antibody抗體 ppt課件

1、抗體（Ab）,內(nèi) 容,一、基本概念二、免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu)三、免疫球蛋白的特點與功能四、抗體的生物學(xué)活性五、免疫球蛋白的免疫原性六、人工制備的抗體,抗體（antibody,Ab)是B細(xì)胞識別抗原后增殖分化為槳細(xì)胞所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，主要存在于血清等體液中，能與相應(yīng)抗原特異性地結(jié)合，具有免疫功能。免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）是指具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白,一、基本概念：,,抗體和免疫球蛋白

2、的關(guān)系: 抗體都是免疫球蛋白，并非所有免疫球蛋白都具有抗體活性。分泌型Ig(sIg)和膜型Ig(mIg),二、免疫球蛋白的分子結(jié)構(gòu),,（一）免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu),四肽鏈結(jié)構(gòu) ，鏈間二硫鍵連接兩條重鏈（H）和兩條輕鏈（L）氨基端和羧基端。,(1)根據(jù)重鏈分類： 根據(jù)重鏈靠近羧基末端氨基酸組成及排列順序不同，將重鏈分為種：γ、α、μ、δ、ε 根據(jù)重鏈組成不同，將Ig分為五類：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE(2)根據(jù)輕

3、鏈分型：κ、λ型 天然Ig分子中，重鏈同類，輕鏈同型,1.重鏈與輕鏈,根據(jù)氨基酸排列順序的不同分為： 可變區(qū)（V）和恒定區(qū)（C）可變區(qū)（V區(qū)）：氨基酸組成、排列順序變化較大恒定區(qū)（C區(qū)）：氨基酸數(shù)量、種類、排列順序及 含糖量都比較穩(wěn)定,2.可變區(qū)與恒定區(qū),,,超變區(qū)（ HVR）輕鏈：24-34、50-56、89-97重鏈：31-35、50-65、95-102框架區(qū)（FR）,,超變區(qū)決定簇互補(bǔ)區(qū)（CDR）

4、 Ig的抗原結(jié)合部位， 該部位也稱為CDRIg的獨特型決定簇,位于CH1與CH2之間，含有豐富的脯氨酸，因此易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。,3. 鉸鏈區(qū),4.J鏈和分泌片,J鏈?zhǔn)且粭l多肽鏈，富含半胱氨酸，由漿細(xì)胞合成，以二硫鍵的形式共價結(jié)合到Ig的重鏈上。分泌片：由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌，以非共價形式結(jié)合到二聚體上，保護(hù)IgA，使之不受環(huán)境中酶的破壞，并介導(dǎo)IgA的轉(zhuǎn)運,（二）免疫球蛋白的水解片段,木瓜蛋白酶(

5、papain)水解IgG：得到兩個相同的Fab段和一個Fc段。,,,,（二）免疫球蛋白的水解片段,胃蛋白酶(pepsin)裂解IgG：得到一個具有雙價活性的F（ab’）2段和若干個小分子多肽碎片（pFc’）,,,（三）免疫球蛋白的功能區(qū),Ig的H鏈、L鏈每隔110個氨基酸即由鏈內(nèi)二硫鍵連接形成一個能行使特定功能的球性單位，稱為Ig的結(jié)構(gòu)域或功能區(qū)（domain）。,VH和VL:識別和結(jié)合抗原CH和CL:同種異型的遺傳標(biāo)志CH2:補(bǔ)體

6、C1q結(jié)合位點， IgG可通過胎盤CH3/CH4:與多種細(xì)胞表面的FcR結(jié)合(免疫調(diào)理,I型超敏反應(yīng)),各功能區(qū)的作用,,IgG多為單體，是唯一能通過胎盤的抗體據(jù)重鏈（?鏈）免疫原性，IgG分4個亞型,（一）IgG,三、五類免疫球蛋白的特性與功能,,IgG1、IgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體血清含量最高(75%～85%),也是丙種球蛋白的主要成分半衰期較長（16～24d）主要的抗感染抗體(具有抗菌、抗病毒、中和毒素和

7、免疫調(diào)理作用)參與II、III型超敏反應(yīng),IgG的特點,為五聚體，是分子量最大的Ig，稱巨球蛋白。IgM激活補(bǔ)體、結(jié)合抗原、免疫調(diào)理作用比IgG強(qiáng)天然血型抗體是IgM,（二）IgM,IgM是個體發(fā)育中最早產(chǎn)生的抗體，胚胎晚期已能合成，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，提示胎兒曾有宮內(nèi)感染IgM是抗原刺激后出現(xiàn)最早的抗體，半衰期短，故檢測IgM水平可用于傳染病的早期診斷。mIgM是B細(xì)胞抗原受體（BCR）的主要成分也可參與II、

8、III型超敏反應(yīng),IgM的特點,分為血清型和分泌型兩種。血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生，為單體。而分泌型IgA（sIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細(xì)胞產(chǎn)生，為雙體、三體或多體。sIgA主要存在于唾液、淚液、以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。,(三)IgA,IgA的特點,參與皮膚粘膜的局部抗感染作用初乳中含有高濃度的sIgA----母乳喂養(yǎng)通過替代途徑激活補(bǔ)體參與Ⅲ型超敏反應(yīng)

9、,sIgA的合成和主要作用部位在黏膜,IgD是B細(xì)胞的重要表面標(biāo)志B細(xì)胞的分化過程中首先出現(xiàn)mIgM，mIgD的出現(xiàn)標(biāo)志著B細(xì)胞成熟對防止免疫耐受有一定作用,(四)IgD,血清中含量最低可與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞上的高親和力Fcε受體（FcεRⅠ）結(jié)合，引起Ⅰ型超敏反應(yīng)FcεRⅡ分布于巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞,(五)IgE,四、免疫球蛋白的生物學(xué)活性,V區(qū)的功能: 識別和結(jié)合特異性抗原C區(qū)的功能：

10、 ☆激活補(bǔ)體:IgM,IgG1-3;IgG4,IgA,IgE ☆結(jié)合細(xì)胞表面的Fc受體發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC作用、介導(dǎo)I型超敏反應(yīng) ☆穿過胎盤和黏膜—選擇性傳遞,,五、免疫球蛋白的免疫原性,免疫球蛋白的不同結(jié)構(gòu)區(qū)其免疫原性不同：同種型（isotype）：種屬特異性標(biāo)志同種異型（allotype）：個體特異性標(biāo)志獨特型（idioto

11、pe）：免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),同種型(isotype):同一物種內(nèi)所有個體共同具有的Ig抗原特異性結(jié)構(gòu),同種型Ig的抗原決定簇存在于CH、CL據(jù)CH的不同，Ig分類、亞類據(jù)CL的不同，Ig分型、亞型,,,,同種異型（allotype)：同一物種內(nèi)不同個體間的Ig免疫原性的差別,,,獨特型（idotype)：同一個體內(nèi)不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的Ig其超變區(qū)各自具備獨特的抗原決定簇結(jié)構(gòu),多克隆抗體：多個抗原決定基——機(jī)體——多種抗體的混合物單克隆抗

12、體（monoclonal antibody, mAb）：由一個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、針對某一特定抗原決定簇的高度特異性抗體基因工程抗體,六、人工制備的抗體,,,,,單克隆和多克隆抗體的比較和用途,特異性,敏感性,均一性,McAb,PcAb,,,低,差,無,高,強(qiáng),有,1、用于免疫學(xué)檢測，輔助臨床診斷,2、McAb用于親和層析，分離微量可溶性抗原,3、標(biāo)記的McAb用于基礎(chǔ)研究，了解細(xì)胞分化等,4、制備生物導(dǎo)彈用于腫瘤、移植等的臨床治療。,