T-2毒素對豬原代肝細(xì)胞的毒性效應(yīng)機(jī)制研究.pdf

1、T-2 毒素屬單端孢霉烯族化合物，是該類毒素中毒性較強(qiáng)的一種，主要由鐮刀菌產(chǎn)生。T-2 毒素廣泛存在于谷物食品中，人類和動物暴露T-2 毒素會引發(fā)各種疾病，畜禽暴露T-2 毒素還可能致動物源食品殘留，間接危害人類健康。掌握該化合物的致毒機(jī)制對制定抗毒措施非常重要。本論文以不同劑量（0、0.02、0.05、0.1 μg/mL）T-2 毒素暴露的豬原代肝細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，運(yùn)用基因芯片雜交和熒光差異雙向電泳（2-D DIGE）結(jié)合MALDI-T

2、OF MS/MS 生物質(zhì)譜分析技術(shù)，分別從基因和蛋白水平研究了T-2 毒素對豬原代肝細(xì)胞的毒性效應(yīng)及其機(jī)制，得到如下主要結(jié)果：
　　 1.基因芯片結(jié)果顯示0.05μg/mL T-2 毒素暴露豬原代肝細(xì)胞后共有1193個(gè)基因產(chǎn)生顯著變化，包括562個(gè)表達(dá)上調(diào)基因和631個(gè)表達(dá)下調(diào)基因。這些變化的基因涉及氧化還原、免疫反應(yīng)、轉(zhuǎn)運(yùn)、蛋白酶解、細(xì)胞粘附、脂類代謝、凋亡等多個(gè)生物學(xué)過程。用Real-time 熒光定量PCR驗(yàn)證了參與肝臟外

3、源物質(zhì)代謝的P450 家族基因(CYP3A39、CYP3A46和CYP2C42)以及環(huán)氧化物酶EPHX1和羧酸酯酶CES1C4基因，結(jié)果上述基因mRNA表達(dá)均呈現(xiàn)不同程度的升高，與芯片變化趨勢相同，提示這些酶可能參與了T-2 毒素的體內(nèi)轉(zhuǎn)化和代謝過程。
　　 2.運(yùn)用熒光差異雙向電泳（2-D DIGE）技術(shù)研究0.05μg/mL T-2 毒素暴露后豬原代肝細(xì)胞蛋白表達(dá)譜變化，發(fā)現(xiàn)了260個(gè)差異蛋白。選擇劑量-效應(yīng)明確，且界限清晰