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文檔簡介
1、目的:從國內(nèi)不同廠家IVIg制品中篩選出抗可溶性Aβ抗體含量較高的IVIg,再通過親和層析分離純化出此制品中的抗可溶性Aβ抗體,從而為使用國產(chǎn)IVIg防治阿爾茨海默病提供實驗支撐。
方法:1. 利用人工合成的Aβ通過三種不同的方法合成Aβ寡聚體,再通過SDS-PAGE對制備好的寡聚體進行鑒定,從而篩選出較優(yōu)的合成方法。2. 通過透析、超濾以及凝膠過濾層析等方法去除Aβ寡聚體中混雜的Aβ單體。3. 通過間接ELISA檢測國內(nèi)7個
2、不同廠家不同批次IVIg制品中抗Aβ抗體的含量,從中篩選出抗體含量較高的IVIg制品。4. 將可溶性Aβ偶聯(lián)到微珠上,IVIg上樣,進行親和層析,從而分離純化出抗Aβ抗體。然后再通過ELISA和SDS-PAGE對純化出的抗體做出初步鑒定。
結(jié)果:1. 使用第二種方法合成Aβ寡聚體效果較好,不僅含有低分子量的,還含有高分子量的,而且寡聚體含量也較高。2. 透析、超濾以及凝膠過濾層析等方法都無法將Aβ單體和寡聚體分離開來。3. 廠
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