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1、第十章酶的作用機制和酶的調(diào)節(jié)第一節(jié)酶的活性部位一、酶活性部位的特點只是酶分子的一小部分;通過誘導(dǎo)契合形成與底物互補的特定三維結(jié)構(gòu);通過次級鍵與底物相互作用;有一定的柔性(鄒承魯?shù)膶Ρ妊芯堪l(fā)現(xiàn)活性部位的柔性比其他部位更強);包括底物結(jié)合基團和催化基團,但二者的區(qū)分有時并不嚴(yán)格。二、研究酶活性部位的方法(一)側(cè)鏈基團的化學(xué)修飾法非特異性共價修飾(作用于酶分子中某一基團),酶活力喪失與修飾劑濃度成比例,底物或競爭性抑制劑可降低修飾作用。特異性
2、共價修飾(作用于特定酶的特定基團),如二異丙基氟磷酸(DFP)只與胰凝乳蛋白酶活性部位的絲氨酸羥基結(jié)合;親和標(biāo)記試劑可以與活性部位的特定基團共價定量結(jié)合,如對甲苯磺酰L苯丙氨酰氯甲基酮(TPCK)與胰凝乳蛋白酶活性部位絲氨酸羥基的結(jié)合。(二)動力學(xué)參數(shù)測定法(三)X射線晶體結(jié)構(gòu)分析法(四)定點誘變法第二節(jié)酶催化反應(yīng)的獨特性質(zhì)酵母醛縮酶的過渡態(tài)類似物與酶的親和力遠(yuǎn)大于其底物,說明酶可以引起底物的形變。小牛小腸腺苷脫氨酶的過渡態(tài)類似物與酶的
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