胚胎質(zhì)量評估

1、胚胎質(zhì)量評估,胚胎質(zhì)量是妊娠成功的關(guān)鍵因素之一，胚胎的發(fā)育潛能，即胚胎質(zhì)量的評估直接影響移植胚胎的篩選和妊娠結(jié)局。,,評估胚胎質(zhì)量的方法： 傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評估 動態(tài)觀測技術(shù) 胚胎“組學(xué)”評估,,目前，胚胎質(zhì)量的評估以傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法為主，即根據(jù)胚胎受精與分裂的規(guī)律，在幾個特定的時間點，觀察胚胎形態(tài)，以形態(tài)學(xué)為標(biāo)準(zhǔn)對胚胎質(zhì)量進(jìn)行評估和分級，選擇級別最高的胚胎進(jìn)行移植。,一、傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)評估,1、原核評分：一般IVF或I

2、CSI后16-18小時觀察原核，主要圍繞原核及核仁大小、數(shù)目和分布情況評估。Scott-Z的評價標(biāo)準(zhǔn)，將原核分成Z1、Z2、Z3和Z4四類。,,Z1：雌雄原核中核仁數(shù)量相等且同時都極化。Z2：雌雄原核中核仁數(shù)量相等但同時散在分布,,Z3：雌雄原核中有相同的核仁數(shù)量但一個原核中為極化分布而另一個中為散在分布或者兩原核中核仁數(shù)量和/或大小不等（數(shù)量不等＞1）或核仁過大或過小。Z4：雌雄原核沒有連接或大小不等或沒有位于合子的中

3、心。,,z1、z2級原核通常會發(fā)育為較優(yōu)質(zhì)的胚胎，可獲得較高的妊娠率；Z3、Z4級原核發(fā)育的胚胎通常發(fā)育潛力潛力低下，染色體異常幾率增加。 在原核的發(fā)育過程中，核仁的分布和排列并不是固定的，所以原核期合子形態(tài)的評估應(yīng)與胚胎形態(tài)評估聯(lián)合應(yīng)用。,,2、卵裂期胚胎形態(tài)的評估 包括卵裂速度、卵裂球的大小、形狀、一致性、胞漿碎片比例。,,,WIH評分：胚胎分?jǐn)?shù)=細(xì)胞數(shù)評分+碎片評分+對稱評分,,每一個胚胎按其細(xì)胞數(shù)、碎片程

4、度、對稱性記錄-C-F-S-，如8CF4S1代表其為8細(xì)胞胚胎，碎片評分4分，對稱性評分1分。D3胚胎中，8CF4S1為優(yōu)質(zhì)細(xì)胞胚胎，5CF0S0為一多碎片不對稱5細(xì)胞胚胎。,胚胎分級評分法Ⅰ級：胚胎卵裂球呈圓/卵圓形，大小均勻，形態(tài)規(guī)則，胞質(zhì)均勻清晰，透明帶完整，無碎片或碎片少于5%。Ⅱ級：卵裂球形態(tài)不規(guī)則，大小略不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片10%～20%。Ⅲ級：卵裂球大小明顯不均，可有明顯的形態(tài)不規(guī)則，胞質(zhì)可有顆?，F(xiàn)象，碎片

5、21%～50%，透明帶完整。Ⅳ級：卵裂球大小嚴(yán)重不均，胞質(zhì)可有嚴(yán)重顆粒現(xiàn)象，碎片多于50%；或24小時無細(xì)胞分裂。注：I、II、III級胚胎在發(fā)育中如果出現(xiàn)以下情況，胚胎評級時在形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)上降一級： a、授精后20小時內(nèi)未見到原核，48小時證實為延遲受精的胚胎。 b、取卵后48小時超過8細(xì)胞，或72小時未超過5細(xì)胞,,各實驗室培養(yǎng)體系、操作方法等不同導(dǎo)致胚胎的發(fā)育速度不一致，應(yīng)參照ESHRE發(fā)布Istanbul共識（

6、2011）找出符合各自中心最佳觀測點。,,胚胎觀察時間點設(shè)置（引自 Istanbul共識）,胚胎的形態(tài)學(xué)評級（引自 Istanbul共識）,3、囊胚評估（ Gardner標(biāo)準(zhǔn)） 主要從囊胚的擴(kuò)張狀態(tài)、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)行評估,,首先根據(jù)囊胚的擴(kuò)張和孵出狀態(tài)分為1-6級： 1級：早期囊胚，囊胚腔小于胚胎體積的一半 2級：囊胚，囊胚腔大于或等于胚胎體積的一半 3級：完全囊胚，囊胚腔充滿整個胚胎

7、 4級：擴(kuò)張囊胚，囊胚大于整個胚胎 5級：正孵出的囊胚，滋養(yǎng)細(xì)胞開始從透明帶突出 6級：已孵出的囊胚，囊胚完全從透明帶孵出,,然后對3-6級的囊胚進(jìn)一步評價內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM）和滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育： ICM評分：A：很多細(xì)胞，包裹緊密 B：少數(shù)細(xì)胞，疏松結(jié)合 C：很少細(xì)胞 滋養(yǎng)層評分：A：很多細(xì)胞形成連續(xù)

8、上皮 B：少數(shù)細(xì)胞形成疏松上皮 C：很少細(xì)胞 根據(jù)這個分級方法，第5天最好的囊胚評分應(yīng)該是4AA,,傳統(tǒng)的胚胎形態(tài)學(xué)評分方法，需要將胚胎從培養(yǎng)箱中取出進(jìn)行觀察，這樣會因為培養(yǎng)環(huán)境改變而不利于胚胎發(fā)育。胚胎學(xué)動態(tài)觀察技術(shù)可在保證胚胎穩(wěn)定發(fā)育的生長環(huán)境下，對胚胎進(jìn)行全程觀測，可以為胚胎學(xué)家提供

9、更多胚胎發(fā)育過程形態(tài)學(xué)及動力學(xué)信息，減少胚胎評估的主觀性。,二、動態(tài)觀測技術(shù),獲取胚胎發(fā)育客觀數(shù)據(jù)，支持準(zhǔn)確優(yōu)選最佳胚胎,時差胚胎成像系統(tǒng)（time-lapse）,局限性：時差胚胎成像系統(tǒng)價格昂貴，單次觀察的標(biāo)本數(shù)量有限等缺點，限制該技術(shù)的推廣應(yīng)用。是否可以提高妊娠結(jié)局并常規(guī)應(yīng)用與臨床尚存爭議，需要大量前瞻性研究來證明其有效性,,基因組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)轉(zhuǎn)錄組學(xué)代謝組學(xué),三、胚胎“組學(xué)”評估,1、代謝組學(xué) 通過檢測胚胎

10、代謝產(chǎn)物來評估胚胎發(fā)育潛能，因具有非侵人性、低風(fēng)險等優(yōu)點而成為目前研究熱點。,,胚胎代謝組學(xué)評分方法的相關(guān)技術(shù)平臺尚未完全建立，僅有限的幾種代謝物可以進(jìn)行檢測并作為評估胚胎發(fā)育的指標(biāo)。只有當(dāng)多種代謝物可以同時進(jìn)行檢測并全面反應(yīng)胚胎代謝組學(xué)圖譜的時候，胚胎代謝組學(xué)評分方法的預(yù)測價值才能完全體現(xiàn)。,,2、基因組學(xué) 胚胎染色體的異常是影響胚胎發(fā)育潛能的重要因素。隨著分子生物學(xué)技術(shù)和PGD的發(fā)展，囊胚或極體活檢結(jié)合胚胎全染色體分析的

11、PGS（pre-implantation genetic screening）技術(shù)開始應(yīng)用于臨床，為診斷單基因疾病提供了有效檢測手段，可提高單基因病和染色體異常患者的臨床妊娠率和降低自然流產(chǎn)率。,,隨著新一代高通量測序（next generation sequencing，NGS)）技術(shù)的出現(xiàn)及其檢測費用降低，可實現(xiàn)胚胎的全基因組擴(kuò)增與測序。NGS技術(shù)可以更準(zhǔn)確、有效地檢測胚胎染色體異常。一旦渡過科研與臨床轉(zhuǎn)化階段，NGS技術(shù)將在PGD