閥切換離子色譜耦合脈沖安培檢測(cè)器法測(cè)定葡萄酒中的氨基酸和糖.pdf

1、葡萄酒作為一種酒類飲品，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其主要成分包括氨基酸、碳水化合物、酚類、有機(jī)酸和陰陽(yáng)離子等。氨基酸和糖作為葡萄酒中兩種重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)人體營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和新陳代謝起著關(guān)鍵的作用。葡萄酒中必需氨基酸含量與人體內(nèi)含量非常接近，易被人體吸收，可形成蛋白質(zhì)，促進(jìn)新陳代謝，增進(jìn)食欲，以及防止老年癡呆等；糖類物質(zhì)不僅為葡萄酒提供了豐富的甜味口感體驗(yàn)；為人體的新陳代謝提供構(gòu)成物質(zhì)和能量；而且還可以幫助消化和調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)脂肪與蛋白質(zhì)的新陳代

2、謝。從葡萄的種植到葡萄酒的生產(chǎn)整個(gè)過(guò)程中，氨基酸和糖成分的變化都對(duì)葡萄酒品質(zhì)產(chǎn)生一定影響，因此，對(duì)氨基酸和糖的定量分析在葡萄酒生產(chǎn)過(guò)程中意義重大。
　　氨基酸的檢測(cè)方法主要有陽(yáng)離子交換柱后衍生分光光度檢測(cè)和液相色譜柱前衍生分光光度檢測(cè)，糖類主要是液相色譜配有示差檢測(cè)器檢測(cè)，衍生化處理誤差大，程序繁瑣，對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)中低濃度物質(zhì)的精確定量極為不利。近年來(lái)，離子交換色譜耦合脈沖安培檢測(cè)器作為檢測(cè)氨基酸和糖的重要分析方法逐漸受到關(guān)注，閥切

3、換技術(shù)的應(yīng)用更是為氨基酸和糖的互相干擾提供了有效的解決措施，閥切換技術(shù)能夠在柱子之間進(jìn)行切換，捕集目標(biāo)組分，消除干擾基質(zhì)，擁有很好的靈敏度，在實(shí)際應(yīng)用中取得良好效果。
　　本文建立了一種閥切換陰離子交換色譜快速并同時(shí)分析葡萄酒中氨基酸和糖的分析方法，主要研究結(jié)果如下：
　　1、探索了一種反向固相萃取前處理方法，對(duì)葡萄酒中色素進(jìn)行有效去除，并成功洗脫目標(biāo)化合物色氨酸。
　　選取一種固相萃取小柱（IC-RP柱）對(duì)葡萄酒中的

4、色素進(jìn)行萃取，并運(yùn)用10％乙醇對(duì)葡萄酒中色氨酸進(jìn)行洗脫，色素不被洗脫，使得色氨酸回收率達(dá)到90%以上，確保葡萄酒樣品符合離子色譜的進(jìn)樣條件，降低酒中色素對(duì)糖柱（Carbo Pac PA10）和氨基酸柱（Amino acid PA10）的影響；同時(shí)對(duì)萃取材料和萃取液的選取及其用量進(jìn)行了優(yōu)化，得到較高的萃取效率。
　　2、建立了一種閥切換技術(shù)，對(duì)乙醇進(jìn)行在線去除并同時(shí)檢測(cè)葡萄酒中的糖和氨基酸。
　　選取一種陽(yáng)離子交換柱（CRC）

5、，根據(jù)氨基酸和糖在陽(yáng)離子交換柱上的保留原理的不同，調(diào)整淋洗液流速和濃度，使得糖和氨基酸在陽(yáng)離子交換柱上實(shí)現(xiàn)有效分離.同時(shí)運(yùn)用十通閥切換原理，將氨基酸和糖分別切換到不同的色譜柱上，分別檢測(cè)，避免了糖和氨基酸在同一色譜柱上的共淋洗現(xiàn)象，提高了分析效率。由于乙醇在糖電化學(xué)檢測(cè)器上的高響應(yīng)值影響了糖的精準(zhǔn)定量，增加一閥對(duì)乙醇進(jìn)行切換去除.因此，一個(gè)進(jìn)樣閥，一個(gè)十通閥和一個(gè)六通閥的三閥組合，實(shí)現(xiàn)了葡萄酒中氨基酸和糖的同時(shí)檢測(cè)和乙醇去除。
　

6、　3、完成了閥切換離子色譜的方法評(píng)價(jià)，并將該方法成功應(yīng)用于對(duì)六種來(lái)自不同產(chǎn)地葡萄酒乙醇去除以及糖和氨基酸的測(cè)定。
　　各類糖標(biāo)準(zhǔn)品在0.05mg/L到10mg/L的(標(biāo)曲)范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)大于0.99，線性相關(guān)性良好。各物質(zhì)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍從0.8到4.9%。LOD值為0.01mg/L到0.05mg/L。用于葡萄酒中糖類的測(cè)定，樣品的平均加標(biāo)回收率從89.06%到110.03%，結(jié)果令人滿意。
　　各類氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品在0.0