附紅細(xì)胞體感染小鼠的血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)及藥物治療效果的研究.pdf

1、目的：檢測(cè)附紅細(xì)胞體感染小鼠后的血液學(xué)指標(biāo)變化；探討附紅細(xì)胞體的發(fā)病機(jī)理；觀察藥物對(duì)附紅細(xì)胞體感染小鼠的治療效果。 方法：1.附紅細(xì)胞體感染小鼠的血液學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：采用了光學(xué)顯微鏡鏡檢、透射電鏡觀察以及PCR檢測(cè)方法，鑒定小鼠感染附紅細(xì)胞體的模型的建立；測(cè)定紅細(xì)胞膜ATP酶活性、血液常規(guī)指標(biāo)、紅細(xì)胞超氧化物歧化酶活性、紅細(xì)胞免疫功能以及一氧化氮含量。2.附紅細(xì)胞體感染小鼠的藥物療效觀察：隨機(jī)將48只感染附紅細(xì)胞體的小鼠分成4組，每

2、組12只。第一組為感染組，第二組為感染后不治療組稱為陽性對(duì)照組。第三組為青蒿琥酯治療組，劑量為60mg/kg，第四組為丁胺卡那霉素聯(lián)合青蒿琥酯治療組，丁胺卡那霉素的劑量為400mg/kg，青蒿琥酯的劑量為60mg/kg，經(jīng)靜脈注射連續(xù)治療7天。再取12只正常小鼠為陰性對(duì)照。每天從感染的小鼠各采血制成鮮血壓滴標(biāo)本，油鏡鏡檢。觀察其感染率，測(cè)定血液常規(guī)指標(biāo)，在治療7天后，對(duì)血樣進(jìn)行PCR檢測(cè)。 結(jié)果：鮮血滴片鏡檢和瑞氏—姬姆薩染色涂

3、片均能清晰地觀察到附紅細(xì)胞體的形態(tài)結(jié)構(gòu)，通過透射電鏡可以觀察到附紅細(xì)胞體的超微結(jié)構(gòu)，并發(fā)現(xiàn)其附著于紅細(xì)胞表面。根據(jù)已有的豬附紅細(xì)胞體特異性片段設(shè)計(jì)引物，成功地?cái)U(kuò)增得到801bp的PCR產(chǎn)物。附紅細(xì)胞體感染組小鼠的紅細(xì)胞數(shù)量顯著低于正常組小鼠的紅細(xì)胞數(shù)量（P<0.01），附紅細(xì)胞體感染組小鼠的血紅蛋白含量、免疫復(fù)合物（RBC—C3b）花環(huán)率、紅細(xì)胞的ATP酶含量顯著低于正常組小鼠的血紅蛋白含量、免疫復(fù)合物（RBC—C3b）花環(huán)率、紅細(xì)胞的

4、ATP酶含量（P<0.05），附紅細(xì)胞體感染組小鼠的紅細(xì)胞壓積、超氧化物歧化酶活性略低于正常組小鼠的紅細(xì)胞壓積、超氧化物歧化酶活性（P<0.05），附紅細(xì)胞體感染組小鼠的嗜中性粒細(xì)胞數(shù)略低于正常組小鼠的嗜中性粒細(xì)胞數(shù)（P<0.05），附紅細(xì)咆體感染組小鼠的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、一氧化氮含量略高于正常組小鼠的白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、一氧化氮含量（P>0.05），附紅細(xì)胞體感染組小鼠的紅細(xì)胞C3b受體（RBC—IC）花環(huán)率顯著高于正常組小

5、鼠的紅細(xì)胞C3b受體（RBC—IC）花環(huán)率（P<0.05）。經(jīng)過青蒿琥酯聯(lián)合丁胺卡那霉素治療后，附紅細(xì)胞體感染率逐漸降低，且紅細(xì)胞已恢復(fù)正常；單用青蒿琥酯治療結(jié)束后，紅細(xì)胞基本恢復(fù)正常；陽性對(duì)照組在未經(jīng)治療后的第7d附紅細(xì)胞體的感染率為23.08％，與青蒿琥酯聯(lián)合丁胺卡那霉素組、青蒿琥酯治療組相比有顯著性差異（P<0.05）。經(jīng)藥物治療后，青蒿聯(lián)合丁胺卡那霉素組和青蒿琥酯組的紅細(xì)胞數(shù)極顯著增加（P<0.01），血紅蛋白含量顯著增加（P<

6、0.05），各組的紅細(xì)胞壓積相比無顯著性差異（P>0.05）。各組小白鼠血液樣本經(jīng)PCR檢測(cè)，感染組和陽性對(duì)照組出現(xiàn)特異性片斷，青蒿琥酯組和青蒿聯(lián)合丁卡組未擴(kuò)增出特異性片斷。 結(jié)論：1.采用鮮血滴片鏡檢，瑞氏—姬姆薩染色鏡檢，透射電鏡鏡檢的方法均可作為檢測(cè)附紅細(xì)胞體的手段。但光學(xué)顯微鏡鏡檢存在一定的不足和缺陷。采用PCR檢測(cè)和透射電鏡檢測(cè)方法可以特異性檢測(cè)出附紅細(xì)胞體。2.附紅細(xì)胞體可以感染SPF昆明小鼠。采用6周齡昆明小鼠作為