2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、作為一種蔬菜糧食兼用作物,馬鈴薯因含有豐富的淀粉、多種生物活性成分、良好的適口性和加工性廣受人們喜愛。紫色馬鈴薯作為一種特色馬鈴薯,含有豐富的花色苷,可作為天然食用色素的來源。據(jù)報道紫色馬鈴薯具有清除自由基、預(yù)防腫瘤、糖尿病等生物功能,因而逐漸引起人們的關(guān)注。在西方發(fā)達(dá)國家,前列腺癌是發(fā)病率和致死率僅次于肺癌的第二大癌癥,在我國患病人數(shù)呈現(xiàn)逐年遞增的趨勢。前列腺癌后期通常會由激素依賴性轉(zhuǎn)變激素非依賴性前列腺癌,后者對化療不敏感,是導(dǎo)致絕

2、大多數(shù)患者死亡的原因。本文以甬紫一號紫色馬鈴薯(Solanum Tuberosum L.)不同部位——皮和肉的花色苷提取物為研究對象,研究其抗氧化成分含量與抗氧化活性強(qiáng)弱,并作用于雄激素非依賴性前列腺癌Du145、PC-3細(xì)胞,研究其對兩種癌細(xì)胞的抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡作用機(jī)制,并進(jìn)一步探索紫色馬鈴薯皮花色苷提取物發(fā)揮抗前列腺癌功效的關(guān)鍵有效成分。研究結(jié)果為紫色馬鈴薯抗癌生物功能的開發(fā)奠定了理論基礎(chǔ),并對花色苷體外抗前列腺癌的研究有一定的借

3、鑒意義。主要研究結(jié)論如下:
  (1)以紫色馬鈴薯皮和肉為研究對象,通過提取、純化分別獲得了花色苷提取物(Anthocyanin Extracts from Purple Potato Peel,AEPPP;Anthocyanin Extractsfrom Purple Potato Flesh,AEPPF)。測定了紫色馬鈴薯皮和肉花色苷提取物中主要的抗氧化成分含量,分別為:總酚606.50±31.74、593.86±21.91m

4、g/g凍干粉(以綠原酸計),總黃酮472.97±2.26、353.02±2.64mg/g凍干粉(以蘆丁計),花色苷207.33±6.67、320.81±4.32mg/g凍干粉(以矢車菊素-3-葡萄糖苷計)。實驗表明,紫色馬鈴薯皮和肉的花色苷提取物均具有一定的抗氧化活性。AEPPP與AEPPF清除自由基DPPH、ABTS+能力與鐵離子還原能力均弱于對照Trolox,AEPPP與AEPPF的抗氧化活性差異不明顯。AEPPP與AEPPF清除D

5、PPH自由基的IC50值分別為207.41μg/mL、241.61μg/mL,清除ABTS+自由基的IC50分別為96.99μg/mL、109.65μg/mL,鐵離子還原能力分別是對照Trolox的0.54倍和0.45倍。。
  (2)紫色馬鈴薯皮花色苷提取物能有效抑制雄激素非依賴性前列腺癌Du145、PC-3細(xì)胞的增殖,并呈明顯的劑量-時間依賴效應(yīng),作用于Du145細(xì)胞24、48、72h的IC50值分別為39.02μg/mL、3

6、3.81μg/mL、26.71μg/mL,作用于PC-3細(xì)胞24、48、72h的IC50值依次為50.03μg/mL、42.95μg/mL、33.58μg/mL,但紫色馬鈴薯肉的花色苷提取物效果不明顯。AEPPP能夠顯著影響Du145、PC-3細(xì)胞的周期分布,分別將其阻滯于G0/G1期、G2/M期,從而抑制細(xì)胞增殖。PI/Annexin-VFITC雙染結(jié)果顯示AEPPP可誘導(dǎo)Du145、PC-3細(xì)胞凋亡,免疫印跡實驗進(jìn)一步表明AEPPP

7、作用48h下的Du145細(xì)胞內(nèi)procaspase-3活化,其表達(dá)隨AEPPP濃度增加而增強(qiáng),且有剪切的avtivecaspase-3出現(xiàn),而PC-3細(xì)胞內(nèi)未出現(xiàn)procaspase-3的活化,且未檢測到activecaspase-3。推測AEPPP誘導(dǎo)Du145、PC-3細(xì)胞凋亡分別通過caspase依賴途徑和caspase非依賴途徑。
  (3)探索了紫色馬鈴薯皮花色苷抗前列腺癌的構(gòu)效關(guān)系。采用HPLC-DAD-ESI-MS/

8、MS方法,對紫色馬鈴薯皮花色苷組成進(jìn)行了快速鑒定,共檢出14種花色苷,所含花色苷均是以五種花色素苷元——矮牽牛素、芍藥素、錦葵素、飛燕草素、矢車菊素的不同形式(糖基取代/糖基取代且?;〈┐嬖凇S?種花色苷未進(jìn)行?;〈?,形式為花色素-3-O-蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷,含量甚微;占據(jù)較大比例(79.5%)的存在形式為花色素-3-O-對香豆酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷,也存在4種花色苷其參與?;挠袡C(jī)酸替換為咖啡酸或阿魏酸;此外,存在

9、一種對香豆酸?;幕ㄉ?,其糖基取代形式并非常規(guī)的C3,5-位取代,而是C3,7-位取代。通過半制備液相獲得三種含量較高的花色苷單體,分別為矮牽牛素-3-O-對香豆酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷(petanin)、矮牽牛素-3-O-阿魏酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷(petanin/f,簡稱)、芍藥素-3-O-對香豆酰蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷(peonanin),高效液相圖譜面積歸一化分析三者純度依次為92.97%、73.60%、86.7

10、2%。MTT實驗結(jié)果表明,三種花色苷單體無論單獨添加還是復(fù)配添加,對Du145細(xì)胞均沒有明顯的增殖抑制作用,推測紫色馬鈴薯皮花色苷提取物中發(fā)揮關(guān)鍵作用的成分并非這三種含量較高的花色苷。
  (4)采用LH-20凝膠層析柱對紫色馬鈴薯皮花色苷提取物進(jìn)行分離純化,進(jìn)一步探索提取物中發(fā)揮抗前列腺癌Du145細(xì)胞的關(guān)鍵組分。確定了層析條件為以0.1%HCl的30%甲醇溶液為洗脫劑,上樣量30mg,流速1.0mL/min。層析分離后,獲得六

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