吸水性能。加入殼聚糖增強了同軸納米纖維膜抗菌性能。
3.載藥同軸納米纖維膜的制備及釋藥
在同軸納米纖維膜處方工藝的基礎上,制備芯層含積雪草總苷(積雪草總苷含量分別為1.5、2.5、5%,w/w)的載藥同軸納米纖維膜。掃描電鏡觀察載藥同軸納米纖維膜,纖維平均直徑為433.37±75.47nm,分布均勻
7、,串珠結(jié)構(gòu)少。
高效液相色譜法測定積雪草總苷中單體成分積雪草苷含量,進一步計算載藥同軸納米纖維膜中積雪草總苷的含量。確定積雪草苷液相色譜條件為:高效液相色譜儀:安捷倫1260型;色譜柱Diamonsil? C18(5μm,250×4.6mm);柱溫:30℃;流動相:乙腈:水=29:71(v/v);檢測波長:205nm;流速:1.0ml/min;進樣量:20μl。建立積雪草苷標準曲線,回歸方程A=4.6748C+4.585(r=
8、0.9999),在10-400μg/ml范圍內(nèi)線性關系良好;5天內(nèi)精密度良好,RSD<2%。表明該方法精確可靠,可用于積雪草總苷定量分析。
載藥同軸納米纖維膜的體外藥物釋放結(jié)果表明其具有明顯的藥物緩釋效果,同普通非同軸混紡納米纖維膜相比,同軸納米纖維膜釋放緩慢,無藥物突釋現(xiàn)象,釋藥10h后,累積釋放達到80%。經(jīng)方程擬合,其釋藥機制符合Ritger-Peppas方程,證明藥物釋放以Fick’s擴散為主。
4.載藥同軸
9、納米纖維膜治療深II度燒傷的藥效學研究
采用臺式超級控溫燒傷儀建立SD大鼠深II度燒傷模型,燒傷儀具體參數(shù)為:燙頭溫度80℃,壓力500g,燙頭與皮膚接觸時間8s。
創(chuàng)面組織學檢查、創(chuàng)面愈合率及病理學結(jié)果表明,空白及載藥同軸納米纖維膜對大鼠深II度燒傷創(chuàng)面愈合均具有明顯促進作用,傷后第18天創(chuàng)面已基本愈合,較模型組具有顯著性差異,但未表現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。
采用免疫組化、ELISA初步探討同軸納米纖維膜促
10、進大鼠深II度燒傷創(chuàng)面的愈合機制,發(fā)現(xiàn)同軸納米纖維膜可上調(diào)創(chuàng)面組織的血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板-內(nèi)皮細胞黏附分子(Cluster of differentiation31,CD31)、增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)等細胞因子的表達,進而加速創(chuàng)面愈合。同時,同軸納米纖維膜還可下調(diào)創(chuàng)面腫瘤壞死因子
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