烏藥葉乙醇提取物體外抗氧化及槲皮苷純化工藝的研究.pdf

1、烏藥(Lindera aggregate(Sims) Kosterm)是樟科(Lauraceae)山胡椒屬植物，以浙江天臺(tái)的為道地藥材，又稱“天臺(tái)烏藥”或“臺(tái)烏藥”，在當(dāng)?shù)匾云淠廴~代茶飲，具有較好的防治心腦血管疾病的效果。
　　槲皮苷是烏藥葉中主要且含量最高的有效成分，本課題以槲皮苷為目標(biāo)成分，建立了烏藥葉中槲皮苷的HPLC含量測(cè)定方法，初步制定烏藥葉的藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);以槲皮苷的得率為指標(biāo)，優(yōu)選出了槲皮苷的最佳提取工藝，以及利用大孔

2、吸附樹脂和反相色譜技術(shù)的純化工藝，獲得了槲皮苷的純品。上述研究，為將槲皮苷開發(fā)成治療心腦血管疾病的新藥奠定了一定的基礎(chǔ)。
　　1.烏藥葉藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　通過比較不同批次藥材的薄層色譜，建立了烏藥葉薄層鑒別方法;根據(jù)烘干法測(cè)定的十批藥材的含水量數(shù)據(jù)，規(guī)定了烏藥葉藥材的含水量不得超過8％;通過比較熱浸法測(cè)定的不同批次藥材乙醇浸出物的含量，規(guī)定烏藥葉藥材的乙醇浸出物不得低于18％。
　　2.烏藥葉中槲皮苷含量測(cè)定方法的

3、研究
　　建立了藥材中槲皮苷的HPLC-PDA含量測(cè)定方法，并測(cè)定浙江天臺(tái)多批不同采收時(shí)間的烏藥葉中槲皮苷的含量，結(jié)果顯示五月份最高，八月、九月次之，為確定烏藥葉的科學(xué)采收季節(jié)提供了依據(jù)。
　　3.烏藥葉中槲皮苷提取工藝的研究
　　通過單因素和均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)，以槲皮苷得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選槲皮苷提取工藝。擬選工藝為烏藥葉采用22倍量的70％乙醇提取3次，每次2h。驗(yàn)證試驗(yàn)表明優(yōu)選出的工藝穩(wěn)定可行。
　　4.槲皮苷的純

4、化工藝研究
　　烏藥葉的乙醇提取液經(jīng)大孔樹脂吸附法去除色素等雜質(zhì)，通過靜態(tài)吸附解析試驗(yàn)優(yōu)選出大孔樹脂類型為AB-8，以槲皮苷純度和乙醇洗脫物重量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選出最佳的大孔吸附樹脂純化工藝為:烏藥葉提取物浸膏以025g生藥/ml溶解，并將其pH調(diào)至4，上樣后，吸附1h，依次用2BV pH9的氫氧化鈉水溶液、3BV水、3BV50％乙醇洗脫，50％乙醇洗脫部分為總黃酮。總黃酮進(jìn)一步經(jīng)反相硅膠色譜純化，以槲皮苷純度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過均勻設(shè)

5、計(jì)試驗(yàn)優(yōu)選純化條件為:總黃酮按照1∶40上樣（總黃酮g∶柱體積mL），采用14.25％的乙醇3BV/h洗脫至槲皮苷流出，洗脫物再用乙醇-水系統(tǒng)進(jìn)行重結(jié)晶，得到槲皮苷單體。
　　烏藥葉含多種多酚類化合物（包括黃酮類成分），本課題還采用Felin-Ciocalteu法測(cè)定了八批烏藥葉中總多酚的含量，采用DPPH法和FRAP法評(píng)價(jià)了烏藥葉乙醇提取液的體外抗氧化能力，并經(jīng)過相關(guān)性分析評(píng)價(jià)了烏藥葉中總多酚含量和體外抗氧化能力的關(guān)系。結(jié)果表明