蛋白激酶C抑制劑增強慢性髓系白血病細胞對三氧化二砷化療敏感性的研究.pdf

1、第一部分:目的:研究三氧化二砷(As<,2>O<,3>)對慢性髓系白血病細胞(K562)的作用特點及其機制,為擴大As<,2>O<,3>的臨床應用提供指導.方法:以不同濃度As<,2>O<,3>作用于K562細胞后,四唑鹽(MTT)比色試驗分析細胞的生長增殖;流式細胞術檢測細胞周期分布、細胞凋亡;流式細胞術和Western-Blot檢測細胞Survivin抗原表達;RT-PCR檢測細胞Survivin mRNA的表達.結果:2~10μm

2、ol/L的As<,2>O<,3>能有效抑制K562細胞增殖,但未能誘導明顯的細胞凋亡.周期分析顯示,As<,2>O<,3>作用后G<,2>/M周期細胞比例顯著增多;同時G<,2>/M細胞周期依賴性表達的凋亡抑制蛋白Survivin mRNA和蛋白表達水平增加.結論:As<,2>O<,3>明顯抑制K562細胞的生長,其機制主要是誘導G<,2>/M期細胞周期停滯,可能是K562細胞對As<,2>O<,3>誘導凋亡抵抗的機制之一;同時Surv

3、ivin表達上調(diào)進一步抑制了K562細胞對As<,2>O<,3>誘導凋亡的敏感性.第二部分:目的:研究G?976是否能去除As<,2>O<,3>誘導的G<,2>/M期細胞周期阻滯,增強慢性髓系白血病(CML)細胞(K562)對As<,2>O<,3>誘導凋亡的敏感性.方法:K562細胞經(jīng)不同濃度G?976和As<,2>O<,3>(5μmol/L)作用后,流式細胞術檢測細胞周期變化,臺盼藍排斥試驗檢測細胞活力,四唑鹽(MTT)比色試驗分析細

4、胞的生長增殖.結果:細胞周期檢測發(fā)現(xiàn),K562細胞經(jīng)As<,2>O<,3>作用24h和48h后,G<,2>/M期細胞比例分別為(38.02±7.70)％和(32.58±7.43)％,未出現(xiàn)明顯凋亡;50nmol/L G?976與As<,2>O<,3>聯(lián)合作用后,G<,2>/M期細胞分別減少至(23.24±2.93)％和(16.18±1.60)％,凋亡細胞分別增加至(11.82±2.31)％和(27.80±22.89)％;且其變化呈G?9