api菌種鑒定系統(tǒng)介紹

1、API菌種鑒定系統(tǒng)介紹,API鑒定系統(tǒng)是由法國生物-梅里埃公司生 產(chǎn)的細(xì)菌數(shù)值分類分析鑒定系統(tǒng)?？设b定的細(xì) 菌大于800種。 API系統(tǒng)用于細(xì)菌鑒定的產(chǎn)品有15種, 別 有相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫。,A P I 鑒定系統(tǒng)的組成,A P I 鑒定系統(tǒng)的主要部分是 API試劑條、輔助試劑及結(jié)果判讀系統(tǒng)組成,鑒定主要依據(jù)API試劑條的生化反應(yīng)結(jié)果，將一種細(xì)菌與其它細(xì)菌相鑒別,并用% id (鑒定百分率) 表示每種細(xì)菌的可能性

2、。,1.發(fā)酵或同化抑制試驗(yàn): 是根據(jù)待測菌是否受到反應(yīng)杯中特異抑制物的抑制而不能產(chǎn)生分解代謝或不能生長來判斷。,2.酶試驗(yàn): 根據(jù)待測菌含有相應(yīng)的酶就可分解底物, 再通過顯色反應(yīng)來判斷。如堿性磷酸酶、氧化酶、B- 半乳糖苷酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶、色氨酸脫羧酶、吲哚產(chǎn)生等。,3.其它生化反應(yīng): 如硝酸鹽還原酶、七葉苷、明膠、硝酸鹽還原等。,4.發(fā)酵試驗(yàn): 為碳水化合物與酸的分解代謝試驗(yàn), 結(jié)果是通過PH 的變化引起酸堿指示劑顏色的

3、改變來判斷。如葡萄糖、乳糖、甘露糖、蔗糖、甘露醇、肌醇、山梨醇等。,5.同化試驗(yàn): 根據(jù)待測菌能否利用反應(yīng)杯中的單一碳水化合物作為碳源而得以生長來判斷。如葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、甘露醇、N - 乙酰葡糖銨、葵酸、乙二酸、蘋果酸等。,常見的生化反應(yīng),API試劑條,API試劑條由透明的PVC材料制成, 不同的試劑條有不同數(shù)量 的反應(yīng)杯, 每個反應(yīng)杯內(nèi)包被有相應(yīng)的干燥生化基質(zhì),在A P I 鑒定系統(tǒng)中有15 個鑒定系列, 20 余個品

4、種, 對于不同的細(xì)菌，分別使用不同的試劑條,某些試驗(yàn)在孵育完成后需添加試劑才能進(jìn)行判斷。如吲哚試驗(yàn)需添加IND 或James 試劑, V P 試驗(yàn)需添加V P1、V P2 試劑, 硝酸鹽還原試驗(yàn)需添加N IT1、N IT 2 試劑、色氨酸脫羧酶試驗(yàn)需添TDA 試劑等,輔助試劑,結(jié)果判讀系統(tǒng),A P I LAB Plus 分析軟件,原理：生化結(jié)果組合跟資料庫內(nèi)的典型條目作比較，經(jīng)計(jì)算後得出： 鑒定百比率（%Id）

5、＝機(jī)會率 與數(shù)據(jù)庫中各個項(xiàng)的接近程度來確認(rèn)未知菌是否屬于某一個分類單位(科,屬,種) T值（T index）=變異程度 待檢菌的分類單位被確定以后，T 值表示其生化反應(yīng)結(jié)果與該菌最典型生化譜的接近程度,鑒定前常規(guī)的分離培養(yǎng)是必不可少的。 分離培養(yǎng)后挑選可疑菌落進(jìn)行預(yù)試驗(yàn), 如革蘭氏 染色、鏡檢、氧化酶實(shí)驗(yàn)、觸酶試驗(yàn)等。 預(yù)試驗(yàn)起定向的作用, 根據(jù)定向的結(jié)果

6、選用不同的A P I 試劑條。,鑒定前的準(zhǔn)備,桿菌,球菌,接觸,接觸,革蘭氏,革蘭氏,桿菌,球菌,氧化,氧化,革蘭氏,革蘭氏,革蘭氏染色(compare with selective medium &morphology),數(shù) 碼 鑒 定,,將每3個生化反應(yīng)分成一組,每組中陽性結(jié)果分別標(biāo)記為1、2、4 將每組數(shù)值相加,得到一組編碼,結(jié)果判讀,,極好的鑒定 % id >99.9

7、 T >0.75 非常好的鑒定 % id >99 T >0.5 好的鑒定 % id >90 T >0.25 可接受的結(jié)果 % id >80 T >0 不可接受的結(jié)果 % id <80,每一個鑒定結(jié)果都會附有相應(yīng)的評語- 鑒定結(jié)果的可信性,,彎