注射劑常用增溶性藥用輔料的安全與增溶研究

1、—————————收稿日期：收稿日期：基金項目：中醫(yī)藥行業(yè)科研專項項目（基金項目：中醫(yī)藥行業(yè)科研專項項目（200708006）重大新藥創(chuàng)制重大專項重大新藥創(chuàng)制重大專項(2009ZX09103393)中藥新型中藥新型給藥系統(tǒng)技術(shù)平臺“十一五”重大新藥創(chuàng)制項目給藥系統(tǒng)技術(shù)平臺“十一五”重大新藥創(chuàng)制項目(2009ZX09310005)第一作者：張海燕第一作者：張海燕講師，在讀博士，講師，在讀博士，從事中藥新制劑、新技術(shù)、新工藝和醫(yī)用生物材料研

2、究。從事中藥新制劑、新技術(shù)、新工藝和醫(yī)用生物材料研究。Tel:(0791)7119010Email:haiyansl@163.com通訊作者：楊通訊作者：楊明教授，博士，教授，博士，從事中藥炮制學(xué)、中藥制劑學(xué)及中藥新制劑、新技術(shù)、新工藝研究。從事中藥炮制學(xué)、中藥制劑學(xué)及中藥新制劑、新技術(shù)、新工藝研究。Tel:(0791)7118658Email:yangming16@126.com注射劑常用增溶性藥用輔料的安全與增溶研究注射劑常用增溶性

3、藥用輔料的安全與增溶研究張海燕12，齊云3，廖永紅3，史新元4，鄢丹5，鄔偉魁1，楊明16（1.江西中醫(yī)學(xué)院現(xiàn)代中藥制劑教育部重點實驗室，江西南昌330004；2.西南交通大學(xué)材料先進技術(shù)教育部重點實驗室四川成都610003；3.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥植所，北京100193；4.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京100102；5.中國人民解放軍第302醫(yī)院，北京100039；6.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川成都611137）[摘要]目的目的研究吐溫80、聚乙二醇1

4、2羥基硬脂酸酯、聚乙二醇300等輔料的安全與增溶情況。方法方法使用高效液相法測輔料的增溶情況，使用溶血性和刺激性評價輔料的安全性。結(jié)果結(jié)果輔料的安全與增溶情況相差較大。結(jié)論結(jié)論為更客觀的篩選適合注射劑的增溶性輔料，應(yīng)將其放入制劑中進行研究。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]注射劑；藥用輔料；增溶；安全StudyStudyononsafetysafetysolubilizationsolubilizationofofsolubilizingsolubili

5、zingexcipientsexcipientsusedusedinininjectionsinjectionsZHANGHaiyan12QIYu3LIAOYonghong3SHIxinyuan4YANDan5WUWeikui1YANGMing16(1.KeyLabatyofModernPreparationofTCMMinistryofEducationJiangxiUniversityofTCMNanchang330004China

6、2.KeyLab.ofAdvancedTechnologyofMaterials(ChineseEducationMinistry)SouthwestJiaotongUniversityChengdu610003China3.InstituteofMedicinalPlantDevelopmentChineseAcademyofMedicalSciencesBeijing100193China4.BeijingUniversityofT

7、CMBeijing100102China5.ChinaMilitaryInstituteofChineseMateriaMedica302MilitaryHospitalofChinaBeijing100039China6.ChengduUniversityofTCMChengdu611137China)[Abstract][Abstract]ObjectiveObjectiveTostudythesafetysolubilizatio

8、nofexcipientssolubilizingexcipientsusedininjections.MethodsMethodsMeasuredsolubilizationusingHPLChemolysisirritationwiththesafetyevaluationofexcipients.ResultsResultsSafetysolubilizationofsolubilizingexcipientsarediffere

9、nces.ConclusionConclusionAsmeobjectivescreeningfinjectionsolubilizingexcipientsitshouldberesearchintothepreparation.[Key[Keywds]wds]injectionssolubilizingexcipientssolubilizationsafety在中藥注射劑生產(chǎn)中，吐溫80被廣泛用于難溶性有效成分的增溶，然而，吐溫8

10、0并非普遍適用的增溶劑，其應(yīng)用存在一個安全適宜范圍。筆者認為，吐溫80增溶無效的中藥注射劑可進一步研究制劑中是否存在復(fù)方配伍增溶或?qū)で笃渌幱幂o料進行增溶。本研究對多種注射劑常用增溶性藥用輔料的安全與增溶進行了研究。為中藥注射劑增溶性輔料的選擇提供參考。所用增溶性藥用輔料包括膠束增溶劑：吐溫80、泊洛沙姆188、聚氧乙烯(35)氫化蓖麻油、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油、聚乙二醇12羥基硬脂酸酯(SolutolHS15)，潛溶劑：聚乙二醇4

11、00、聚乙二醇300、丙二醇，助溶：葡甲胺，包合增溶：羥丙基被他環(huán)糊精。1儀器與試藥儀器與試藥1.1儀器：Multiskanent酶標儀(美國ThermoElectron公司)；雷磁PHS3B型精密pH計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；Napco5410型二氧化碳孵箱(NAPCO，USA)；BCN1360型超凈工作臺(北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司)；XDS1B倒置顯微鏡(重慶光電儀器公司)；培養(yǎng)板，細胞刮刀(美國Cning公司)；UV75

12、5B紫外分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；QYC200恒溫搖床(上海福瑪實驗設(shè)備有限公司)；Agilent1100高效液相色譜儀：四元泵，在線脫氣機，自動進樣器，柱溫箱，DAD檢測器，HPChemStation數(shù)據(jù)處理工作站。1.2試藥：L6細胞(大鼠骨骼肌肌原細胞)培養(yǎng)6～10代，保持亞融合密度(以保持其成肌細生理鹽水(mL)1.5／／1.5蒸餾水(mL)／1.5／／受試物(mL)／／1.51.5試驗結(jié)果用下式計算各試驗管的溶血

13、率％:溶血率(％)＝(樣品管－陰性對照管－樣品對照管)(陽性對照－陰性對照)100％。參考評價標準：溶血率5％表明有溶血發(fā)生，并進行統(tǒng)計學(xué)處理。2.3增溶性實驗選用中藥部頒標準中8種中藥注射液的難溶成分為增溶研究對象，考察了8種增溶性輔料對8種難溶中藥成分的增溶作用，以評價增溶性輔料對中藥難溶成分的增溶適宜性。2.3.1輔料水溶液的制備:分別精密稱取丙二醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油吐

14、溫80、SolutolHS15、泊洛沙姆188適量，用雙蒸水將其分別配成1%、2%水溶液，備用。2.3.2供試液的制備：分別稱取50mg阿魏酸、反丁烯二酸于1.5mL離心管中，分別加入濃度為1.0%的上述輔料水溶液，每小時超聲15min，連續(xù)4h后，靜置，離心(12000r，10min)。取上清液稀釋10倍，作HPLC測定。稱取35mg橙花叔醇于5mL容量瓶中，分別加入濃度為1.0%的上述增溶劑溶液，超聲15minh，連續(xù)4h后，置10

15、mL分液漏斗中靜置16h。對于加入增溶劑P188、PEG400、PEG300、丙二醇的溶液，取下層清液適量，過0.45μm膜，各取10μL作HPLC測定；對于其余溶液，取下層清液100μL于10mL容量瓶內(nèi)，加20%乙腈定容至刻度，過0.45μm膜，作HPLC測定。分別稱取適量蘆丁和穿心蓮內(nèi)酯于具塞錐形瓶中，恒溫(20℃空氣浴)震蕩12h，分別加入濃度為2.0%的上述輔料水溶液，離心，上清液過濾，稀釋適宜倍數(shù)，作HPLC測定。2.3.3

16、色譜條件：流速：1mLmin1，柱溫：常溫，進樣體積：10μL，檢測波長參考文獻報道[13]，所用其它色譜條件均經(jīng)預(yù)實驗自定。2.4結(jié)果2.4.1安全性實驗結(jié)果表2造成L6細胞肌酸激酶(CK)殘率為50%和75%的10個樣品濃度表殘留百分率PEG300PEG400PEG600丙二醇P188聚氧乙烯氫化蓖麻油聚氧乙烯35蓖麻油SolutolHS15葡甲胺羥丙基被他環(huán)糊精50%殘留28.4329.326.728.2426.220.77260

17、.746.189.6775%殘留22.4817.615.722.8611.013.5218.580.344.131.98從表2可見，致L6細胞CK殘率為50%的樣品濃度，由高至低(低刺激→高刺激)為：PEG400PEG300丙二醇PEG600P188聚氧乙烯35蓖麻油聚氧乙烯氫化蓖麻油羥丙基被他環(huán)糊精葡甲胺聚乙二醇12羥基硬脂酸酯，而殘率75%的順序為：丙二醇PEG300聚氧乙烯35蓖麻油PEG400PEG600聚氧乙烯氫化蓖麻油P18