rna檢測技術在生殖道病原體診斷中的應用檢驗科2015

1、上海仁度生物科技有限公司Shanghai RenDu Biotechnology Co.,Ltd.,RNA檢測在生殖道病原體實驗室診斷中的應用,常見生殖道病原體及危害,生殖支原體(MG),沙眼衣原體(CT),解脲脲原體(UU),淋病奈瑟菌（NG）,沙眼衣原體(CT) 80%的女性和50%男性感染人群無臨床癥狀感染人群中無臨床癥狀 淋病奈瑟菌(NG) 50%的女性和10%的男性無臨床癥狀 解脲脲原體(UU)

2、75%的成人無臨床癥狀， 在孕婦中無癥狀比例達到80% 生殖支原體（MG） 50%以上感染人群無明顯臨床癥狀,Clinical Effectiveness Guideline for the Management of Chlamydia trachomatis Genital Tract Infection. 2001葉順章. 性傳播疾病的實驗室診斷.第二版. 102,沉默的殺手,European (IUSTI/

3、WHO) Guideline on the Diagnosis and Treatment of Gonorrhoea in Adults. 2009,歐美國家指南中建議篩查CT/NG,CT/NG,所有妊娠女性在第一次產檢時都要進行CT/NG檢查，并需在孕晚期進行復查。,CDC Grand Rounds: The Growing Threat of Multidrug-Resistant Gonorrhea。USA CDC 2013G

4、uidelines for the Laboratory Diagnosis of Mycoplasma genitalium Infections in East European Countries,2010Screening for Chlamydia and Gonorrhea: U.S. Preventive Services Task Force Recommendation Statement.2014,美國2014年預

5、防服務工作組(USPSTF),美國疾控 (US CDC)2010版《性病診療指南》,CT/NG,建議所有育齡人群中進行CT/NG檢查。,英國2013版國家臨床最優(yōu)化研究所(NICE)指南,建議所有育齡人群中進行CT檢查。,CT,Prevention of infection after induced abortion. Release date October 2010. SFP Guideline 20102,美國計劃生育學會（SF

6、P）《人工流產后預防感染指南》,人工流產手術患者應在術前接受預防性抗生素治療，從而降低其術后生殖道感染的風險。 對擬行人工流產手術患者，推薦術前進行沙眼衣原體和淋病奈瑟菌的篩查，對于檢測陽性患者依照規(guī)范治療后再施行手術。,歐美國家指南中建議篩查CT/NG,CT/NG,孕前和孕期保健指南2011.中華醫(yī)學會婦產科分會產科學組,黏液膿性宮頸炎的診斷和治療. 2012. 中華醫(yī)學會婦產科分會感染協(xié)作組,我國指南關于CT/NG的檢查建議,生

7、殖道病原體實驗室檢測方法,常用CT/NG/UU/MG檢測方法比較,國外診療指南推薦使用分子檢測法診斷生殖道病原體,CT/NG,美國疾控2014版《CT/NG實驗室診斷指南》,Recommendations for the Laboratory-Based Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae. USA CDC. March 2014.Unemo e

8、t al. Laboratory diagnosis of sexually transmitted infections, including human immunodeficiency virus, WHO,2013,WHO 2013版《性傳播疾病實驗室診斷方法》,WHO性傳播疾病實驗室診斷指南,,Unemo et al. Laboratory diagnosis of sexually transmitted。a.infe

9、ctions, including human immunodeficiency virus, WHO,2013,,WHO明確指出核酸檢測法（NAAT）是診斷MG的唯一可行方法;通過RNA檢測技術檢測生殖支原體比PCR方法要更準確。,WHO推薦用RNA技術檢測MG,RNA用于臨床檢驗的優(yōu)勢,靈敏度高，不易漏檢：RNA 拷貝數(shù)≥ DNA拷貝數(shù)（ e.g，16s rRNA 104copy/cell ）與臨床相關性好，可以區(qū)分“死菌”“活

10、菌”：病原體死亡，RNA很快降解，可進行療效評估和輔助判愈，減少無效治療，比如抗生素濫用。無創(chuàng)取樣：尿液檢測，顯著降低病人的采樣痛苦和檢測依從性。不易誤檢：靶標和擴增產物都是RNA，不易污染，不易出現(xiàn)假陽性。,RNA檢測技術,NASBA（Biomerieux）(NA sequence based amplification)TMA（Gen-probe）(Transcription Mediated Amplification)S

11、AT（上海仁度)（Simultaneous Amplification and Testing),SAT技術,SAT與PCR技術原理比較,中國診療指南推薦用SAT診斷生殖道病原體,梅毒、淋病、生殖器皰疹、生殖道沙眼衣原體感染診療指南。 中國疾控中心、中華醫(yī)學會皮膚性病學分會性病學組。2014。,中國 2014版 《梅毒、淋病、生殖器皰疹、生殖道沙眼衣原體感染診療指南》,CT/NG/UU/MG-SAT是國內唯一獲得CFDA認證的R

12、NA檢測試劑,,SAT擴增曲線圖（ABI 7500）,以CT-SAT為例,SAT技術可實現(xiàn)尿液檢測,樣本類型：宮頸拭子、尿液,金華中心醫(yī)院,浙大醫(yī)學院附屬婦產科醫(yī)院,臨床結果顯示拭子和尿液標本檢測陽性率基本一致。,鄭雅萍  袁青  陳偉,實時核酸恒溫擴增技術在奈瑟菌感染檢測中的應用,《浙江實用醫(yī)學》, 2015年01期,沙眼衣原體,淋病奈瑟菌,SAT技術具有高靈敏度，高特異性,男科多種樣本類型檢測（課題）,仁度CT

13、/NG/UU/MG RNA檢測試劑用于精液檢測,采用SAT技術對438例男性精液標本進行CT/NG/UU/MG檢測,結論：1、SAT技術可對精漿標本進行CT/NG/UU/MG檢測。2、與醫(yī)院傳統(tǒng)檢測方法相比，傳統(tǒng)檢測方法陽性標本，SAT檢測均為陽性；同時SAT還比傳統(tǒng)方法多檢出陽性標本。,仁度UU/MG RNA檢測試劑用于尿液和前列腺液檢測（同一患者同時采集尿液和前列腺液）,表1 99例患者兩種樣本類型UU檢測結果,表2 99例患者

14、兩種樣本類型MG檢測結果,結論：前列腺液檢測陽性樣本，尿液檢測均為陽性！ SAT可應用于前列腺液和尿液的檢測！,操作簡單-----小批量樣本檢測,,樣本,磁珠法提取核酸,恒溫擴增檢測,,,,結果報告,操作簡單----大批量樣本檢測,適用范圍廣-----多種檢測機型,CT/NG/UU/MG-SAT產品特點,CT/NG/UU/MG-SAT項目開展相關參數(shù),一般分子實驗室需增加的配套設備,小批量樣本操作,磁珠分離器,電

15、動吸引器,連續(xù)加樣槍,大批量樣本操作,全自動核酸提取儀,0.2mL金屬浴（96孔）,SAT生殖道檢測產品已在多家醫(yī)院使用,小結,取樣方便、自動化操作、準確性高是病原體分子診斷的發(fā)展趨勢RNA診斷技術解決了DNA診斷技術在CT/NG/UU/MG檢測中的一些局限，除了拭子還可進行尿液檢測，是目前所有商品化試劑中靈敏度、準確度最高的產品之一。仁度的MG-SAT是國內唯一可檢測MG的核酸檢測產品。,仁人愛物，為和度，和而不同,SAT檢測為您