禾谷鐮刀菌 基因敲除 fgacl 致病性

1、禾谷鐮刀菌論文：小麥赤霉菌禾谷鐮刀菌論文：小麥赤霉菌FgAC1FgAC1基因敲除及功能研究基因敲除及功能研究【中文摘要】小麥赤霉病是一世界性真菌病害該病由多種鐮刀菌引起禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)是引發(fā)該病的優(yōu)勢種之一。由于該病原菌侵染使得小麥嚴重減產除侵染小麥外它還侵染大麥、玉米、高粱等其他禾谷類作物給人類帶來了嚴重的經濟損失。不僅如此小麥赤霉菌產生的真菌毒素還嚴重危害人、畜的健康。近年來全球對禾谷鐮刀菌開展了

2、大量的研究工作并取得了一系列重大進展。目前對禾谷鐮刀菌的研究逐步從傳統(tǒng)的植物病理學水平上升到功能基因組學水平上來其研究熱點逐漸集中在探索其致病機理和發(fā)現新的藥物作用靶點。本研究中作者采用基因敲除技術運用同源重組原理敲除小麥赤霉菌(Fusariumgraminearum)致病相關基因FgAC1并對其功能進行了分析。首先采用SplitMarker法構建基因敲除盒對野生型菌株PH1原生質體進行轉化獲得大量轉化子經潮霉素初篩后再對轉化子進行單孢

3、分離將分離得到的單孢子再進行PCR檢測然后再進行Southern雜交驗證最終獲得兩個缺失突變株。以該基因缺失株為研究對象禾谷鐮刀菌野生型PH1菌株為對照通過菌落形態(tài)觀察、生長速度測定、孢子形態(tài)觀察、...【英文摘要】FusariumHeadBlight(FHB)diseaseiscausedmainlybyFusariumgraminearum.Thispathogencausesthelossofproductionnotonlywh

4、eatbutalsobarleycnsghumanyotherkindsofcerealplantsthus2.2.1小麥赤霉菌PH1菌株基因組DNA的提取——CTAB法23242.2.2質粒pCB1003的制備24252.2.3FgAC1基因敲除盒的構建—SplitMarker法25292.3結果與分析29312.3.1PH1菌株基因組DNA的獲得292.3.2質粒pCB1003的獲得29302.3.3SplitMarker法構建Fg

5、AC1基因敲除盒30312.4討論31323FgAC1基因敲除和轉化子的鑒定32423.1實驗材料32343.1.1材料和試劑323.1.2培養(yǎng)基和主要試劑配方32333.1.3實驗器材33343.2實驗方法34383.2.1PH1原生質體的制備與轉化34353.2.2敲除突變體的篩選和鑒定35383.3結果與分析38403.3.1原生質體的轉化383.3.2篩選鑒定獲得2個FgAC1缺失突變體38403.4討論40424FgAC1敲除