2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、從牛奶中分離酪蛋白和乳糖一、引言牛奶中主要的蛋白質(zhì)是酪蛋白,含量約為35gl。酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸鈣磷酸鈣復(fù)合體膠粒存在,膠粒直徑約為20~800納米,平均為100納米。在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白會(huì)沉淀,加工后可制得干酪或干酪素。本實(shí)驗(yàn)利用加酸,當(dāng)達(dá)到酪蛋白等電點(diǎn)PH=4.7時(shí),酪蛋白沉淀。脫脂乳中除去酪蛋白后剩下的液體為乳清,在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白,還有溶解狀態(tài)的乳糖,乳中糖類的99.8%以上是乳糖,可通過濃縮、結(jié)晶制取乳

2、糖。二、實(shí)驗(yàn)材料和試劑脫脂乳或脫脂奶粉。醋酸醋酸鈉緩沖溶液(PH=4.7),95%乙醇,乙醚,碳酸鈣粉末,苯肼試劑。三、實(shí)驗(yàn)步驟1.從牛奶中分離酪蛋白在燒杯中加入2g脫脂奶粉,再加入40ml40℃,PH=4.7的醋酸醋酸鈉緩沖溶液40ml,用PH精密試紙檢驗(yàn)液體的PH值。靜置冷卻至室溫,傾去上層清液(留作分離乳糖用),剩下的懸浮液分別裝入兩支離心試管中,用轉(zhuǎn)速為2000轉(zhuǎn)分離心分離3~5分鐘,傾出上層清液,(合并于上一清液中),得酪蛋白

3、粗品。于離心管中加入5ml蒸餾水,用玻棒充分?jǐn)嚢?,洗滌除去其中的水溶性雜質(zhì)(如乳清蛋白,乳糖以及殘留的緩沖溶液),離心后棄去上層液,再用蒸餾水洗一次。于試管中加入5ml95%乙醇,充分?jǐn)嚢瑁x心后棄去乙醇溶液,用乙醇洗滌主要是除去磷脂類物質(zhì)。最后再用5ml乙醚以同樣方法洗滌,以除去脂肪類物質(zhì)。將酪蛋白沉淀物涼干,稱重、并計(jì)算得率。2.從牛奶中分離乳糖在除去酪蛋白的乳清中,加入1.5gCaCO3粉末,攪拌均勻后加熱至沸。加CaCO3的目的

4、一方面是中和溶液的酸性,防止加熱時(shí)乳糖水解,另方面又能使乳白蛋白沉淀。過濾除去沉淀,在濾液中加入1~2粒沸石,加熱濃縮至3~5ml,加入10ml95%乙醇(注意離開火焰)和少量活性炭,攪拌均勻后在水浴上加熱至沸騰,趁熱過濾,濾液必須澄清。加塞放置過夜,乳糖結(jié)晶析出,抽濾,用95%乙醇洗滌產(chǎn)品。3.乳糖成脎試驗(yàn)取自制乳糖溶于少量水中,濃度約為5%,在試管中加入1ml乳糖溶液,1ml苯肼試劑①,搖勻,試管口用棉花塞住,在沸水浴中加熱,并不時(shí)

5、振搖,加熱10~15分鐘后,取出放置冷卻,乳糖脎成結(jié)晶析出。取少量乳糖脎在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形態(tài),可證實(shí)為乳糖。①苯阱試劑有毒,小心使用,勿觸及皮膚,如觸及皮膚先用稀醋酸洗,再用水洗。(二)蛋白質(zhì)的抽提通常選擇適當(dāng)?shù)木彌_液溶劑把蛋白質(zhì)提取出來(lái)。抽提所用緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、組成成分等條件的選擇應(yīng)根據(jù)欲制備的蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定。如膜蛋白的抽提,抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、tritonX100等),使膜結(jié)構(gòu)破壞,利于蛋

6、白質(zhì)與膜分離。在抽提過程中,應(yīng)注意溫度,避免劇烈攪拌等,以防止蛋白質(zhì)的變性。(三)蛋白質(zhì)粗制品的獲得選用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑺牡鞍踪|(zhì)與其它雜蛋白分離開來(lái)。比較方便的有效方法是根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異進(jìn)行的分離。常用的有下列幾種方法:1.等電點(diǎn)沉淀法不同蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同,可用等電點(diǎn)沉淀法使它們相互分離。2.鹽析法不同蛋白質(zhì)鹽析所需要的鹽飽和度不同,所以可通過調(diào)節(jié)鹽濃度將目的蛋白沉淀析出。被鹽析沉淀下來(lái)的蛋白質(zhì)仍保持其天然性質(zhì),并能再度溶解而不

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