氰戊菊酯免疫分析化學(xué)研究.pdf

1、 本實驗以氰戊菊酯為研究對象，從不同的化學(xué)途徑，合成了兩種結(jié)構(gòu)不同的氰戊菊酯半抗原Fen-Hp1、Fen-Hp2。采用活性酯法將半抗原與載體蛋白BSA和OVA共價偶聯(lián)，制備了多種人工抗原，經(jīng)紫外掃描確定偶聯(lián)成功后，以Fen-Hp1-BSA、Fen-Hp2-BSA為免疫原免疫新西蘭白兔，分別獲得了針對兩種半抗原的特異性抗血清。間接ELISA法測定抗血清的中點效價分別為3.2×104和2.4×104，雙向瓊脂擴(kuò)散法測定抗血清的效價為1

2、/32。以硫酸銨分步鹽析法分離純化抗血清中的抗體并凍干得抗體1(Ab1)和抗體2(Ab2)。用活性酯法制備酶標(biāo)半抗原1(Fen-Hp1-HRP)，酶標(biāo)記物既保持了免疫化學(xué)特性，又保持了酶活性，可用于免疫化學(xué)分析。 　　進(jìn)一步研究了pH值、離子強(qiáng)度、吐溫20和有機(jī)溶劑在包被抗體－酶標(biāo)半抗原(E-H)直接競爭ELISA中對氰戊菊酯與抗體1親合作用的影響。成功建立了氰戊菊酯直接競爭酶聯(lián)免疫吸附分析法。成功建立了用于含間苯氧基芐醇(PBM)結(jié)