百菌清檢測方法

1、百菌清百菌清百菌清和福美雙在蘑菇上的殘留研究儀器：VARIANGC3800氣相色譜儀ECD檢測器及色譜工作站(美國VARIAN公司)1100高效液相色譜儀、紫外檢測器及色譜工作站(美國Agile公司)N1000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本EYELA公司)SHBⅢ循環(huán)式多用真空泵(鄭州長城科貿(mào)有限公司)高速勻漿機(江蘇金壇儀器廠)KQ100B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)12孔固相萃取裝置(美國Supelco公司)C18固相萃取柱(500mg

2、3mL)(美國Supelco公司)。百菌清(chlothalonil)標準品(99.9%)、福美雙(thiram)標準品(99.8%)購于百靈威化學技術(shù)有限公司30%菇豐(百菌清福美雙)可濕性粉百菌清前處理方法取100g左右縮分后的蘑菇樣品切碎混勻準確取其20g于100mL具塞三角瓶中加入25mL正己烷丙酮濃硫酸(98%)水(40∶20∶1∶1體積比)混合液在高速勻漿機中攪碎。用10mL丙酮沖洗勻漿機合并提取液超聲提取20min抽濾。用

3、少量丙酮洗滌濾渣濾液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中靜置棄水層。有機層過無水硫酸鈉40℃減壓濃縮。用氮氣吹干用甲醇水(20∶80體積比)定容至2mL待凈化。C18固相萃取柱分別用甲醇和水各5mL預淋活化。加入上述提取液1mL使其以1~2滴s的速度通過C18小柱用2.5mL水淋洗通空氣使柱干燥。最后用3mL二氯甲烷洗脫洗脫液用氮氣吹干乙酸乙酯定容至1mL待GC分析。氣相色譜條件色譜柱為毛細管柱DIKMADM5(30m0.25mm0.25μm)進樣口溫度3

4、00℃載氣為氮氣流速0.5mLmin程序升溫初始溫度150℃保留1min25℃min升溫至250℃保留5min檢測器溫度300℃進樣量1μL分流進樣分流比20。標準曲線制作準確稱取百菌清標準品配制成700mgL的百菌清乙酸乙酯標準溶液將其稀釋成6個濃度梯度(0.005、0.01、0.1、0.2、1、2μgmL)分別進樣以峰面積對進樣絕對量作標準曲線。百菌清在中藥材浙貝上的殘留動態(tài)研究11儀器與試劑儀器：島津GC一9A帶ECD檢測器；島津

5、CR一3A數(shù)據(jù)處理機；高速組織搗碎機。試劑：丙酮、無水硫酸鈉(分析純)；石油醚(光學純，60～90C)；標樣，百菌清含量為910。供試藥劑：75百菌清可濕性粉劑(日本SDSBiotechKK制造)。13分析方法131提取和凈化提?。悍Q取搗碎后的浙貝葉、塊根、土樣(經(jīng)風干過40目篩)各l0g，分別置于250mI具塞錐形瓶中，加入100mL丙酮，在振蕩器上振蕩30rain。將提取液分別濾入250mL的分液漏斗中，用2OmL丙酮洗滌殘渣，加入

6、50mL質(zhì)量分數(shù)為3的硫酸鈉水溶液，再分別加入40、30、30mL的石油醚萃取3次，將3次的提取液合并，濃縮至5mL一。凈化：用l6mm30cm的玻璃色譜柱，從下到上依次填入脫脂棉、4g無水硫酸鈉、l0g中性氧化鋁、4g無水硫酸鈉。先用約l0mI丙酮／石油醚(2：3，體積比)混合溶劑預淋柱子再分別將葉、塊根、土樣的濃縮液傾入凈化柱中，用l00mL燒瓶收集淋洗液。分別用丙酮／石油醚(2：3，體積比)混合溶劑60mL，分4次淋洗，收集淋洗液

7、，然后濃縮至約2mL，用石油醚定容至l0mL，供氣相色譜儀測定。132氣相色譜條件色譜柱：3mm16ITI玻璃柱，內(nèi)填15OV—l728OV一210chromosbw／AwDMCS(80～lO0目)；柱溫：l95C；汽化室及檢測器溫度：2l0C；載氣為N2(99999)；流速：5OmL／min；檢測器：ECD。固相萃取法測定水中百菌清和擬除蟲菊酯11試劑與儀器百菌清、甲氰菊酯、氰戊菊酯、氟氯菊酯(聯(lián)苯菊酯)、高效氯氰菊酯、氟氯氰菊酯(百

8、樹得)、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯等8種農(nóng)藥標樣(濃度均為100mg／L)均購自中國國家標準物質(zhì)研究中心。配成濃度為10mg／L的正己烷混合溶液作為工作溶液。固相萃取裝置和Cl8固相柱(3mL，500mg)由美國Supelco公司生1.5實驗內(nèi)容1.5.1淋洗液用量的篩選實驗根據(jù)1.4節(jié)中的操作步驟分別用60ml、80ml、100ml環(huán)己烷∶丁酮(20∶1)淋洗液淋洗層析柱并在每個層析柱中加入0.400mgkg百菌清標準溶液每個處理2次重復

9、以確定最佳的淋洗液用量。1.5.2樣品回收率實驗以不含百菌清的蔬菜為測定樣品根據(jù)1.4節(jié)的操作步驟分別在蔬菜樣品中加入0.040mgkg、0.400mgkg、4.000mgk的3個濃度百菌清標準溶液(每個處理重復3次)以確定該方法的準確度。樹皮中百菌清殘留量的測定1.1.1試劑所有試劑均為AR分析純水為蒸餾水。(1)丙酮:重蒸餾。(2)石油醚(沸程為60~90℃)取60~80℃間的餾分。(3)2%硫酸鈉水溶液。(4)無水硫酸鈉(優(yōu)級純)

10、在650℃活化1~3h儲于干燥器中備用。(5)百菌清標準品純度95%工業(yè)品級。1.1.2儀器容量瓶、量筒、燒杯、天平、分液漏斗、布氏漏斗、層析柱、微量注射器、微型植物試樣粉碎機(河北黃驊市齊家務科學儀器廠)、ZFQ85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海醫(yī)械專機廠)、電動振蕩器(康氏公私合營電工醫(yī)療器械廠)、Varian3400氣相色譜儀(用于電子捕獲檢測器)。1.2分析方法1.2.1標準溶液和添加水平的配制(1)百菌清標準溶液:準確稱取百菌清標準品0.

11、00670g使其精確至0.00002g用少量重蒸的丙酮溶解并用丙酮定溶至100mL這樣百菌清含量為0.67mgmL。(2)百菌清添加水平(標準工作液):用微量注射器取標準溶液8μL于測試試樣中充分混勻其百菌清含量為5.36106。1.2.2試驗部分(1)取樣:樹皮樣品作植物粉碎機至40目左右經(jīng)充分混勻后作為試驗樣品用冰箱貯存?zhèn)溆谩?2)稱取10.0g試驗樣品于100mL錐形瓶中加入50mL丙酮和0.5mL1N的鹽酸溶液振蕩30min過濾

12、用一定量的丙酮洗滌濾渣濾液用丙酮定容至100mL取定溶后的濾液20mL移入12.5mL分液漏斗中加入20mL2%硫酸鈉水溶液用石油醚201010mL分3次提取合并石油醚提取液過8g無水硫酸鈉柱脫水用少量石油醚洗滌無水硫酸鈉柱將提取液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上50℃濃縮至干用10mL石油醚定容供色譜測定用。1.3色譜條件載氣:高純氮純度為99.999%柱溫為180℃氣化室溫度為210℃檢測器溫度為280℃載氣流速為40mLmin紙走速為0.5cmmi

13、n色譜柱為OV210進樣量為0.5mL。蔬菜中百菌清與擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量的測定1實驗方法1.1儀器與試劑主要儀器有Aiglent6890N氣相色譜儀(美國安捷倫)μECD(微池電子捕獲檢測器)高速組織搗1.2分析步驟1.2.1試樣提取稱取25.00g切碎、均勻的蔬菜樣品置于100ml燒杯中加入50.0ml乙腈勻漿3min后過濾于盛有5~7g氯化鈉的100ml具塞量筒中收集濾液40~50ml蓋上塞子劇烈振蕩1min在室溫下靜止1h以上使